^(131)Ⅰ-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用

目的探讨^(131)I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌细胞生长的影响及其相关机制。方法采用过氧化氢标记法制备^(131)I-17-AAG。细胞杀伤实验分为5组:二甲基亚砜(DMSO)对照(A)组,Na^(131)I 370 kBq(B)组,17-AAG 2.5 mg/L(C)组,^(131)I-17-AAG 370 kBq(D)组,^(131)I-17-AAG 370 kBq+17-AAG 2.5 mg/L(E)组。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各种药物对人乳腺癌细胞 MCF-7的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化,RT-PCR 检测药物处理前后 MCF-7细胞中 Akt2基因的 mRNA 表达情况。结果 ^(131)I-17-AAG 的标记率为83%,放化纯为96.6%,比活度为1.48×10~5MBq/μmol。各组药物对细胞的杀伤呈时间效应,随着时间的延长,细胞的抑制率都呈明显上升趋势,尤以 E 组趋势明显。A～E组药物作用48 h 后,通过亚 G1峰检测 MCF-7细胞凋亡率分别为(1.54±0.13)%,(5.72±1.05)%,(12.97±1.44)%,(20.65±1.36)%,(35.39±4.15)%,各组细胞凋亡率差异有统计学意义(P 均<0.05)。C 组,D 组及 E 组Akt2基因的 mRNA 表达均比 A 组降低,其中 E 组降低尤为明显。结论 ^(131)I-17AAG 能够抑制 MCF-7细胞的生长并促进其凋亡,且能有效抑制 Akt2基因的 mRNA 表达,和17-AAG 联合应用能够增强肿瘤细胞对放疗的敏感性。

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)对人鼻咽癌细胞株(Human nasopharyngeal carcinoma cell line,HNE1)增殖抑制和诱导凋亡的作用,探讨17-AAG在鼻咽癌临床治疗中的意义。方法:采用噻唑蓝(Thiazolyl blue,MTT)检测17-AAG对HNE1细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,Hoechst33528染色观察细胞的凋亡形态学变化并进行核碎片计数。结果:17-AAG抑制HNE1的增殖,诱导了细胞的凋亡,抑制作用具有浓度和时间依赖性。结论:17-AAG可诱导HNE1的凋亡,研究结果对药物治疗鼻咽癌有一定的临床指导意义。

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的:对一种热休克蛋白90抑制剂即17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌细胞生长的影响及相关机制进行初步探讨。方法:MTT法检测药物对人乳腺癌细胞SKB r3的生长抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化;免疫组化法检测药物处理前后SKB r3细胞中HER2的表达变化情况。结果:17-AAG对人乳腺癌细胞株SKB r3生长有抑制作用,随着用药浓度的增加,抑制作用明显增强,呈明显的剂量依赖性,其IC50浓度为3.09μg/m l。SKB r3细胞经17-AAG处理48 h后,流式细胞仪分析可见在0、0.625、1.250、2.500、5.000和10.000μg/m l浓度下,SKB r3细胞的凋亡率分别为(1.03±0.08)%、(3.68±0.67)%、(7.06±1.12)%、(11.23±1.36)%、(20.32±1.98)%和(31.65±2.96)%;G0/Gl期细胞分别为58.61%、54.34%、49.55%、43.73%、35.52%和27.46%;S期细胞分别为:29.57%、25.21%、19.65%、22.98%、19.71%和15.46%;G2/M期细胞分别为11.82%、20.45%、30.18%、33.29%、44.77%和57.08%;同时17-AAG处理后的SKB r3细胞人类表皮生长因子受体2(HER2)表达明显减少。结论:17-AAG能够抑制人乳腺癌细胞SKB r3的生长并促进其凋亡,提示17-AAG是一种很有前景的抗肿瘤药物。

^(131)Ⅰ标记热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的方法学研究

目的:建立131I标记热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,探讨其标记条件。方法:采用放射性碘标记氯胺-T法标记17-AAG,并研究其在ICR正常小鼠体内的生物分布。结果:131I氯胺-T法标记17-AAG的最佳条件为:17-AAG乙醇溶液40μl(含17-AAG 5μg),0.5 mol.L-1磷酸盐缓冲液50μl(pH7.5),Na131I溶液20μl,氯胺-T30μg.(15μl)-1(用pH7.5的0.05 mo.lL-1PB溶解),25℃反应50 s,偏重亚硫酸钠40μg.(20μl)-1(用pH7.5的0.05 mo.lL-1PB溶解)中止反应。标记率约为53.1%,经乙酸乙酯纯化后所得标记物的放射化学纯度>90%;其生理盐水溶液4℃放置5 d,放射化学纯度大于90%。小鼠尾静脉注射131I-17-AAG后0.5 h131I-17-AAG在胆囊达到高峰(369.44±147.81)%ID.g-1,肝脏中仅有(2.23±0.50)%ID.g-1,说明对肝脏毒性小。结论:热休克蛋白90抑制剂17-AAG的标记方法操作简便,反应时间短。

