17α-乙炔雌二醇胁迫下零价铁对硝化污泥中抗性基因的影响

采用硝化污泥序批式反应器去除17α-乙炔雌二醇(EE2),基于宏基因组测序技术考察了零价铁(ZVI)对硝化污泥去除17α-乙炔雌二醇(EE2)过程中抗生素抗性基因(ARGs)的影响,结合菌群结构分析了其潜在影响机制.结果表明,硝化污泥处理EE2过程中ARGs丰度提高了724.42TPM(每百万转录本中来自于某基因的转录本数目),但ZVI削减了此过程中的ARGs丰度增长趋势,EE2及ZVI改变了ARGs亚型的分布,但对ARGs类型及亚型种类无明显影响.EE2使得硝化污泥中属于高风险等级(Q1及Q2)的ARGs丰度增加了555.75TPM及151.08TPM,ZVI降低了硝化污泥中的抗性风险.多重耐药是硝化污泥中丰度占比最大的高风险(Q1和Q2等级)ARGs类型,占比高达49.23%.微生物群落是硝化污泥中ARGs的重要驱动因子,鞘脂单胞菌属(Sphingopyxis)等菌属与多种ARGs显著正相关,可能是多种ARGs的共同潜在宿主.

好氧污泥对17β-雌二醇吸附性能的研究

研究了好氧活性污泥与失活好氧污泥对17β-雌二醇的吸附性能。17β-雌二醇初始质量浓度为500-10000ng／L，采用失活好氧污泥进行吸附，考察了吸附平衡时间、pH与温度对吸附的影响。研究结果表明，失活好氧污泥对17β-雌二醇的吸附在30min内达到平衡；pH在6～9时对吸附没有影响，pH为9以上时，随着pH升高吸附量减少；温度升高吸附能力降低；其吸附符合Fretmdlich吸附，且呈线性吸附。在10、20、30℃时，Freundlich吸附常数KF分别为91．81、80．65、61．49L／kg，分配系数Kd分别为561．80、435．60、306．70L／kg。另外研究了20℃时好氧活性污泥的KF与Kd，它们分别为91．72、514．90L／kg，与同温下失活好氧污泥的KF和Kd差别均小于20%。

好氧/厌氧污泥对17β-雌二醇的降解特性

采用好氧、厌氧交替运行的污水处理厂的活性污泥处理内分泌干扰物17β-雌二醇(E2),分别考察了好氧和厌氧条件下,污泥对E2及其降解中间产物——雌酮(E1)的去除效果,同时考察了污泥混合液中碳源和氮源对E2降解的影响。结果表明,在好氧条件下,活性污泥对E2、E1均有很好的降解效果,E2的未检出时间均在70 min左右,E1的未检出时间均在110 min左右,添加碳源和氮源对E2的降解速率无显著影响。厌氧污泥对E2和E1的降解速率远小于好氧活性污泥的,添加碳源对E2、E1的降解有一定的抑制作用,而添加氮源可以促进对E1的降解,但对E2降解的影响较小。好氧条件下活性污泥对E2的降解符合一级反应动力学方程;厌氧条件下,特别是有NO3--N存在的条件下,污泥对E2的降解不符合一级反应动力学。

缺氧活性污泥对17β-雌二醇的吸附与降解研究

试验用缺氧活性污泥降解17β-雌二醇，降解过程中，同时测定17β-雌二醇在水相与泥相上的浓度，考察了缺氧活性污泥对17β-雌二醇的吸附等温线与降解动力学，并研究了温度和电子受体NO3^- -N浓度对吸附与降解的影响。结果表明，缺氧活性污泥对17β-雌二醇的降解是在泥中进行，水中不直接降解，泥中物质浓度降低后再吸附水中物质，反应是一个动态的吸附降解平衡过程。17β-雌二醇初始浓度为5～15μg/L时，2 h内能完全降解，缺氧降解符合一级反应动力学;降解过程中，17β-雌二醇在缺氧活性污泥上的吸附既符合Freundlich模型又符合线性吸附模型，温度对17β-雌二醇的吸附与降解有很大影响，温度升高反应速率常数增加，但分配系数降低.10、20、30℃条件下，其降解速率常数分别为2.411、3.045、3.527 h^-1;分配系数kd分别为540.9、460.4、396.9 L/kg.NO3^- -N浓度（10～30 mg/L）的变化影响17β-雌二醇的缺氧降解，减少或增加NO3--N浓度，降解速率常数降低的最大变幅约20%。

