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16S rDNA克隆文库方法分析好氧颗粒污泥细菌组成 被引量:33
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作者 李建婷 纪树兰 +3 位作者 刘志培 秦振平 刘缨 杨媛媛 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1218-1223,共6页
采用构建16SrDNA克隆文库方法对好氧颗粒污泥的细菌种群多样性进行研究.随机测定了82个克隆子序列(700 bp),Blast比对结果表明,好氧颗粒污泥中微生物群落具有高度多样性,可分为7个主要类群,其中,β变形菌(β-Proteobacteria)类群和鞘脂... 采用构建16SrDNA克隆文库方法对好氧颗粒污泥的细菌种群多样性进行研究.随机测定了82个克隆子序列(700 bp),Blast比对结果表明,好氧颗粒污泥中微生物群落具有高度多样性,可分为7个主要类群,其中,β变形菌(β-Proteobacteria)类群和鞘脂杆菌(Sphingobacteria)类群在文库中所占比例最大,分别为34.16%和30.50%;其次是Candidate division TM7类群、黄杆菌(Flavobacteria)类群和γ变形菌(γ-Proteobacteria)类群,分别为9.76%,7.32%和7.32%;放线菌(Actinobacteria)类群和α变形菌(α-Proteobacteria)类群所占比例相对较小,分别为4.88%和1.22%.序列分析结果表明,好氧颗粒污泥中不仅含有对好氧颗粒污泥形成和稳定运行具有重要作用的食酸菌属(Acidovorax)细菌、假单胞菌(Pseudomonas)等细菌,还含有对CODCr和氨氮具有很好去除能力的Micropruina glycogenica,丛毛单胞菌科(Comamonadaceae)等细菌. 展开更多
关键词 好氧颗粒污泥 16SrDNA克隆文库 细菌组成
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应用16S rDNA克隆文库技术解析四川泡菜发酵过程中的细菌多样性 被引量:9
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作者 张安 梁会朋 +2 位作者 孟霞 范娟 张文学 《中国调味品》 CAS 北大核心 2017年第2期1-6,共6页
采用构建16SrDNA基因文库的方法,对四川泡菜发酵过程中细菌多样性进行了研究。结果表明:所得到的1190个克隆子分布于17个类群,泡菜发酵1天细菌多样性最高,发酵31天细菌多样性最低。发酵前期的绝对优势菌为Pseudomonas(35.0%),Vibrio(56.... 采用构建16SrDNA基因文库的方法,对四川泡菜发酵过程中细菌多样性进行了研究。结果表明:所得到的1190个克隆子分布于17个类群,泡菜发酵1天细菌多样性最高,发酵31天细菌多样性最低。发酵前期的绝对优势菌为Pseudomonas(35.0%),Vibrio(56.9%),主要优势菌为Lactobacillus(29.5%),Acinetobacter(15.4%),Halomonas(14.3%),Sphingobacterium(12.9%);发酵中期的绝对优势菌为Lactobacillus(94.0%),主要优势菌为Vibrio(12.8%);发酵后期的绝对优势菌为Lactobacillus(50.3%),主要优势菌为Vibrio(19.8%),Halomonas(13.0%),Arcobacter(11.1%),此结果揭示了四川泡菜发酵过程中的细菌多样性,可为四川泡菜的基础研究提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 四川泡菜 16S RDNA 克隆文库 细菌多样性
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16S rDNA克隆文库方法对制药废水处理系统中微生物多样性的研究 被引量:11
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作者 徐成斌 孟雪莲 +4 位作者 马溪平 张利红 李法云 付保荣 惠秀娟 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期1236-1240,共5页