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响

目的探讨17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人鼻咽癌细胞(HNE1)的影响。方法采用流式细胞技术检测不同浓度(17-AAG)、不同时间处理后HNE1细胞凋亡情况,组织免疫细胞技术检测药物处理后对VEGF、Survivin蛋白表达的影响。结果 17-AAG可以诱导人鼻咽癌细胞的凋亡,且这种作用具有时间和计量依赖性,且可抑制细胞中VEGF、Survivin蛋白的表达。结论热休克蛋白抑制剂17-AAG具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用,对鼻咽癌的临床治疗具有一定的指导意义。

17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人绒毛膜癌JAR细胞系细胞周期和凋亡的影响及其相关机制

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人绒毛膜癌JAR细胞系细胞周期和凋亡的影响及其相关机制。方法体外培养人绒毛膜癌JAR细胞系,经不同浓度的17-AAG作用24 h后,采用TUNEL细胞凋亡法及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR法和Western blotting法检测血管内皮生长因子(VEGF)、cyclinD1、cyclin A1和Caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 17-AAG对JAR细胞生长具有明显的抑制作用,并存在浓度依赖性。各组细胞发生G_2期阻滞及明显凋亡;5、10、20 mg/L 17-AAG作用24 h后,各组细胞增殖相关基因cyclinD1mRNA及蛋白表达水平相对于0 mg/L 17-AAG处理组(对照组)均下调,VEGF蛋白表达水平相对于0 mg/L 17-AAG处理组(对照组)下调,且下调程度与处理浓度成正比,而凋亡相关基因Caspase-3的mRNA未出现明显上调,但其在蛋白表达水平上调。结论 17-AAG能够抑制JAR细胞增殖活力,诱导细胞凋亡,17-AAG可能通过下调VEGF的表达,产生抗肿瘤血管新生作用;可能通过下调cyclinD1使细胞周期发生G_2期阻滞;且可能通过上调Caspase-3诱导细胞凋亡。

格尔德霉素衍生物17-AAG对缺氧宫颈癌细胞凋亡的影响

目的:观察格尔德霉素衍生物17-AAG对氯化钴化学缺氧诱导的宫颈癌细胞凋亡的影响,并简单探讨可能的机制。方法:用含200μmol/LCoCl2的无血清RPMI 1640培养基模拟宫颈癌细胞缺氧微环境,West-ern Blot法检测缺氧诱导因子HIF-1α及其下游靶分子VEGF蛋白的表达,DAPI染色检测细胞的凋亡情况。结果:缺氧可诱导HIF-1α、VEGF蛋白的表达上调;但这种上调可被17-AAG所逆转,从而使宫颈癌细胞对缺氧的耐受能力明显降低,凋亡增加。结论:17-AAG通过对HIF-1α信号的干扰而具有一定的抗瘤活性。

HSP90抑制剂17-DMAG对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-二甲胺乙胺基-17去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖及凋亡的影响。方法:收集Jurkat细胞,应用HSP90抑制剂17-DMAG作用于细胞株,通过半定量PCR检测HSP90的基因表达,WST技术检测17-DMAG对细胞增殖的影响,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果:不同浓度17-DMAG作用于Jurkat细胞48 h后,HSP90 mRNA表达明显减少,且呈剂量依赖性(r=0.9530,P<0.01);17-DMAG处理Jurkat细胞48 h的IC50为3.17μmol/L,作用于Jurkat细胞后抑制Jurkat细胞增殖(r=0.9903,P<0.01),促进Jurkat细胞凋亡,且呈剂量依赖性(r=0.9876,P<0.01)。结论:HSP90抑制剂17-DMAG能够抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的增殖并诱导其凋亡。