厌氧污泥对17β-雌二醇的吸附行为研究

采用静态摇瓶试验,研究了厌氧污泥对17β-雌二醇(E2)的吸附行为。结果表明,pH值对吸附过程有一定影响,中性条件有利于厌氧污泥对E2的吸附;吸附过程是放热反应,吸附能力随温度的升高而降低;投加氯化铁和针铁矿在一定程度上均可以促进厌氧污泥对E2的吸附。准二级动力学方程和Freundlich方程可以很好地描述此吸附过程。

17-β-雌二醇对心肌缺氧/复氧NF-κB及ICAM-1和VCAM-1表达的影响

利用乳鼠原代培养心肌细胞建立缺氧/复氧模型,采用流式细胞术、Western blot、RT-PCR及Elisa等方法,研究了17-β-雌二醇对缺氧/复氧诱导的ICAM-1和VCAM-1表达的影响,分析雌激素在心肌缺氧/复氧损伤中的抗炎作用.结果表明,心肌缺氧/复氧使NF-κB p65活化,雌激素对NF-κB活化有明显的抑制作用.雌激素对NF-κB途径和对非NF-κB途径ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达都有抑制作用.以上结果说明雌激素在心肌缺氧/复氧过程中的抗炎作用是通过多途径实现的.

17β-雌二醇对体外培养牛输卵上皮细胞中环氧合酶-2的表达影响

目的:阐明17β--雌二醇(17β—estradiol,E2)对体外培养的奶牛输卵管上皮细胞(bovine oviduct epithelialcells,BOECs)中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因表达的影响。方法:分离培养BOECs,建立BOECs培养体系作为体外试验模型,分别在培养液中添加10 pg/mL的E2分别培养2h、4h、6h,提取细胞总RNA及细胞总蛋白,利用实时荧光定量PCR,Western blot等实验技术检测COX-2 mRNA和蛋白的表达量。结果:输卵管上皮细胞的COX-2基因表达随添加E2培养液增加2h、4h明显高于对照组。结论:试验数据显示在体外培养的BOECs中E2影响牛输卵上皮细胞中COX-2的表达。

贫营养条件下17β-雌二醇厌氧生物降解规律研究

17β-雌二醇作为环境甾体雌激素污染的主要污染物之一,广泛分布于自然环境中。采用批次实验,研究了在贫营养条件下17β-雌二醇厌氧生物降解规律。结果表明,在贫营养条件下,厌氧污泥对17β-雌二醇的去除率达到90%(35℃,76 d),且降解作用主要集中在快速降解阶段,降解规律符合一级降解动力学模型(R2=0.95);厌氧污泥对17β-雌二醇的去除主要是通过转化为雌性效力较低的雌酮,再由雌酮转化为其他的转化产物,如17α-雌二醇;Fe(Ⅲ)对17β-雌二醇的去除和转化没有显著的影响。接种污泥的内源代谢作用产生甲烷,Fe(Ⅲ)的存在可以提高甲烷的产率,但对甲烷的总量没有显著影响。

