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基于16S核糖体RNA基因测序的苯丙酮尿症患儿肠道菌群分析
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作者 张春华 杨静 +2 位作者 苏莹 陈谦 邹团标 《中国妇幼卫生杂志》 2023年第3期12-17,共6页
目的 基于16S核糖体核糖核酸(16S ribosomal ribonucleic acid,16S rRNA)基因高通量测序,探讨苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患儿与正常儿童肠道菌群的差异。方法 于2020年选取云南省新生儿疾病筛查中心管理的儿童为研究对象,根据儿... 目的 基于16S核糖体核糖核酸(16S ribosomal ribonucleic acid,16S rRNA)基因高通量测序,探讨苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患儿与正常儿童肠道菌群的差异。方法 于2020年选取云南省新生儿疾病筛查中心管理的儿童为研究对象,根据儿童是否患有PKU进行分组,每入组1例PKU患儿(该组患儿均接受特殊饮食治疗),招募1~2例与PKU患儿具有相近年龄、相同居住地和户籍的正常儿童入组对照组。共纳入PKU组儿童11例,对照组儿童16例。采集两组儿童的新鲜粪便,并提取粪便DNA对16S rRNA基因V3~V4区进行高通量测序。利用BGI微生物扩增子分析平台对测序数据进行分析,并对两组儿童的肠道菌群情况进行比较。结果 PKU组和对照组儿童肠道菌群的α多样性的比较差异无统计学意义(P> 0.05),但β多样性的比较差异有统计学意义(R=0.084,P <0.05)。在门水平上,厚壁菌门和拟杆菌门为PKU组和对照组肠道菌群的优势菌门。在属水平上,拟杆菌属、粪杆菌属、毛螺菌属、芽殖菌属等菌属为PKU组和对照组肠道菌群的优势菌属。对照组中拟杆菌属和粪杆菌属的相对丰度均高于PKU组,且差异具有统计学意义(P=0.011,P=0.007)。PKU组中普氏菌属的相对丰度高于对照组(P=0.012)。结论 PKU患儿与正常儿童的肠道菌群的种类和相对丰度存在差异,该差异可能与PKU患儿接受特殊饮食治疗有很大关系,并可能影响PKU患儿的生长发育。 展开更多
关键词 16s核糖体rna 苯丙酮尿症 肠道菌群
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基于16S核糖体RNA测序研究健脾方对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响 被引量:1
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作者 陈斯亮 石瑛 +2 位作者 汤辰明 马威 詹红生 《中医正骨》 2023年第6期11-17,23,共8页
目的:探讨健脾方对绝经后骨质疏松症(osteoporosis,OP)小鼠肠道菌群的影响。方法:将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组和健脾方组,每组10只。模型组和健脾方组小鼠通过双侧卵巢摘除术进行OP造模,假手术组小鼠打开腹腔后切除... 目的:探讨健脾方对绝经后骨质疏松症(osteoporosis,OP)小鼠肠道菌群的影响。方法:将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组和健脾方组,每组10只。模型组和健脾方组小鼠通过双侧卵巢摘除术进行OP造模,假手术组小鼠打开腹腔后切除卵巢附近的一团脂肪组织,保留卵巢。造模后第7天,假手术组和模型组小鼠以生理盐水灌胃,健脾方组以健脾方药液灌胃(中药配方颗粒用量为54mg·kg^(-1)),3组小鼠均每天灌胃1次,每次0.2mL,连续灌胃28d。药物干预结束后,测定小鼠体质量,获取各组小鼠粪便样本、左侧股骨,切取子宫并称重,进行小鼠肠道菌群16S核糖体RNA测序分析及小鼠股骨病理学观察。结果:①一般情况。实验期间各组均无小鼠死亡。药物干预前,3组小鼠体质量的差异无统计学意义[(20.88±0.83)g,(20.65±0.74)g,(20.59±0.47)g,F=0.484,P=0.622]。药物干预结束后,模型组小鼠的体质量高于假手术组和健脾方组[(26.96±1.63)g,(23.42±0.84)g,P=0.000;(26.96±1.63)g,(24.62±1.55)g,P=0.001],假手术组和健脾方组小鼠体质量的差异无统计学意义(P=0.063)。假手术组小鼠的子宫质量高于模型组和健脾方组[(0.66±0.05)g,(0.24±0.05)g,P=0.000;(0.66±0.05)g,(0.28±0.06)g,P=0.000],模型组和健脾方组小鼠子宫质量的差异无统计学意义(P=0.053)。②小鼠肠道菌群丰度分析结果。假手术组与模型组含有499个共同操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs)数据;除共同OTUs数据外,假手术组有87个特异性OTUs数据,模型组有74个特异性OTUs数据。模型组与健脾方组含有489个共同OTUs数据;除共同OTUs数据外,模型组有84个特异性OTUs数据,健脾方组有54个特异性OTUs数据。偏最小二乘法判别分析结果显示,3组小鼠肠道菌群丰度差异明显。③小鼠肠道菌群结构分析结果。物种累计曲线随样本量增加逐渐趋于平缓,说明样品中的物种已经基本被测序覆盖,测序数据量充足。