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素增强慢性粒细胞白血病细胞对伊马替尼敏感性的机制研究

目的探索伊马替尼(IM)联合使用17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)增加慢性粒细胞白血病(CML)细胞株K562和K562A02凋亡率的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法观察细胞增殖抑制率,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率,逆转录-聚合酶链反应法检测Bcr-abl、MDR1、Bcl-2 mRNA的表达及Western blot法检测Bcr-abl、p-gp、Bcl-2蛋白的表达。结果0.31μg·mL-1伊马替尼联合1.25μg·mL-117-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素分别作用于K562和K562A02细胞48 h,增殖抑制率分别为(70.78±1.01)%和(39.27±1.52)%,凋亡率为(48.74±2.51)%和(45.0±0.4)%。2.5μg·mL-1伊马替尼联合10μg·mL-117-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素作用于K562A02细胞48 h,增殖抑制率达(65.63±0.93)%。逆转录-多聚酶链反应和Western blot结果显示,联合用药后K562细胞的Bcr-abl和Bcl-2基因显著降低,MDR1呈弱表达,无明显变化。而K562A02细胞中,Bcr-abl、Bcl-2和MDR1基因的表达均有明显下调(P<0.05)。结论伊马替尼联合17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素可有效抑制K562和K562A02细胞增殖和诱导凋亡,两者联合应用具有克服伊马替尼耐药的作用。

^131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对荷MCF-7乳腺癌模型的抑瘤作用

目的观察^131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠模型肿瘤生长的抑制作用。方法采用过氧化氢标记法制备^131I-17-AAG；将30只荷瘤裸鼠随机分成3组：^131I-17-AAG治疗组，二甲基亚砜（DMSO）对照组和单纯Na^131I治疗组。尾静脉注射相应试剂后，观察28d，比较肿瘤的体积，计算抑瘤率；Western blot检测肿瘤组织Akt2蛋白表达情况；观察肿瘤组织病理变化；TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡。结果给药28d，肿瘤体积依序分别为（63．75±8．62）、（96．79±14．75）、（83．12±10．89）mm^3；^131I-17-AAG组与DMSO对照组和^131I组两组间比较，差异有统计学意义（F=23．13，20．58，P〈0．01）；DMSO对照组和^131I组比较，差异无统计学意义（F=3．43，P〉0．05）；^131I-17-AAG治疗组Akt2蛋白表达较对照组明显降低。结论^131I-17-AAG能有效抑制裸鼠MCF-7乳腺癌的生长，对治疗人MCF-7乳腺癌有较好实践意义。

17-AAG通过抑制Erk信号通路增强奥沙利铂诱导结肠癌细胞凋亡

目的研究17-AAG与奥沙利铂是否存在协同效应,并探讨PI3K/Akt、Erk信号通路在奥沙利铂联合17-AAG诱导人结肠癌细胞凋亡过程中的作用。方法四甲基偶氮唑盐比色实验(MTT法)检测17-AAG、奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡情况;Western blot法检测相关蛋白的表达水平。结果 17-AAG能抑制RKO细胞的增殖;17-AAG联合奥沙利铂作用于RKO细胞24h后,G2/M期细胞比例及凋亡率明显增加;奥沙利铂抑制p-Akt、p-Erk的活化,上调Bax,下调Bcl-2蛋白表达,活化裂解Caspase-3,联合使用17-AAG后可进一步增强上述作用,但对PI3K/Akt信号通路影响不大。结论本实验表明17-AAG具有增强奥沙利铂诱导结肠癌RKO细胞凋亡的作用,同时也说明17-AAG与奥沙利铂存在协同效应;17-AAG上调Bax,下调Bcl-2蛋白表达及增强奥沙利铂对Erk信号通路的抑制作用可能是其促进凋亡的重要机制之一。

17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对NCI-N87胃癌细胞增殖侵袭与血管生成因子表达的影响