17-β雌二醇对宫颈癌Hela细胞环氧合酶-2和增殖细胞核抗原表达的影响

目的:探讨17-β雌二醇(E2)对宫颈癌Hela细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:Hela细胞分别用0.1%乙醇(对照组)、E2(E2组)、E2+依托昔布(E2+依托昔布组)作用24 h后,采用免疫细胞化学、Western blot及RT-PCR方法检测COX-2和PCNA的表达。结果:E2组COX-2和PCNA蛋白及mRNA水平较对照组明显升高(P<0.01);而E2+依托昔布组PCNA水平较E2组显著降低(P<0.01),但依然高于对照组。结论:E2可促进Hela细胞COX-2表达,并进一步上调PCNA水平。

17β-雌二醇对氧糖剥夺神经元的保护作用

目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对氧糖剥夺大鼠皮层神经元的保护作用。方法体外培养鼠脑皮层神经元,建立缺血缺氧模型。利用MTT代谢法、流式细胞术和Hoechst33342荧光染色观察E2(10-8mol/L)对缺氧损伤皮层神经元细胞活力和凋亡的影响;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测超氧化物歧化酶(SOD)活力变化。结果氧糖剥夺后神经元细胞活力显著降低,凋亡率升高,MDA生成增多,SOD的活力下降,与空白对照组相比有统计学差异(P<0.05);E2预处理后细胞活力升高、凋亡率下降、MDA生成减少、SOD的活性升高,与氧糖剥夺组相比有统计学差异(P<0.01)。结论E2对氧糖剥夺神经元具有保护作用,其作用可能与SOD活性提高拮抗氧自由基对细胞的损伤有关。

污水处理中17β-雌二醇的去除机理研究

介绍了污水处理中17β-雌二醇(E2)的去除机理及其去除效果的影响因素。研究表明,E2是生活污水中普遍存在,最具潜在影响、作用最强的一种类固醇雌激素;污水处理过程中,活性污泥吸附作用可使E2浓度迅速降低,而生物降解是去除E2的主要方式且去除过程遵循一级反应,E1是E2生物降解过程中的中间产物。在好氧条件下,提高温度、延长水力停留时间和泥龄、强化硝化等均可一定程度上提高E2的去除效率。

17β-雌二醇激发鲻早期精子发生的作用机制

将雄性幼鲻(Mugil cephalus)分为4组,分别投喂含17β-雌二醇饲料组、含三苯氧胺(Tamoxifen)饲料组、含17β-雌二醇和三苯氧胺(Tamoxifen)混合饲料,以及对照组,旨在进一步研究17β-雌二醇对幼鲻精子发生的作用机制。同时,采用组织学和免疫组织化学方法对17β-雌二醇影响鲻精巢精子发生及其作用机制进行分析,结果表明,雌激素明显促进鲻精原细胞有丝分裂及增殖和精子发生;Tamoxifen组与混合组于实验后30d取材观察,两组精巢切片均显示,雄性鲻精巢发育停滞,精原细胞坏死、凋亡,Sertoli’s细胞形态结构发生改变、数量下降。这进一步证实雌二醇激发精子发生必须经其受体的介导。雌激素受体(ER)在精巢的免疫组织化学定位揭示,ER在雌激素组免疫活性最高,对照组次之,混合投喂组免疫活性非常弱,而Tamoxifen组则显免疫阴性反应,这为雌激素对鲻精巢的精子发生起着关键作用的论点提供可靠确凿的新证据,同时表明在鲻早期精子发生中,一旦雌激素不足或缺失,精巢的发育质量和生精能力就会受到严重的影响。

好氧颗粒污泥等温吸附甾体雌激素

为了研究好氧颗粒污泥对甾体雌激素E1、E2、EE2的吸附作用,通过摇瓶试验考察了吸附平衡时间及在不同温度下的等温吸附过程,对该过程进行了Freundlich方程和Langmuir方程拟合分析,并采用SEM观察好氧颗粒污泥结构.实验结果表明,吸附40min后基本达到平衡;吸附量随着温度的升高而减少,在20℃时,E1、E2、EE2最大吸附量分别为60.98、58.82、82.64μg/g;吸附过程符合Freundlich方程和Langmuir方程,其相关系数R2分别为0.93~0.99和0.92~0.99;吸附后好氧颗粒污泥表面及内部均发生了变化.