3组小鼠肠道菌群相对丰度在门水平处于前4位的依次为拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门、脱硫菌门,相对丰度在属水平处于前5位的依次为Muri菌属、乳杆菌属、拟普雷沃菌属、梭菌属、粪杆菌属。3组小鼠厚壁菌门、脱硫菌门相对丰度比较,总体差异均无统计学意义。假手术组和健脾方组拟杆菌门相对丰度均高于模型组(23.19±2.09,17.12±3.87,P=0.016;23.58±2.46,17.12±3.87,P=0.012)、放线菌门相对丰度低于模型组(0.32±0.29,0.79±0.31,P=0.027;0.26±0.07,0.79±0.31,P=0.014);其余各组间两两比较,组间差异均无统计学意义。3组小鼠Muri菌属、乳杆菌属、粪杆菌属相对丰度比较,总体差异均无统计学意义。假手术组拟普雷沃菌属相对丰度高于模型组(4.96±1.77,1.33±0.37,P=0.009)、梭菌属相对丰度低于模型组(0.45±0.17,1.41±0.18,P=0.000),健脾方组梭菌属相对丰度低于模型组(0.62±0.30,1.41±0.18,P=0.001);其余各组间两两比较,组间差异均无统计学意义。④健脾方组与模型组差异菌群KEGG分析结果。健脾方组与模型组有明显差异的代谢途径有维生素B6代谢、硫化物代谢、硒化物代谢、硫氨基酸代谢、硫胺素代谢、钙离子通道。⑤小鼠股骨病理学观察结果。模型组小鼠的骨小梁厚度、骨小梁数量均低于假手术组[(50.13±7.72)mm,(71.87±6.20)mm,P=0.000;(1.87±0.92)个·mm^(-1),(4.40±1.24)个·mm^(-1),P=0.000],骨小梁分离度高于假手术组[(344.60±41.32)mm,(205.80±27.21)mm,P=0.000]。健脾方组小鼠的骨小梁厚度、骨小梁数量均低于假手术组[(60.53±6.38)mm,(71.87±6.20)mm,P=0.000;(3.13±0.92)个·mm^(-1),(4.40±1.24)个·mm^(-1),P=0.002],健脾方组与假手术组小鼠骨小梁分离度的差异无统计学意义。健脾方组小鼠的骨小梁厚度、骨小梁数量均高于模型组[(60.53±6.38)mm,(50.13±7.72)mm,P=0.000;(3.13±0.92)个·mm^(-1),(1.87±0.92)个·mm^(-1),P=0.002],骨小梁分离度低于模型组[(221.40±33.16)mm,(344.60±41.32)mm,P=0.000]。结论:健脾方能够调节绝经后OP小鼠肠道菌群结构,改变代谢途径,这可能是其治疗OP的作用机制之一。 展开更多
关键词 骨质疏松 绝经后 胃肠道微生物群 rna 核糖体 16s 健脾方
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败血支原体16S rRNA基因的克隆与核酸序列分析 被引量:9
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作者 丁铲 于圣青 +1 位作者 刘晓文 王永山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期134-136,共3页
从败血支原体D9604株培养物中直接快速提取染色体DNA;构建了MG基因文库,以PCR扩增16SrRNA基因全长片段,并对其进行了核苷酸序列分析。结果表明,D9604株与A5969株只有5个核苷酸的差异,同源性为99... 从败血支原体D9604株培养物中直接快速提取染色体DNA;构建了MG基因文库,以PCR扩增16SrRNA基因全长片段,并对其进行了核苷酸序列分析。结果表明,D9604株与A5969株只有5个核苷酸的差异,同源性为99.67%。 展开更多
关键词 败血支原体 16s核糖体rna 序列分析
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土壤细菌16SrRNA基因变异型及其与植被的相关研究 被引量:7
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作者 杨官品 朱艳红 +1 位作者 陈亮 薛小乔 《应用生态学报》 CAS CSCD 2001年第5期757-760,共4页
绕过细菌的分离培养 ,直接提取土壤DNA ,扩增、克隆土壤细菌群体的 16S核糖体RNA基因 (16SrD NA) .根据该基因各种变异类型的限制性片段长度多型性 ,分析土壤细菌分子遗传多样性及其与植被的相互关系 .植被的改变影响土壤养分 ,进而改... 绕过细菌的分离培养 ,直接提取土壤DNA ,扩增、克隆土壤细菌群体的 16S核糖体RNA基因 (16SrD NA) .根据该基因各种变异类型的限制性片段长度多型性 ,分析土壤细菌分子遗传多样性及其与植被的相互关系 .植被的改变影响土壤养分 ,进而改变土壤细菌群落结构 .土壤细菌遗传多样性和分化能反映植被的变化 . 展开更多
关键词 细菌 16s核糖体rna基因 限制性片段长度多型性 植被 变异类型 土壤养分
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基于COI和16SrRNA基因的地龙药材及其混淆品的DNA条形码鉴定 被引量:16
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作者 马梅 李薇 +1 位作者 龚玲 卢瑞珊 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期595-598,共4页