采用分子生物学构建16SrDNA克隆文库的方法对制药废水交替流生物反应器内的微生物群落进行了多样性研究,该反应器对CODcr、氨氮、石油类化合物以及多种特殊污染物均有较高的去除效率。代表序列的BLAST比对结果表明微生物群落具有高度多... 采用分子生物学构建16SrDNA克隆文库的方法对制药废水交替流生物反应器内的微生物群落进行了多样性研究,该反应器对CODcr、氨氮、石油类化合物以及多种特殊污染物均有较高的去除效率。代表序列的BLAST比对结果表明微生物群落具有高度多样性,优势菌群为Proteobacteria,占78.6%。微生物群落分属7个不同纲,优势顺序为Alphaproteobacteria(39.8%),Betaproteobacteria(23.5%),Gammaproteobacteria(14.3%),Chlorobi1(6.3%),Firmicutes(4.1%),Flavobacteria(1.0%),Deltaproteobacteria(1.0%)。使用VectorNTISuite6.0软件对50个OTU的代表序列和NCBI基因库中最相近的已知细菌16SrDNA序列绘制系统进化树,表明克隆子与已知菌之间的基因系统进化关系。 展开更多
关键词 制药废水 微生物多样性 16SrDNA克隆文库
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用16S rDNA克隆文库法分析患病刺参幼苗的菌群结构 被引量:4
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作者 王轶南 王俊杰 +4 位作者 王姣姣 刘志敏 于卓 丁君 常亚青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期205-211,共7页
采用16S rDNA克隆文库法对某刺参养殖场患病刺参Apostichopus japonicus幼苗(体长为3~5 cm)表皮的菌群结构进行分析。结果表明:化皮参苗病灶组织和未明显化皮参苗表皮菌群均由γ-变形菌纲、β-变形菌纲和α-变形菌纲组成,优势菌为γ... 采用16S rDNA克隆文库法对某刺参养殖场患病刺参Apostichopus japonicus幼苗(体长为3~5 cm)表皮的菌群结构进行分析。结果表明:化皮参苗病灶组织和未明显化皮参苗表皮菌群均由γ-变形菌纲、β-变形菌纲和α-变形菌纲组成,优势菌为γ-变形菌纲,主要包括志贺氏菌Shigella sp.、不动杆菌Acinetobacter sp.和假单胞菌Pseudomonas sp.;化皮参苗病灶组织中志贺氏菌、不动杆菌和假单胞菌比例分别为49%、17%和5%,未明显化皮参苗表皮中3类菌的比例分别为20%、26%、9%。将该养殖场育苗池海水作为对照并进行菌群结构分析,结果显示,水中菌群同样由γ-变形菌纲、β-变形菌纲和α-变形菌纲组成,优势菌也为γ-变形菌纲,主要包含弧菌Vibrio sp.(75%)与志贺氏菌(12%)。此外,对化皮参苗病灶处进行细菌分离培养,得到一株优势菌,经16S rDNA初步鉴定为弧菌。研究表明,采用16S rDNA克隆文库法所得结果与传统的病原分离培养法存在差异。 展开更多
关键词 刺参 化皮 菌落结构 16S rDNA克隆文库
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应用16SrDNA克隆文库解析人工快速渗滤系统细菌种群多样性 被引量:11
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作者 马鸣超 姜昕 +1 位作者 李俊 王静 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期731-736,共6页
本文通过构建16S rDNA克隆文库开展了人工快速渗滤(CRI)系统表层(10cm深)细菌种群多样性研究,结果表明,在CRI系统表层填料中细菌多样性十分丰富,存在7个主要类群,其中不可培养的酸杆菌纲(uncultured Acidobacteria)和其它不可培养细菌(u... 本文通过构建16S rDNA克隆文库开展了人工快速渗滤(CRI)系统表层(10cm深)细菌种群多样性研究,结果表明,在CRI系统表层填料中细菌多样性十分丰富,存在7个主要类群,其中不可培养的酸杆菌纲(uncultured Acidobacteria)和其它不可培养细菌(uncultured bacteria)在整个克隆文库中比例最大,比例为53.72%,其次是浮霉菌纲(uncultured planctomycete)和β-变形菌纲(β-proteobacterium),分别占文库比例的13.89%和8.33%;克隆文库中反硝化菌的比例高于亚硝化单胞菌属细菌(0.925%),没有出现Nitrospira属的克隆子。