厌氧颗粒污泥对水中17β-雌二醇的吸附

采用厌氧颗粒污泥（AnGS）对17β-雌二醇（E2）进行吸附试验，考察了E2初始浓度、AnGS的用量、温度、pH值和离子强度对吸附过程的影响，并通过扫描电镜（SEM）分析了吸附前后AnGS的表观变化。结果表明：前20min为快速吸附过程，在30min左右达到动态吸附平衡；吸附容量随着E2初始浓度的增加而增大，但随AnGS的增多而减少。低温、低pH值条件有利于AnGS对E2的吸附；离子强度在0～0．025mol／L时有利于吸附，而在0．025～0．125mol／L时不利于吸附。吸附E2后AnGS的外表面和内部的孔隙均变小，且外表面结构比内部更加紧密，表明对E2的吸附主要发生在AnGS的外表面。

HA@Fe_(3)O_(4)修饰阳极增强微生物燃料电池降解类固醇雌激素

利用腐植酸(HA)与具有较强电容性的纳米Fe_(3)O_(4)颗粒形成的金属化合物(HA@Fe_(3)O_(4))修饰微生物燃料电池(MFC)阳极,探究含有以17α-乙炔基雌二醇(EE2)为代表性类固醇雌激素(SEs)的模拟废水在MFC阳极的降解特性,并对EE2降解过程中MFC的产电特性进行了表征。电化学交流阻抗测试结果表明,与不存在HA@Fe_(3)O_(4)的MFC相比,存在HA@Fe_(3)O_(4)的MFC的欧姆阻抗降低了79.58%,电荷转移阻抗降低了89.60%。循环伏安扫描结果显示,HA@Fe_(3)O_(4)的存在显著增加了阳极板的电容。HA@Fe_(3)O_(4)修饰阳极后MFC最大功率密度可达537.37 mW/m~2。HA@Fe_(3)O_(4)修饰的阳极可显著提高MFC对EE2的去除率,EE2在低浓度下(≤5.0μmol/L)可以介导电子转移,提高MFC的产电性能,进而提高MFC去除EE2的能力,但高浓度(5.0~10.0μmol/L)时会抑制微生物的活性并降低MFC产电效率。

17β-雌二醇抑制高氧所致少突前体细胞凋亡

目的探讨高氧及配对免疫球蛋白样受体B(Pir B)对大鼠体外少突前体细胞(OPCs)的影响,以及17β雌二醇(E2)的保护作用。方法用逆转录定量酶联反应(RT-q PCR)检测OPCs的Pir B m RNA和蛋白表达,用si RNA沉默OPCs的Pir B,高氧刺激后再用E2处理,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法和流式细胞术测定OPCs细胞存活率和凋亡率。结果高氧导致OPCs凋亡增加和活性降低,E2能够明显下调Pir B的表达,E2处理或沉默Pir B能够明显减少高氧所致的OPCs凋亡、增加细胞存活率。结论高氧导致OPCs的凋亡,而E2能够保护高氧所致的OPCs凋亡。

三苯氧胺对人子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞增殖的影响

目的:探讨三苯氧胺(TAM)在体外对Ishikawa人子宫内膜癌细胞株增殖的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度TAM作用不同时间对Ishikawa细胞增殖的影响,另应用MTT法、流式细胞术、免疫细胞化学方法观察比较TAM、17β-雌二醇(17β-E2)及两者联合作用不同时间后对Ishikawa细胞增殖率,细胞周期时相分布以及C-myc、bcl-2、Bax 3种蛋白表达的影响。结果:TAM对Ishikawa细胞的促增殖作用在一定剂量范围内有浓度依赖性,可使G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例升高;C-myc、bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达下降。结论:体外TAM可能通过调节细胞周期时相分布及上调C-myc蛋白、bcl-2蛋白,下调Bax蛋白表达,促进Ishikawa人子宫内膜癌细胞增殖。