目的利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COI)和16S核糖体RNA(16SrRNA)对地龙药材及常见混伪品进行分子鉴定,探讨快速、准确鉴定地龙药材及其混伪品基原物种的方法。方法收集地龙药材的药典收载品种及其易混品种10种,提取DNA,得到其COI和16... 目的利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COI)和16S核糖体RNA(16SrRNA)对地龙药材及常见混伪品进行分子鉴定,探讨快速、准确鉴定地龙药材及其混伪品基原物种的方法。方法收集地龙药材的药典收载品种及其易混品种10种,提取DNA,得到其COI和16SrRNA序列。所得序列经DNAStar校正后,用MEGA6.0自带的Clustal W多重比对,除去冗余位点,比对结果经MEGA6.0分析,构建地龙药材及其混淆品的邻接(N-J)树。结果地龙药材的正品来源参环毛蚓(Pheretima aspergillum)、通俗环毛蚓(P.vulgaris)、威廉环毛蚓(P.guillelmi)及栉盲环毛蚓(P.pectinifera)与其混淆品种间COI和16SrRNA基因序列均存在较多变异位点。由所构建的N-J系统聚类树图显示所测物种的单系性,即16SrRNA、COI可以很好的将地龙药材区别于其他混伪品。结论所获得的COI和16SrRNA序列可作为不同状态的地龙类药材物种鉴定的分子依据,并为进一步建立地龙等动物类中药物种真实性鉴定体系奠定了重要的实验基础。 展开更多
关键词 地龙 线粒体细胞色素C氧化酶亚基1 16s核糖体rna DNA条形码
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16S rRNA基因及16S~23S rRNA基因间区在微生物鉴定中的应用 被引量:10
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作者 王艳萍 夏云 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第8期994-996,共3页
目前临床上引起感染的病原菌种类繁多,抗菌药物的不正规使用导致细菌培养阳性率进一步降低[1]。因此,传统分类方法的不足随着新型微生物菌株的分离的增多而越来越明显,亟需一种能快速准确鉴定出微生物种类的新技术以便及时指导抗菌药物... 目前临床上引起感染的病原菌种类繁多,抗菌药物的不正规使用导致细菌培养阳性率进一步降低[1]。因此,传统分类方法的不足随着新型微生物菌株的分离的增多而越来越明显,亟需一种能快速准确鉴定出微生物种类的新技术以便及时指导抗菌药物的合理使用从而控制临床感染疾病的进展。文章综述了16SrRNA及16S~23SrRNA基因间区快速鉴定微生物的基本原理、方法、存在的问题及进一步解决方案等。 展开更多
关键词 rna 核糖体 16s 微生物学 综述
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16S rRNA在医学微生物鉴定中的应用 被引量:9
7
作者 张志明 孙海英 李建平 《国际检验医学杂志》 CAS 2010年第4期349-350,共2页
随着分子生物学的快速发展以及该技术在医学微生物研究中的应用,16S rRNA作为微生物分类依据已得到广泛认同,本文就其基因特征、技术步骤、临床应用及注意事项的新进展作一简要综述。
关键词 rna 核糖体 16s 微生物学 实验室技术和方法
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基于16S rRNA检测分析宫颈癌患者放射治疗前后肠道菌群变化特征
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作者 陈雅云 孙育新 +4 位作者 李凯新 高炳宗 陈晓婷 毛润芝 蔡文杰 《深圳中西医结合杂志》 2021年第17期8-11,F0003,共5页
目的:探究电离辐射对宫颈癌患者肠道菌群的影响特点及菌群变化与放射性肠炎发生的相关性。方法:选取福建医科大学附属泉州第一医院2019年1月至2020年1月收治的30例宫颈癌患者,在其调强放射治疗的不同时间点收集其粪便样本,分析肠道微生... 目的:探究电离辐射对宫颈癌患者肠道菌群的影响特点及菌群变化与放射性肠炎发生的相关性。方法:选取福建医科大学附属泉州第一医院2019年1月至2020年1月收治的30例宫颈癌患者,在其调强放射治疗的不同时间点收集其粪便样本,分析肠道微生态的生物标志物,用MoBio PowerSoil试剂盒提取肠道菌群DNA,用MiniSeq对肠道菌群16S rRNA的V4区进行测序及生物信息学分析。差异度采用Wilcoxon秩和检验等分析。结果:宫颈癌患者放射治疗后肠道微生物群的α多样性比放疗前高,同时放疗前后微生物群落组成(即β多样性)存在一定差异,但差异均无统计学意义(P>0.05);但是在宫颈癌患者放疗后微生物组成中普雷沃氏菌和链球菌较放疗前有显著变化(P<0.05)。结论:宫颈癌患者放疗前后微生物成分存在差异,但有待大规模的前瞻性队列研究证实。 展开更多
关键词 宫颈癌 肠道菌群 放射性直肠炎 16s核糖体rna基因测序
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16S rRNA基因序列分析在人体微生物组学研究中的进展及应用 被引量:5
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作者 田芳云 黄婷婷 +1 位作者 黄光武 张哲 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期4396-4398,共3页