本文通过16S rDNA克隆文库揭示了在生物膜上存在的优势菌为不可培养菌,而假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和紫色色杆菌(Chromobacterium sp.)等在平板分离培养中出现的频率较高,两种方法之间的结果存在差异。本研究采用16S rDNA克隆文库方法揭示的结果,将为CRI系统生物降解的进一步提高提供依据。 展开更多
关键词 人工快速渗滤系统(cRI) 16S rDNA克隆文库 细菌种群多样性
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圈养老年大熊猫肠道菌群16S rDNA克隆文库的建立 被引量:4
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作者 王晓艳 袁听 +6 位作者 廖虹 罗永久 何廷美 王承东 刘小敏 吴虹林 彭广能 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1402-1408,共7页
为了研究老年大熊猫肠道菌群的构成,本试验对3只圈养老年大熊猫粪便细菌构建16SrDNA克隆文库,采用限制性内切酶HinfⅠ、MspⅠ对其进行限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)及测序分析。结果显示,老年... 为了研究老年大熊猫肠道菌群的构成,本试验对3只圈养老年大熊猫粪便细菌构建16SrDNA克隆文库,采用限制性内切酶HinfⅠ、MspⅠ对其进行限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)及测序分析。结果显示,老年大熊猫肠道细菌主要由变形菌门和厚壁菌门组成;变形菌门中又以大肠埃希氏菌属为主,其次为假单胞菌属、志贺氏菌属、气单胞菌属;而厚壁菌门中以链球菌属为主,其次为魏斯氏菌属、梭菌属;此外还发现一定比例的未培养细菌。本试验第一次建立了较丰富的老年大熊猫肠道菌群的克隆文库,为分析比较各年龄层大熊猫的肠道菌群结构的异同提供了参照,也为合理饲喂老年大熊猫,保障老年大熊猫的健康提供重要信息。 展开更多
关键词 圈养 老年大熊猫 肠道菌群 16SrDNA克隆文库
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应用16S rDNA克隆文库解析好氧颗粒污泥细菌菌群多样性 被引量:4
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作者 刘风华 宋永会 +4 位作者 曾萍 王全红 宋宝华 韩双 胡霖 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1-6,共6页
采用分子生物学手段16S rDNA克隆文库方法,对厌氧折流板反应器(处理黄连素制药废水)出水培养的好氧颗粒污泥进行了细菌多样性研究。从16S rDNA克隆文库中随机挑选了95个克隆子进行序列测定,对测序结果进行了Blast对比。结果表明,好氧颗... 采用分子生物学手段16S rDNA克隆文库方法,对厌氧折流板反应器(处理黄连素制药废水)出水培养的好氧颗粒污泥进行了细菌多样性研究。从16S rDNA克隆文库中随机挑选了95个克隆子进行序列测定,对测序结果进行了Blast对比。结果表明,好氧颗粒污泥系统中的细菌群落具有高度多样性,52个克隆子分属6个不同的细菌类群,43个克隆子属于未知类群,优势类群主要为变形菌(Proteobacteria)菌群。好氧颗粒污泥中已知菌群的优势菌群为:β-proteobacteria类群、CFB group bacteria类群、α-proteobacteria类群、γ-proteobacteria类群、Enterobacteria类群和ε-proteobacteria类群。 展开更多
关键词 黄连素制药废水 16S rDNA克隆文库 好氧颗粒污泥 细菌多样性
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对虾病原菌2-5B菌株16SrRNA基因片段的克隆和序列测定 被引量:4