目的探讨17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对NCI-N87胃癌细胞增殖和血管生成因子的影响。方法将NCI-N87胃癌细胞分为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组加入含等量磷酸盐缓冲溶液的DMEM培养基进行培养;低、中、高剂量实验组分别给予含5,10和20 nmol·L^(-1)17-AAG的DMEM培养基进行培养。用噻唑蓝法检测细胞增殖率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的表达水平,用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子A(VEGF-A)和内皮素1(ET-1)的表达水平。结果低、中、高剂量实验组和对照组在干预48 h后的增殖率分别为(75.56±0.57)%,(79.99±0.81)%,(66.12±1.54)%和(99.70±1.25)%。17-AAG对NCI-N87胃癌细胞的增殖抑制具有明显的剂量和时间依赖性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。低、高剂量实验组和对照组的HIF-1αmRNA表达相对水平分别为0.77±0.27,0.29±0.21和1.03±0.05,Transwell穿越细胞数分别为(447.69±124.33),(197.59±107.98)和(625.25±98.37)个,VEGF-A蛋白相对表达量分别为0.63±0.21,0.22±0.10和1.01±0.12,ET-1蛋白相对表达量分别为0.71±0.27,0.16±0.09和1.03±0.09。低、高剂量实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论17-AAG通过下调HIF-1α的表达,以及抑制VEGF-A和ET-1的表达,从而达到抑制NCI-N87胃癌细胞增殖的作用。

缺氧条件下Hsp90抑制剂17-AAG对RPE细胞整联蛋白连接激酶表达的影响

目的:研究热休克蛋白(heat shock protein 90,Hsp90)抑制剂17-AAG对缺氧诱导的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞整联蛋白连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)表达的影响。方法:利用200μmol/L氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)建立体外RPE细胞的化学缺氧模型。不同浓度的Hsp90抑制剂17-AAG预处理RPE细胞1h后给予12h缺氧处理。实验分为缺氧对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组和17-AAG预处理组。其中17-AAG预处理组根据浓度不同又分为6组:0.01,0.10,0.50,1.00,5.00,10.00μmol/L。应用RT-PCR和Western blot方法检测ILK表达变化情况。结果:缺氧对照组、DMSO对照组和17-AAG预处理组ILK mRNA与内参β-actin mRNA光密度比值分别为1.32±0.04,1.29±0.03,0.93±0.06,0.70±0.05,0.53±0.03,0.44±0.04,0.32±0.04,0.30±0.03;ILK蛋白与内参β-actin蛋白光密度比值分别为2.16±0.04,2.13±0.04,1.65±0.04,1.13±0.05,0.74±0.03,0.41±0.06,0.35±0.04,0.35±0.03。与缺氧对照组比较,17-AAG预处理组ILK mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05),呈浓度依赖性。结论:Hsp90抑制剂17-AAG能够降低缺氧条件下RPE细胞ILK的表达。

RGD脂肪醇与17-AAG脂质体的制备及抗肿瘤活性研究

目的制备一种新的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸-脂肪醇(Arg-Gly-Asp-Phe-fatty alcohol,RGDFOC12)与17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)的脂质体(RGDFOC12liposomes-loaded 17-AAG,RLAs)。方法采用薄膜分散-探头超声法制备;采用激光纳米粒度仪、透射电镜和扫描电镜测定粒径,Zeta电位和外观形态;采用动态透析法测定药物释放;采用四甲基偶氮唑盐〔3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT〕考察其对5种人肿瘤细胞株增生的抑制作用;通过瘤质量、存活数、体质量、脏器指数比评价其在小鼠体内抗肿瘤效果。结果制备得到的RLAs的粒径为(130.6±0.6)nm,Zeta电位为(-28.37±1.67)m V,外观形态为球形,包封率为80%以上。RLAs在p H 5.4环境的累积释放百分数大于在p H 7.4环境的累积释放百分数。RLAs在血浆中可稳定存在,12 h累积释放百分数为(15.85±0.71)%。RLAs对5种肿瘤细胞有抑制增生作用。RLAs对接种S180腹水瘤的ICR小鼠有抑制肿瘤生长作用。结论本研究制备了一种新的RLAs,制备方法简单、包封率高,具有较好的抗肿瘤活性。