在人体表面以及与外界相通的腔道中,如皮肤、胃肠道、鼻腔等部位,定植着大量以细菌为主的微生物群落。这些微生物的数量可达人体自身细胞数的10倍以上,其基因数量更多达人体基因数的100多倍〔1〕。微生物群落在人体内维持一定的动态平衡... 在人体表面以及与外界相通的腔道中,如皮肤、胃肠道、鼻腔等部位,定植着大量以细菌为主的微生物群落。这些微生物的数量可达人体自身细胞数的10倍以上,其基因数量更多达人体基因数的100多倍〔1〕。微生物群落在人体内维持一定的动态平衡,参与调节人体的一系列生理生化反应,如免疫调节、食物消化、维生素合成等。因此,微生物群落的平衡失调可能导致各种感染性、过敏性疾病甚至肿瘤的发生。人体微生物组的概念最早在2001年提出,是对人体共栖。 展开更多
关键词 16s核糖体rna基因 微生物组学 细菌鉴定
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基于COⅠ和16S rRNA基因的涉案鸟类残体鉴定 被引量:1
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作者 刘大伟 应耿迪 +4 位作者 周用武 费宜玲 吴文达 谢春平 侯森林 《野生动物学报》 北大核心 2022年第3期715-724,共10页
利用线粒体DNA细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)和16S核糖体RNA(16S rRNA)基因鉴定某公安机关查获的1件鸟类残体所属物种。结果表明:鸟类残体样本的COⅠ、16S rRNA基因片段与白枕鹤(Antigone vipio)对应的序列相似度均不低于98.98%,遗... 利用线粒体DNA细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)和16S核糖体RNA(16S rRNA)基因鉴定某公安机关查获的1件鸟类残体所属物种。结果表明:鸟类残体样本的COⅠ、16S rRNA基因片段与白枕鹤(Antigone vipio)对应的序列相似度均不低于98.98%,遗传距离分别为0.001~0.007和0。基于这2个基因片段构建系统发育树,显示鸟类残体样本与白枕鹤均聚为一支,鉴定该鸟类残体属白枕鹤所有。得到的COⅠ和16S rRNA基因片段可作为鉴定鹤科(Gruidae)鸟类的分子标记。 展开更多
关键词 鸟类残体 物种鉴定 细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ 16s核糖体rna
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16S rRNA基因测序在法医学中的研究进展 被引量:3
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作者 宋国庆 曹禹 +4 位作者 李辉 马克 赵雪莹 邹凯南 周怀谷 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期542-548,共7页
法医微生物是目前法医学研究的前沿热点之一。16S rRNA基因由于其保守性与特异性并存的特点,是法医学鉴定的理想标记。伴随着高通量测序技术的快速发展,对微生物的研究已逐步应用于环境、医疗等多个领域。在法医学领域,以16S rRNA基因... 法医微生物是目前法医学研究的前沿热点之一。16S rRNA基因由于其保守性与特异性并存的特点,是法医学鉴定的理想标记。伴随着高通量测序技术的快速发展,对微生物的研究已逐步应用于环境、医疗等多个领域。在法医学领域,以16S rRNA基因测序为代表的法医微生物研究成果也逐步应用于法医学实践中的生物检材鉴定、个体识别、死亡时间推断、地域推断等方面,为案件的侦查提供线索,为传统方法作为补充和辅助。本文阐述了16S rRNA基因测序应用于法医学领域的研究方法和相关测序技术,综述了其在法医学领域的研究进展,探讨了16S rRNA在法医学中的应用价值和潜力。 展开更多
关键词 法医遗传学 rna 核糖体 16s 遗传学 微生物 综述
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天津地区鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因的检测与耐药性分析 被引量:5
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作者 张利娟 郝邯生 毕玲 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第5期456-459,共4页
目的:了解天津地区鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因的携带情况,并进行耐药分析。方法:收集天津地区2所医院2010年8月—12月临床分离的152株鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法或纸片扩散法测定菌株药敏情况;聚合酶链反应(PCR)对鲍曼不动杆菌... 目的:了解天津地区鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因的携带情况,并进行耐药分析。方法:收集天津地区2所医院2010年8月—12月临床分离的152株鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法或纸片扩散法测定菌株药敏情况;聚合酶链反应(PCR)对鲍曼不动杆菌扩增7种16SrRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA)并测序。