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作者 叶军 孔杰 +3 位作者 刘萍 张岩 杨丛海 徐怀恕 《海洋水产研究》 CSCD 1997年第1期9-15,共7页
用引物PL1-PL2PCR扩增对虾病原菌——坎普氏弧菌(V.campbellii)2-5B菌株16SrRNA基因-1223bP的片段,采用pUC19质粒构建dT载体法完成该片段的克隆。部分序列测定及分析结果表明,该菌株与GenBank中坎普氏弧菌标准株序列之间同源性为... 用引物PL1-PL2PCR扩增对虾病原菌——坎普氏弧菌(V.campbellii)2-5B菌株16SrRNA基因-1223bP的片段,采用pUC19质粒构建dT载体法完成该片段的克隆。部分序列测定及分析结果表明,该菌株与GenBank中坎普氏弧菌标准株序列之间同源性为96.94%。所测序列可为PCR特异性引物及寡核苷酸探针设计提供依据,进而应用于病原菌的检测和快速鉴定。 展开更多
关键词 对虾 病原菌 16srrna基因 克隆 序列
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16SrDNA克隆文库方法分析两纯系鸡回肠及盲肠黏膜细菌的组成 被引量:3
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作者 容庭 张洁 +4 位作者 王刚 刘志昌 李书宏 林海丹 陈庄 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1218-1227,共10页
以1日龄纯系的优质肉鸡A系(♂,A组)和惠阳胡须鸡(♂,B组)为试验动物,研究比较两纯系鸡28日龄回肠与盲肠黏膜菌群的组成及多样性。于第28日龄分别从2组中采集鸡2个肠段并提取黏膜细菌基因组DNA,应用16S rDNA基因序列技术,建立2个肠段黏... 以1日龄纯系的优质肉鸡A系(♂,A组)和惠阳胡须鸡(♂,B组)为试验动物,研究比较两纯系鸡28日龄回肠与盲肠黏膜菌群的组成及多样性。于第28日龄分别从2组中采集鸡2个肠段并提取黏膜细菌基因组DNA,应用16S rDNA基因序列技术,建立2个肠段黏膜细菌16S rDNA V3区的随机克隆文库。回肠文库分析发现,A组文库有86个序列共产生6个OTUs()perational taxonomic units),其已知序列主要属于肠球菌属、乳杆菌属、粪球菌属及梭菌属类序列,而B组文库有97个序列共产生2个OTUs,主要属于梭菌类序列;盲肠文库分析发现,A组文库有93个序列共产生44个OTUs,其优势菌群是未分类瘤胃球菌属(18.28%)、粪球菌属(13.98%)、拟杆菌属(10.75%)、Blautia(10.75%)及未分类毛螺菌属(7.53%);B组文库有97个序列共产生42个OTUs,其优势菌群是普拉梭杆菌属(17.53%)、粪球菌属(11.34%)、拟杆菌属(9.28%)及未分类瘤胃球菌属(8.25%);2组盲肠文库中其他菌属的数量存在较大差异,且未发现与大肠杆菌相关的序列。优质肉鸡A系和惠阳胡须鸡28日龄回肠与盲肠黏膜细菌的组成差异明显,尤其是瘤胃球菌属与产丁酸菌的组成比例,这种差异可能是宿主遗传的影响所致。 展开更多
关键词 优质肉鸡A系 惠阳胡须鸡 肠道黏膜微生物丛 16S rDNA克隆文库
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16S rDNA克隆文库法与高通量测序法在浓香型大曲微生物群落结构分析中的对比研究 被引量:31
10
作者 陈玲 袁玉菊 +4 位作者 曾丽云 廖作敏 陈伊童 吴正云 张文学 《酿酒科技》 2015年第12期33-36,40,共5页
针对浓香型白酒大曲样本,以16S r RNA基因为目的片段,分别采用16S r DNA克隆文库法和高通量测序法分析大曲中细菌微生物群落的组成,并通过丰度和多样性分析,比较了两种方法在研究大曲样品细菌多样性方面的适用性。结果表明,在门、纲、... 针对浓香型白酒大曲样本,以16S r RNA基因为目的片段,分别采用16S r DNA克隆文库法和高通量测序法分析大曲中细菌微生物群落的组成,并通过丰度和多样性分析,比较了两种方法在研究大曲样品细菌多样性方面的适用性。结果表明,在门、纲、目、科和属的分类水平上,克隆文库方法检测大曲样本微生物得到4个门,4个纲,5个目,4个科,6个属;高通量测序得到13个门,22个纲,33个目,61个科,133个属。在门的水平上,克隆文库与高通量测序检测出优势类群的总数量与总丰度分别为3个(99.32%)和4个(98.61%),共有优势类群及其丰度分别为Firmicutes(88.88%和79.32%)、Proteobacteria(7.8%和15.04%)、Actinobacteria(2.72%和1.77%)。重复样本分析,得出的结果相似。克隆文库法与高通量测序法在反映样本微生物群落规模上差异较大,而在反应大曲样本中主要微生物的物种组成及数量比例上结果相近,特别是样本中优势微生物类群的结果基本相同。两种方法各具优势。 展开更多
