简单节杆菌AS 1.94^＊生物转化17α-甲基睾丸素C1,2-脱氢制备美雄酮

以17α-甲基睾丸素为底物,利用简单节杆菌(Arthrobacter simplex)AS 1．94*生物催化其C1,2-脱氢获得17α-去氢甲基睾丸素,即美雄酮。发现生长培养基的组成对转化结果有较大的影响;pH 6．47～7．30有利于产物的积累;以较高的底物浓度(12g/L发酵液体积)投料时加入亲水性有机溶剂二甲亚砜,在转化结束后,能使发酵液中出现较大的产物结晶,并使最终转化率达70％以上。产物与未转化的底物经吉拉德试剂分离纯化后,产物质量符合BP98 版标准。

17α-甲基睾丸素C1,2位高效生物脱氢菌种的选育

为利用简单节杆菌生物催化17α-甲基睾丸素C1,2位脱氢制备去氢甲基睾丸素,采用N+离子注入与Cs137-γ射线辐照两种方法进行菌种诱变,选育适宜于17α-甲基睾丸素C12,位脱氢的高转化菌株.结果表明,从16株简单节杆菌筛选出的TCCC11042,依次经N+离子注入与Cs137-γ射线辐照处理,通过甲基睾丸素为底物的摇瓶筛选,选育得到正变株F2-20,该菌株对17α-甲基睾丸素脱氢转化率达到60.8%,比出发菌株TCCC11042的转化率提高了12.8%.经群体传代方式考察,诱变株具有良好的遗传稳定性.