结果:152株鲍曼不动杆菌对多黏菌素B的耐药率最低(0),其次是头孢哌酮/舒巴坦(15.79%)和左氧氟沙星(36.84%),对其他11种抗菌药物耐药率均在45%以上。83株耐氨基糖苷类菌株中armA阳性率为87.95%(73/83),占实验菌株的48.03%(73/152),未检出其他6种16SrRNA甲基化酶基因。armA阳性菌株耐药严重,除多黏菌素B外,ar mA阳性菌株对其余13种抗菌药物的耐药率明显高于armA阴性菌株(均P<0.01)。多重耐药和泛耐药占的比例在armA阳性株中(100%和69.86%)也明显高于阴性株(21.52%和11.39%)。结论:armA广泛存在于鲍曼不动杆菌中,未检出其他6种基因。 展开更多
关键词 氨基糖苷类抗药性 多种 细菌鲍氏不动杆菌rna 核糖体 16s trna甲基转移酶类天津
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人苍白杆菌深圳分离株16S rRNA基因部分核苷酸序列分析 被引量:4
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作者 黄华 徐传彬 +1 位作者 高国全 陆淼泉 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第7期577-579,共3页
目的对深圳市布吉人民医院分离鉴定的1株人苍白杆菌进行16S rRNA基因的部分核苷酸序列分析,以探讨该菌株在分类学上的准确地位。方法对该菌株进行PCR扩增及16SrRNA基因序列测定,并与人苍白杆菌标准株及羊种布氏杆菌比较。结果3株细菌均... 目的对深圳市布吉人民医院分离鉴定的1株人苍白杆菌进行16S rRNA基因的部分核苷酸序列分析,以探讨该菌株在分类学上的准确地位。方法对该菌株进行PCR扩增及16SrRNA基因序列测定,并与人苍白杆菌标准株及羊种布氏杆菌比较。结果3株细菌均可扩增到大小约900bp的16S rRNA基因片段,经核苷酸序列分析比较,发现人苍白杆菌深圳分离株与人苍白杆菌标准株和羊种布氏杆菌具有高度同源性,同源程度大于98%。结论该院分离的人苍白杆菌不仅与购自美国的人苍白杆菌ATCC株有高度同源性,而且与北京保存的羊种布氏菌在遗传学上也具有非常密切的亲缘关系。 展开更多
关键词 人苍白杆菌 rna 核糖体 16s 序列同源性 核酸 布鲁杆菌属 绵羊
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基于16S rRNA基因序列对不同土壤细菌群落的差异性分析 被引量:3
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作者 宋国庆 李辉 +4 位作者 马克 赵雪莹 沈忆文 谢建辉 周怀谷 《法医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期187-193,共7页
目的研究不同土壤细菌群落的结构和差异,探索16S rRNA基因测序技术在不同土壤鉴定中的有效性。方法采集上海市7个地区的土壤样本,提取土壤细菌基因组DNA,采用高通量测序技术对16S rRNA基因序列高变区片段进行测序,测序结果通过生物信息... 目的研究不同土壤细菌群落的结构和差异,探索16S rRNA基因测序技术在不同土壤鉴定中的有效性。方法采集上海市7个地区的土壤样本,提取土壤细菌基因组DNA,采用高通量测序技术对16S rRNA基因序列高变区片段进行测序,测序结果通过生物信息学软件量化或可视化后,比较分析草地、树林和沙滩3类土壤样本间细菌群落多样性和丰度的差异。结果草地、树林和沙滩土壤样本细菌群落的alpha多样性指数差异具有统计学意义,三类土壤细菌群落的物种相对丰度和多样性差异明显,草地土壤中酸杆菌门相对丰度较高,树林土壤中变形菌门相对丰度较高,沙滩土壤中放线菌门相对丰度较高。但人工草地、天然草地和工业区草地土壤细菌群落差异无统计学意义。结论基于16S rRNA基因序列测序可以有效区分不同类别土壤,该方法有望为刑事案件第一犯罪现场判读提供线索。 展开更多
关键词 法医病理学 法医遗传学 土壤微生物学 DNA 细菌 rna 核糖体 16s 生物多样性 高通量测序
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16S核糖体RNA基因和RNA聚合酶β亚基基因及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱鉴定海洋副溶血性弧菌及其同源性分析的研究
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作者 周月霞 胡成进 +3 位作者 武静 陈英剑 曹源 王明义 《中国医药》 2017年第6期929-933,共5页