关键词 16S r DNA克隆文库 高通量测序 大曲 微生物群落 白酒
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16S rRNA克隆文库法分析成人龋病唾液微生物多样性 被引量:2
11
作者 李俊平 吴芳 +4 位作者 汪珍珍 王译彬 周建业 李志强 余占海 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期272-277,共6页
目的:讨论汉族人群中高龋和无龋人群口腔唾液微生物结构的差异。方法:采集符合WHO采样标准的唾液样本6例,其中高龋组(CA组)3例,无龋组(CF组)3例,提取细菌总DNA,构建16SrRNA克隆文库,挑取阳性克隆子进行测序,并用MOTHUR等软件对结果进行... 目的:讨论汉族人群中高龋和无龋人群口腔唾液微生物结构的差异。方法:采集符合WHO采样标准的唾液样本6例,其中高龋组(CA组)3例,无龋组(CF组)3例,提取细菌总DNA,构建16SrRNA克隆文库,挑取阳性克隆子进行测序,并用MOTHUR等软件对结果进行分析,MEGA4.0软件构建系统发育树。结果:共获得80个OTUs,归属于5个门,9个纲,10个目,14个科,19个属,其中有13个优势属;CA组优势属为:链球菌属(53.16%)、普氏菌属(28.77%)、颗粒链球菌属(9.34%);CF组优势菌为:链球菌属(46.12%)、普氏菌属(23.41%)、奈瑟菌属(14.35%)。结论:16SrRNA克隆文库法已成熟,可用于口腔微生物群落结构的研究,当地汉族人群中高龋和无龋人群口腔微生物群落结构存在一定的差异,高龋组中优势菌(链球菌属、普氏菌属、颗粒链球菌属)对龋病发生发展的作用还有待进一步的研究。 展开更多
关键词 口腔微生物 龋病 优势菌 16S RRNA 克隆文库
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16S rDNA克隆文库法分析地下水生物反硝化系统细菌种群多样性 被引量:3
12
作者 张建美 李思远 +4 位作者 高绣纺 喻笑勇 时序 李根 蒋兴超 《科学技术与工程》 北大核心 2014年第30期283-288,共6页
采集地下水硝酸盐生物反硝化系统内的污泥样品,提取污泥样品中微生物的总DNA,构建细菌16S rDNA基因片段克隆文库,并通过16S rDNA序列系统发育分析,对反硝化系统内的细菌种群多样性以及菌群结构进行了研究。结果表明,地下水生物反硝化系... 采集地下水硝酸盐生物反硝化系统内的污泥样品,提取污泥样品中微生物的总DNA,构建细菌16S rDNA基因片段克隆文库,并通过16S rDNA序列系统发育分析,对反硝化系统内的细菌种群多样性以及菌群结构进行了研究。结果表明,地下水生物反硝化系统内细菌具有高度多样性,样品文库分为9个细菌类群,优势菌群为β-Proteobacteria(67.11%)和Bacteroidetes(15.79%),其中,β-proteobacteria为最优势菌群,以Rhodocyclaceae为主。对反硝化系统内细菌种群多样性的研究有利于确定优势菌种,为地下水硝酸盐生物反硝化修复奠定理论基础。 展开更多
关键词 硝酸盐 反硝化细菌 16S rDNA克隆文库 细菌多样性
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应用16SrDNA克隆文库解析苏铁珊瑚状根内生放线菌种群多样性 被引量:2
13
作者 王国娟 曹妍 +3 位作者 王芳 马焕成 郑艳玲 伍建榕 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期115-120,共6页