shRNA抑制HSF-1表达增强17-aag抗结肠癌疗效的体外实验研究

目的:探讨热休克蛋白HSP90拮抗剂17-烯丙胺基-17-脱甲氧基格尔德霉素(17-aag)对体外结肠癌细胞株SW1116增值的抑制作用及其作用方式,并分析热休克因子-1(HSF-1)对17-aag诱导凋亡的影响。方法:将不同浓度的17-aag作用于野生型SW1116细胞株24、48、72 h,应用CCK-8法测定各处理组细胞的活性,计算增值抑制效应,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化及细胞凋亡比例。构建针对HSF-1的shRNA质粒,通过瞬转质粒及药物干预的不同将肿瘤细胞分为4组,即HSF-1(-)17-aag(-)组、HSF-1(-)17-aag(+)组、HSF-1(+)17-aag(-)组、HSF-1(+)17-aag(+)组。注:HSF-1(-)代表转染了含目的干扰片段质粒,HSF-1(+)代表转染了空载质粒,17-aag(-)代表未受17-aag干预,17-aag(+)代表受17-aag干预。每组细胞经相应处理后,通过FCM测定各组在处理后的细胞凋亡比例,比较各处理因素对结肠癌细胞株SW1116的杀伤作用。通过Western印迹检测各组中HSP90、HSP70、HSP27的表达量,评价细胞凋亡比例的高低与热休克蛋白的表达量是否有关。结果:17-aag对野生型SW1116细胞增殖具有明显的抑制作用,可诱导G2/M期周期阻滞和细胞凋亡。转染组细胞后,HSF-1(-)17-aag(-)组与HSF-1(+)17-aag(-)组间细胞凋亡比例差异无统计学意义;HSF-1(-)17-aag(+)组较HSF-1(+)17-aag(+)组细胞凋亡比例高,而细胞内HSP90、HSP70、HSP27表达量均较HSF-1(+)17-aag(+)组降低。结论:17-aag可诱导体外结肠癌SW1116细胞发生凋亡和周期阻滞。在干扰HSF-1表达后,17-aag诱导细胞凋亡的作用明显增强。

17-DMAG体外对结肠癌HT-29细胞的影响及细胞内活性氧的研究

目的观察17-二甲胺乙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)对人结肠癌HT-29细胞增殖、细胞凋亡的影响及其细胞内活性氧(ROS)的变化。方法用CCK-8检测17-DMAG对结肠癌HT-29细胞增殖影响;AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞检测细胞凋亡率;酶标仪检测细胞内ROS的变化。结果 17-DMAG呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增殖。0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.5μmol/L作用于HT-29细胞24h后,细胞增殖抑制率分别为(22.17±1.15)%、(28.45±1.16)%、(35.04±1.58)%和(46.85±2.44)%,作用48h后,细胞增殖抑制率分别为(27.55±0.65)%、(33.33±1.23)%、(46.20±4.76)%和(55.45±4.47)%,作用72h,细胞增殖抑制率分别为(39.19±1.74)%、(44.29±2.00)%、(50.66±2.17)%和(58.84±3.18)%。正常对照组HT-29细胞24h的自然总凋亡率(早期+晚期)为(2.72±0.57)%,0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L17-DMAG干预24h后细胞总凋亡率分别为(5.38±0.46)%、(6.88±0.52)%、(10.44±0.32)%与(17.87±4.66)%,17-DMAG作用HT-29细胞24h的凋亡率与对照组细胞凋亡率相比差异有统计学意义(P<0.05)。0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L17-DMAG作用HT-29细胞12h与24h,其活性氧水平均较对照组有不同程度的上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 17-DMAG体外呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增殖,诱导其凋亡,可能部分与细胞内的ROS升高有关。

^131I-17-AAG对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠的抗癌效应

目的观察^131I标记17-丙烯胺基-17．去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑癌效应。方法过氧化氢法制备^131I-17-AAG。建立荷H460人非小细胞肺癌BALB／c裸鼠模型，28只荷瘤裸鼠按随机数字表法分为7组（n=4），瘤内和尾静脉注药各3组，剂量依次为5．5MBq×2（间隔8d）、11．0MBq和5．5MBq及空白对照组。另设Na^131I瘤内给药对照组。8组分别于注药后2，6，24h及2，3，7，10，16d各取2只鼠行吖显像。观察肿瘤生长情况，16d后处死全部小鼠，计算抑瘤率，并做光学显微镜、电镜及免疫组织化学检测。计量数据以x±s表示，采用SPSS 13．0软件进行统计分析。结果SPECT显像证实^131I-17-AAG靶向定位好，能较长时间聚集在瘤体内；各治疗组存在不同程度抑瘤效应，以瘤内间隔给药（5．5MBq×2）组疗效最好，抑瘤率高达（86．77±4．57）％，尾静脉给药5．5MBq×2组和11．0MBq组间差异无统计学意义（q=1．67，P〉0．05），余各组间抑瘤率差异均有统计学意义（q=3．16～24．34，P均〈0．05）；形态学显示抑瘤效应越好，瘤组织破坏越明显；免疫组织化学显示瘤内及尾静脉注药组热休克蛋白90（HSP90）α阳性率[分别为（26．01±3．71）％、（61．57±5．98）％]均较空白对照组[（84．13±5．71）％]下降（t值分别为20．91和6．68，P均〈0．05）。结论^131I-17-AAG能有效抑制裸鼠非小细胞肺癌的生长，以瘤内注药及间隔给药抑癌效应最佳。