雌激素对大鼠缺血心肌的保护作用

[目的]探讨雌激素在大鼠心肌缺血过程中的保护作用。[方法]将30只大鼠随机分为3组(每组10只),⑴假手术组(S组):对冠脉只穿线不结扎;⑵单纯缺血组(I组):冠脉结扎;⑶17β-雌二醇(E2)干预后的缺血组(E2组):利用1 mLE2(5μmol/L)干预1周,然后行冠脉结扎。除假手术组外,其余两组均通过结扎SD大鼠冠状动脉左前降支制备缺血20 min的大鼠心肌缺血损伤模型,检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,测定心肌细胞凋亡情况。[结果]①SOD值在S组、I组与E2组分别为(105.311±3.472)U/mL、(79.931±3.116)U/mL和(94.396±2.219)U/mL,其中后两组明显低于S组(P<0.05);MDA值在S组、I组与E2组分别为(18.842±1.166)μmol/g、(25.074±0.654)μmol/g和(19.745±0.917)μmol/g,I组较S组明显增高(P<0.01);②与I组SOD,MDA相比,E2组SOD活性及MDA值差异均有显著性意义(P<0.05);③E2组凋亡指数(34.67±8.85)低于I组(49.00±8.07),两者间差异存在显著性意义(P<0.05)。[结论]E2对心肌缺血具有保护作用,其机制可能是通过抗氧自由基损伤及抗心肌细胞凋亡发挥作用。

雌激素污染对水体微生物反硝化作用的影响

针对世界各国水体雌激素污染日趋严重的环境问题,文章选择典型天然环境雌激素——17β-雌二醇(E2)为污染源,构建实验室厌氧水体微生态系统,分析E2污染对水体微生物反硝化速率、反硝化终端产物比例和厌氧微生物活性的影响规律。结果表明,E2污染对水体微生物的反硝化速率和活性存在显著性显著抑制作用,但反硝化终产物中N2O的比例得到明显促进。因此,在厌氧条件下,微量E2污染会影响厌氧微生物活性和反硝化作用,对水体的氮素循环产生影响。

反义寡核苷酸对子宫内膜癌细胞雌激素受体亚型α特异性调控的研究

目的:初步建立子宫内膜癌雌激素受体亚型α(estrogenreceptorα, ERα)弱表达细胞模型,探讨ERα在子宫内膜癌发病机制中的作用,研究 17β 雌二醇(17β estradiol, E2 )及三苯氧胺(tamoxifen, TAM)在子宫内膜癌发病过程中与ERα的关系。方法:设计针对ERα的反义寡核苷酸 (antisenseoligodexyribonucleotides, AS ODN),转染入子宫内膜癌HEC 1B细胞,Westernblot测定转染后细胞ERα的表达;检测转染反义寡核苷酸后E2 和TAM对子宫内膜癌细胞生长影响的变化。结果: (1)针对ERα翻译启动区设计的反义寡核苷酸可以选择性下调ERα的表达。(2)E2 和TAM可以促进子宫内膜癌细胞系HEC 1B的生长。转染ERα AS ODN后可抑制E2 对子宫内膜癌细胞HEC 1B的促生长作用,这种抑制作用以转染后的 24, 48及 72h尤为明显。转染ERα AS ODN可抑制TAM对子宫内膜癌细胞HEC 1B的促生长作用,这种抑制作用在转染后的 48h最为明显。结论: 初步建立了ERα弱表达的子宫内膜癌细胞模型。反义核酸技术可以作为一种有效的特异性下调子宫内膜癌细胞中ERα的实验手段。在HEC 1B细胞中,ERα抑制E2 和TAM的促进子宫内膜癌细胞生长的作用。