苏铁为古老孑遗植物,被誉为“植物界的大熊猫”和“活化石”。为了研究苏铁珊瑚状根内生放线菌的多样性,通过16SrDNA克隆文库开展了珊瑚状根内生放线菌种群多样性研究,从16SrDNA克隆文库中随机挑选了164个克隆子进行序列测定,对测... 苏铁为古老孑遗植物,被誉为“植物界的大熊猫”和“活化石”。为了研究苏铁珊瑚状根内生放线菌的多样性,通过16SrDNA克隆文库开展了珊瑚状根内生放线菌种群多样性研究,从16SrDNA克隆文库中随机挑选了164个克隆子进行序列测定,对测序结果进行了Blast对比,结果表明,苏铁珊瑚状根中放线菌多样性十分丰富,存在5个目7个科10个属,主要类群为短小杆菌属Curtobacterium、利夫森氏菌属Leifsonia、考克氏菌Kocuria、鸟氨酸微菌属Ornithinimicrobium、微球菌属Micrococcus、丙酸杆菌属Propionibacterium、链霉菌属Streptomyces、拟诺卡氏菌属Nocardiopsis、芽球菌属Blastococcus;克隆得到的内生放线菌优势菌为短小杆菌属Curtobacterium,其次为拟诺卡氏菌属Nocardiopsis和链霉菌属Streptomyces。其中68株内生放线菌是能分离培养的,经16SrDNA片段测序分析,结果表明这些内生放线菌分别与GenBank中已知属相似性达97%-100%;其余的序列相似性低于97%,表明苏铁珊瑚状根中可能存在着放线菌新种。 展开更多
关键词 苏铁 珊瑚状根 16S rDNA克隆文库 内生放线菌 种群多样性
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16S rDNA克隆文库方法分析太岁样品中细菌的多样性 被引量:14
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作者 王朝江 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期95-99,共5页
通过构建16S rDNA克隆文库的方法,分析太岁样品中细菌的群落结构及多样性。太岁样品中的细菌归属于4个门9个目,优势类群依次是芽胞杆菌目(Bacillales,33.01%)、柄杆菌目(Caulobacterales,32.04%)和伯克霍尔德氏菌目(Burkholderiales,12.... 通过构建16S rDNA克隆文库的方法,分析太岁样品中细菌的群落结构及多样性。太岁样品中的细菌归属于4个门9个目,优势类群依次是芽胞杆菌目(Bacillales,33.01%)、柄杆菌目(Caulobacterales,32.04%)和伯克霍尔德氏菌目(Burkholderiales,12.62%);优势属为短波单胞菌属(Brevundimonas,30.10%)、葡萄球菌属(Staphylococcus,29.13%)和食酸菌属(Acidovorax,7.77%)。并且其中的5个目中含有未培养的细菌,红杆菌目(Rhodobacterales)、伯克霍尔德氏菌目和红环菌目(Rhodocyclales)的11个克隆子的细菌16S rDNA序列同源性低于97%。研究表明太岁样品中细菌多样性较丰富,且蕴藏着许多未知的微生物资源。 展开更多
关键词 16S RDNA 克隆文库 太岁 细菌多样性
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应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成 被引量:1
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作者 宋鸿雁 仇保丰 +6 位作者 刘春 朱顺星 缪进 王生存 吴刘成 王旭 邵义祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第12期1124-1127,共4页
目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析... 目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析B6-Co小鼠角膜细菌组成,B6小鼠作为对照。结果 B6-Co角膜混浊小鼠中共鉴定出20种细菌,隶属于15个属,包括葡萄球菌属、假单胞菌属、链球菌属、微球菌属、棒状杆菌属等。葡萄球菌属和假单胞菌属为优势群,葡萄球菌属丰度为19.7%~53.1%,假单胞菌属的丰度为17.4%~32.8%。其中葡萄球菌属主要是表皮葡萄球菌,丰度为13.8%~20.9%;缓慢葡萄球菌,丰度为14.0%~30.9%;金黄色葡萄球菌,丰度为7.4%~20.3%。此外,棒状杆菌和微球菌也比较常见。10 d龄B6小鼠未检测出细菌。结论 B6-Co突变系小鼠角膜细菌组成与人类角膜炎病原菌相似,是研究人类角膜炎诊断方法、发病机理及临床用药的很好的动物模型。 展开更多
关键词 细菌性角膜炎 16S r DNA克隆文库 细菌组成 B6-Co小鼠