目的评价16S核糖体RNA基因(16SrRNA)、RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术对海洋副溶血性弧菌的鉴定及同源性分析的性能。方法将50株海洋副溶血性弧菌以及与其亲缘关系相近的30株... 目的评价16S核糖体RNA基因(16SrRNA)、RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)及基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术对海洋副溶血性弧菌的鉴定及同源性分析的性能。方法将50株海洋副溶血性弧菌以及与其亲缘关系相近的30株海洋溶藻弧菌、8株海洋坎贝式弧菌、11株海洋哈维氏弧菌、3株海洋需钠弧菌、2株海洋创伤弧菌分别用16SrRNA、rpoB和MALDI-TOFMS技术3种方法进行鉴定并做系统进化树、聚类分析,比较分析结果。结果50株海洋副溶血性弧菌用16SrRNA鉴定出5株,rpoB鉴定出41株,MALDI-TOFMS技术鉴定出41株。16SrRNA系统进化树的结果不能将海洋副溶血性弧菌和海洋溶藻弧菌、海洋坎贝式弧菌、海洋需钠弧菌、海洋创伤弧菌分开。rpoB和MALDI.TOFMS可以准确地做出同源性分析。rpoB鉴别来自不同地域的海洋副溶血性弧菌的能力优于MALDI-TOFMS。而MALDI-TOFMS在海洋副溶血性弧菌的环境株和临床株的鉴别上优于rpoB。结论rpoB和MALDI.TOFMS技术鉴定海洋副溶血性弧菌准确,二者相结合是进行海洋副溶血性弧菌鉴定和同源性分析的适宜技术。 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性 海洋 16s核糖体rna rna聚合酶β亚基基因 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 同源性分析
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16S rRNA测序方法分析KSL抗菌肽口香糖对口腔细菌的抗菌效果 被引量:2
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作者 赵泽 李宗泽 +3 位作者 张文菲 相豆豆 田宇 余擎 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2017年第7期387-390,共4页
目的:应用16S rRNA测序方法研究KSL抗菌肽口香糖对口腔细菌的抗菌效果。方法:分别收集6名志愿者使用KSL抗菌肽口香糖前后的唾液,并提取总DNA进行16S rRNA测序分析,以比较使用KSL抗菌肽口香糖前后的口腔细菌的组成和丰度变化。结果:在门... 目的:应用16S rRNA测序方法研究KSL抗菌肽口香糖对口腔细菌的抗菌效果。方法:分别收集6名志愿者使用KSL抗菌肽口香糖前后的唾液,并提取总DNA进行16S rRNA测序分析,以比较使用KSL抗菌肽口香糖前后的口腔细菌的组成和丰度变化。结果:在门水平上,KSL抗菌肽口香糖对变异菌门、拟杆菌门和厚壁菌门的抑制作用比较明显(P<0.05);在属水平上,KSL抗菌肽口香糖对拟杆菌属、奈瑟氏菌属、嗜血杆菌、韦永氏球菌属、普氏菌属、卟啉单胞菌属、链球菌属的抑制作用比较明显(P<0.05)。结论:KSL抗菌肽口香糖对口腔中的部分致病菌具有抑制作用。 展开更多
关键词 16s核糖体rna KSL抗菌肽 口腔微生物 抗菌效果
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脑脊液细菌16S核糖体RNA基因检测在抗生素治疗后化脓性脑膜炎患儿中的应用价值 被引量:2
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作者 郑可鲁 杨思达 +3 位作者 高媛媛 陈文雄 黄怡玲 张雅妮 《广西医学》 CAS 2016年第10期1367-1369,共3页
目的探讨脑脊液细菌16S核糖体RNA(16S rRNA)基因检测在抗生素治疗后化脓性脑膜炎患儿中的应用价值。方法选择化脓性脑膜炎患儿60例,在抗生素使用早期及后期采集脑脊液标本,同时进行16S rRNA基因检测及细菌培养,比较两种方法的检测阳性率... 目的探讨脑脊液细菌16S核糖体RNA(16S rRNA)基因检测在抗生素治疗后化脓性脑膜炎患儿中的应用价值。方法选择化脓性脑膜炎患儿60例,在抗生素使用早期及后期采集脑脊液标本,同时进行16S rRNA基因检测及细菌培养,比较两种方法的检测阳性率,分析抗生素应用时间对两种检测方法结果的影响。结果脑脊液16S rRNA基因检测阳性21例(35.0%),脑脊液细菌培养阳性9例(15.0%),16S rRNA基因检测阳性率高于细菌培养(P<0.05)。抗生素应用早期16S rRNA基因检测阳性率略高于抗生素应用后期,但差异无统计学意义(P>0.05);抗生素应用早期脑脊液细菌培养检测阳性率高于抗生素应用后期(P<0.05)。结论对于抗生素治疗后化脓性脑膜炎患儿,脑脊液16S rRNA基因检出阳性率高于脑脊液细菌培养,且可能更少受抗生素应用时间的影响。 展开更多
关键词 化脓性脑膜炎 抗生素 脑脊液 16s核糖体rna 细菌培养 基因检测
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Correlation analysis of breast fibroadenoma and the intestinal flora based on 16S rRNA sequencing
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作者 Bingdong Wang Xin Liu +5 位作者 Yahong Bian Guoxin Sun Huizhe Wang Jingjin Zhang Zhengfu Zhang Xiao Zou 《Oncology and Translational Medicine》 CAS 2021年第6期269-274,共6页