17-AAG及其衍生物治疗肺癌研究进展

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）及衍生物17-AAGH2、17-DMAG是热休克蛋白90竞争性抑制剂，能够降解多条信号传导通路关键蛋白，抑制肿瘤细胞生长，促使凋亡。临床Ⅰ-Ⅱ期研究证明，17-AAG及衍生物能够抑制T790M表达类型肺癌细胞，抑制肺癌细胞表皮生长因子受体，协同化疗药物细胞毒性、放射增敏作用。

17-DMAG体外对结肠癌HT-29细胞增生和凋亡的影响

目的观察17-二甲胺乙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（ 17- dimethylmninoeihylanino- 17- de-methoxygehtanamyein, 17- DMAG ）对人结肠癌HT-29细胞增生抑制及诱导其凋亡的作用。方法用CCK-8检测17-DMAG时结肠癌HT-29细胞增生的影响；DAPI染色在倒置荧光显做镜下观察17-DMAG作用于HT-29细胞24h后细胞核的形态；AnnexinV—FITC／PI蚁染法流式细胞检测细胞捌亡率；免疫印迹实验分析Caspase-3蛋白表达水平变化。结果17-DMAG呈时间-剂量-依赖性抑制HT-29细胞增牛。0．1μmol／L、0．25μmoL／L、0．5μmol／L、1．0μmol／L、2．5μmol／L和0．5μmol／L作用于HT-29细胞24h后，细胞增生抑制率分别为（14．36±0．95）％、（22．17±1．15）％、（28．45±1．16）％、（35．04±1．58）％、（46．85±2．44）％和（57．19±2．06）％；作用48h后，细胞增生抑制率分别为（20．80±1．17）％、（27．55±0．65）％、（33．33±1．23）％、（46．20±4．76）％、（55．45±4．47）％和（61．75±2．72）％；作用72h，细胞增生抑制率分别为（29．62±2．27）％、（39．19±1．74）％、（44．29±2．00）％、（50．66±2．17）％、（58．84±3．18）％和（70．74±2．65）％。DAPI染色倒置荧光显微镜观察0．25μmol／L、0．5μmol／L、1．0μmol／L与2．5μmol／L的17-DMAG作用HT-29细胞24h，均可见到细胞凋亡的改变。Annexin V-FITC双染法检测结果显示，正常对照组HT-29细胞24h的自然总凋亡率（早期±晚期）为（2．72±0．57）％，0．25μmol／L、0．5μmol／L、1．0μmol／L和2．5μmol／L17-DMAG干预24h后细胞总凋亡率分别为（5．38±0．46）％、（6．88±0．52）％、（10．44±0．32）％与（17．87±4．66）％，不同浓度组的细胞凋亡率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。17-DMAG药物作用HT-29细胞24h，随着药物剂量的增加，cleavedCaspase-3的表达有增加趋势。结论17-DMAG体外呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增生，诱导其通过Caspase-3途径凋亡。

药物17-AAG 对人肺癌细胞系的放射敏感性影响

目的：研究17.AAG 对人 NSCLC 细胞系 A549的放射增敏作用并简析其可能机制。方法 MTT 实验检测17.AAG 对 A549细胞的生长抑制作用。多靶单击拟合克隆存活曲线分析药物对细胞放射增敏作用。β.半乳糖苷酶染色实验观察药物对细胞衰老产生的影响。γ.H2AX 免疫荧光染色分析药物对 DNA 损伤修复的影响。组间比较行成组 t 检验或方差分析。结果17.AAG 对 A549细胞增殖抑制作用呈时间剂量依赖性（P＝0．01～0.05）。与单纯照射组相比加药照射组克隆形成率降低，50 nmol／ L 时的放射增敏比为1.79（D0值比）、2.30（Dq 值比）。药物＋4 GyX 射线照射后72 h 引发细胞衰老比例为30.48％，高于单纯用药组（9.18％，P＝0.00）与单纯照射组（12.30％，P＝0.00）。免疫荧光染色观察到17.AAG 使 DNA 损伤修复延迟。结论17.AAG 对人肺癌 A549细胞有生长抑制及放射增敏作用，其增敏机制可能为与引发细胞衰老和延迟 DNA 损伤修复有关。