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泸县沼水蛙16SrRNA基因克隆与系统发育分析 被引量:2
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作者 熊荣川 田应洲 +1 位作者 李松 陈红 《六盘水师范学院学报》 2013年第5期38-42,共5页
对采于四川省泸县地区的沼水蛙(Hylaranaguentheri)线粒体16SrRNA基因进行扩增测序。经3对扩增引物分别扩增及测序获得长度为550bp、300bp、1000bp核苷酸序列,拼接后序列长度1601bp。核苷酸相似性分析表明,序列与Genbank公布的福建... 对采于四川省泸县地区的沼水蛙(Hylaranaguentheri)线粒体16SrRNA基因进行扩增测序。经3对扩增引物分别扩增及测序获得长度为550bp、300bp、1000bp核苷酸序列,拼接后序列长度1601bp。核苷酸相似性分析表明,序列与Genbank公布的福建的沼水蛙线粒体16SrRNA基因(KF185060)核苷酸序列相似性最高(99.8%);与越南地区沼水蛙的16S序列相似性也较高(99%~99.7%),无明显种间差异,从遗传上证明沼水蛙为广布物种。同时,与亲源关系较近的水蛙类代表物种构建的系统发育树显示。所有沼水蛙聚为一支系,然后与Ranalateralis互为姊妹群。本文同时也对水蛙类的系统发育关系做了初步讨论。 展开更多
关键词 沼水蛙 16srrna 克隆 系统发育进化树
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仙人掌丛枝病植原体CWB1株系16SrRNA基因克隆及序列分析
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作者 蔡红 李凡 +1 位作者 孔宝华 陈海如 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期693-698,共6页
对表现丛枝症状的仙人掌植株总DNA进行植原体 1 6SrRNA基因PCR扩增 ,得到一条约 1 5kb的特异片段 ,表明植株中有植原体存在 ,将此植原体株系命名为CWB1。把此特异片段与pGEM TEasy载体连接并转化到大肠杆菌JM1 0 9感受态细胞中 ,通过PC... 对表现丛枝症状的仙人掌植株总DNA进行植原体 1 6SrRNA基因PCR扩增 ,得到一条约 1 5kb的特异片段 ,表明植株中有植原体存在 ,将此植原体株系命名为CWB1。把此特异片段与pGEM TEasy载体连接并转化到大肠杆菌JM1 0 9感受态细胞中 ,通过PCR鉴定、限制性内切酶 (EcoRI)酶切分析及核苷酸序列分析 ,均表明克隆成功。序列分析结果显示 ,此株系的 1 6SrRNA基因全长 1 489个碱基 ,与属于植原体 1 6SrⅡ C亚组的Fababeanphyllody植原体同源率最高 ,为 99 7%。通过 1 6SrRNA基因核酸序列同源性比较 ,认为该株系属于 1 6SrⅡ C亚组 ,基本确定了其分类地位。 展开更多
关键词 仙人掌 丛枝病植原体 16srrna基因 序列分析 基因克隆
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利用16S rDNA克隆文库研究猪场污水微藻净化后菌群的变化
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作者 盛清凯 刘艳艳 +3 位作者 孙中亮 孙利芹 刘雪 朱昌雄 《山东农业科学》 2017年第2期93-98,共6页
为促进猪场污水治理,研究微藻净化对猪场污水菌群的影响,将小球藻接种于含60%沼液与40%水的猪场污水进行批式模式培养,循环三次后将小球藻液离心,检测猪场污水、小球藻液以及离心后上清液中的水质指标及菌群变化情况。菌群采用16S rDNA... 为促进猪场污水治理,研究微藻净化对猪场污水菌群的影响,将小球藻接种于含60%沼液与40%水的猪场污水进行批式模式培养,循环三次后将小球藻液离心,检测猪场污水、小球藻液以及离心后上清液中的水质指标及菌群变化情况。菌群采用16S rDNA克隆文库方法检测。结果显示,和猪场污水相比,小球藻液及上清液中的化学耗氧量(COD)、总氮、氨氮、总磷、铜、锌等含量极显著降低(P<0.01)。除未知菌群外,猪场污水中的主要菌群为Firmicutes群和Bellilinea群,含量分别为12.25%和11.22%;小球藻液中主要菌群为小球藻和Cytophaga群,含量分别为42.42%和12.12%;上清液中的主要菌群为Dyadobacter、Cytophaga、Algoriphagus群和Pedobacter群,含量分别为25.00%、14.00%、11.00%和10.00%。猪场污水和小球藻液中未发现共存的微生物,小球藻液与上清液中皆含有Cytophaga群和Dyadobacter、Pseudomonas、Flavobacterium、Algoriphagus、Flexibacter群。表明接种小球藻可以净化猪场污水中的氨氮、总磷以及重金属,改变污水中的菌群,污水净化可能是小球藻和其共存菌共同作用的结果。 展开更多