Objective To analyze the characteristics of the intestinal microflora in patients with breast fibroadenoma using 16S ribosomal RNA(rRNA)high-throughput sequencing.Methods Fecal samples from 20 patients with breast fib... Objective To analyze the characteristics of the intestinal microflora in patients with breast fibroadenoma using 16S ribosomal RNA(rRNA)high-throughput sequencing.Methods Fecal samples from 20 patients with breast fibroadenoma and 36 healthy subjects were randomly collected and analyzed using high-throughput sequencing technology for 16S rRNA V4 region sequencing,and the alpha diversity(Chao index,Shannon index)was calculated using Mothur(v.1.39.5)software.Beta diversity was analyzed using QIIME(v1.80).SPSS software(version 23.0)and the t-test of two independent samples were used to analyze differences in the abundance of bacteria between the two groups.Results Compared with that in the healthy control group,theαdiversity of the intestinal microflora in breast fibroadenoma patients increased,but the difference was not statistically significant(P>0.05).At the phylum level,significant differences were observed between the two groups.The abundance of Firmicutes was higher in the breast fibroadenoma group(P<0.05),whereas the abundance of Synergistetes was higher in the healthy control group(P<0.005).A total of five bacterial genera showed significant differences between the two groups:the breast fibroadenoma group showed higher levels of Bautia(P<0.005),Coprococcus(P<0.005),Roseburia(P<0.05),and Ruminococcus(P<0.005),whereas Sutterella was more abundant in the healthy control group than in the breast fibroadenoma group(P<0.05).Conclusion The diversity and abundance of the intestinal flora in patients with breast fibroadenoma are significantly different from those in healthy subjects,suggesting that an imbalance in the intestinal flora is correlated with the occurrence of breast fibroadenoma. 展开更多
关键词 intestinal flora ESTROGEN breast fibroadenoma 16s ribosomal rna high-throughput sequencing
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Impact of Different Rates of Nitrogen Supplementation on Soil PhysicochemicalProperties and Microbial Diversity in Goji Berry
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作者 Xiaojie Liang Wei An +4 位作者 Yuekun Li Yajun Wang Xiaoya Qin Yanhong Cui Shuchai Su 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第3期467-486,共20页