关键词 小球藻 猪场污水 16S rDNA克隆文库 净化 菌群
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应用16S rDNA克隆文库法分析有机物料腐熟菌剂细菌组成 被引量:5
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作者 李国媛 李俊 +2 位作者 姜昕 李力 沈德龙 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期939-942,共4页
应用16SrDNA克隆文库法对有机物料腐熟菌剂A和B样品中的细菌组成进行分析研究。结果表明,样品A有14个OTU,主要是融合乳杆菌(Weissella confusa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),其比例分别占总克隆... 应用16SrDNA克隆文库法对有机物料腐熟菌剂A和B样品中的细菌组成进行分析研究。结果表明,样品A有14个OTU,主要是融合乳杆菌(Weissella confusa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),其比例分别占总克隆文库的28.6%、30.4%和23.2%;样品B有43个OTU,主要是布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminis)和耐酸乳杆菌(Lactobacillus acetotolerans),占总克隆文库的比例分别为18.03%、18.86%和13.12%;所得出的结果均与产品标注存在差异,样品A未提及细菌的种类,而样品B只标注短小芽孢杆菌。研究表明这一方法在微生物菌剂细菌组成分析及其质量检测中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 有机物料腐熟菌剂 16S rDNA克隆文库 细菌组成
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16S rDNA克隆文库法分析生鲜牛乳中细菌种群的多样性 被引量:8
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作者 张敏爱 张建军 +2 位作者 王子亮 苑利 杨秀清 《食品安全质量检测学报》 CAS 2014年第10期3170-3176,共7页
目的利用16S rDNA基因文库分析法,对生鲜牛乳中微生物的种群多样性进行研究。方法提取生鲜牛乳中总微生物基因组DNA为模板,将扩增到的生鲜牛乳样品的16S rDNA的PCR产物与pMD^18T载体连接,构建其菌群的16S rDNA文库。对随机选取的56个阳... 目的利用16S rDNA基因文库分析法,对生鲜牛乳中微生物的种群多样性进行研究。方法提取生鲜牛乳中总微生物基因组DNA为模板,将扩增到的生鲜牛乳样品的16S rDNA的PCR产物与pMD^18T载体连接,构建其菌群的16S rDNA文库。对随机选取的56个阳性克隆子进行序列测定和BLAST比对。结果文库序列分析表明,有53个克隆子分属3个不同的类群,即厚壁菌类群、变形菌类群和异常球菌-栖热菌类群,其余3个克隆子属于未知类群。其中,优势细菌类群为厚壁菌类群(86%),在该类群中,尤以无乳链球菌为主要代表,约占所有克隆子的82%;其他类群为γ~变形菌类群(7.1%)和异常球菌-栖热菌门类群(1.8%)。系统发育分析表明,未知类群在分类地位上更接近与厚壁菌类群。结论生鲜牛乳中微生物具有多样性,无乳链球菌为其中的优势种群,同时生鲜牛乳中还存在葡萄球菌等致病菌,或不动杆菌和肠道菌等条件致病菌。 展开更多
关键词 16S RDNA 克隆文库 生鲜牛乳 种群多样性 致病菌
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