Goji berry(Lycium barbarum L.)is substantially dependent on nitrogen fertilizer application,which can signifi-cantly enhance fruit yield and Goji berry industrial development in Ningxia,China.This study aimed to analyz... Goji berry(Lycium barbarum L.)is substantially dependent on nitrogen fertilizer application,which can signifi-cantly enhance fruit yield and Goji berry industrial development in Ningxia,China.This study aimed to analyze the functions of differential nitrogen application rates including low(N1),medium(N2),and high(N3)levels in soil microbial community structure(bacterial and fungal)at 2 diverse soil depths(0-20,20-40 cm)through high-throughput sequencing technology by targeting 16S RNA gene and ITS1&ITS2 regions.All the observed physicochemical parameters exhibited significant improvement(p<0.05)with increased levels of nitrogen and the highest values for most parameters were observed at N2.However,pH decreased(p<0.05)gradually.The alpha and beta diversity analyses for bacterial and fungal communities’metagenome displayed more similarities than differences among all groups.The top bacterial and fungal phyla and genera suggested no obvious(p>0.05)differences among three group treatments(N1,N2,and N3).Furthermore,the functional enrichment analysis demonstrated significant(p<0.05)enrichment of quorum sensing,cysteine and methionine metabolism,and transcriptional machinery for bacterial communities,while various saprotrophic functional roles for fungal communities.Conclusively,moderately reducing the use of N-supplemented fertilizers is conducive to increasing soil nitrogen utilization rate,which can contribute to sustainable agriculture practices through improved soil quality,and microbial community structure and functions. 展开更多
关键词 Goji berry production Ningxia China differential nitrogen supplementation rates 16s rna gene and IT1&IT2 region sequencing soil physicochemical properties
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水环境细菌16S rDNA限制性片段长度多型性及群落结构分析 被引量:17
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作者 李志岗 杨官品 朱艳红 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期111-115,共5页
用细菌16S核糖体RNA基因(rDNA)限制性片段长度多型性描述了水环境细菌群落结构。从环境水样中直接分离 DNA,以细菌特异的引物扩增 165 rDNA,构建质粒文库,随机分离重组质粒,用限制性内切酶消化获得 16S ... 用细菌16S核糖体RNA基因(rDNA)限制性片段长度多型性描述了水环境细菌群落结构。从环境水样中直接分离 DNA,以细菌特异的引物扩增 165 rDNA,构建质粒文库,随机分离重组质粒,用限制性内切酶消化获得 16S rDNA基因型,用基因型的种类及频率描述特定水体生境的细菌群落结构。该方法在分析水体隐含遗传多样性、揭示污染的生物学效应和评价水环境质量等方面具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 16s核糖体rna基因 限制性片段长度多态性 细菌群落 水环境 环境污染 评价
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