17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠的影响。方法 SD大鼠60只随机分为6组,每组10只:假手术组,模型组,溶媒组,阳性药地尔硫卓组,YLSC低剂量组(2.50 mg/kg)、YLSC高剂量组(5.00 mg/kg)。缺血30 min再灌注60 min复制大鼠I/R模型。观察大鼠血流动力学指标HR,MAP,LVEDP和±dp/dtmax的变化,测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase)的含量。结果与模型组比较,YLSC能剂量依赖性地降低HR、MAP和±dp/dtmax,升高LVEDP(P<0.05或P<0.01);YLSC还能剂量依赖性地减少MDA的释放,增加SOD、Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase的活性(P<0.05或P<0.01)。结论 YLSC能改善I/R大鼠的心功能,机制可能与抗氧化、保护Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性有关。

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮的分离及晶体结构

[目的]研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮的分离方法及晶体结构。[方法]利用液液萃取、硅胶柱色谱、重结晶等方法进行目标物的分离,并通过IR、NMR、ESI-MS、X-射线单晶衍射等手段鉴定晶体结构。[结果]晶体结构分析结果表明,该化合物为单斜晶系,空间群P2(1)/c,晶胞主要参数:a=10.881 3(16)nm,b=9.795 4(14)nm,c=13.347 3(19)nm,V=1 382.2(3)nm3,Z=4,Dc=1.414mg/m3,F(000)=616,μ=0.100/mm。[结论]从玉郎伞[Millettia Pulchra Kurz var.Laxior(Dunn)Z.Wei]的60%(体积分数)乙醇水提取物中首次分离并鉴定了17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮。

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对大鼠凝血功能和血小板聚集的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对体内外血小板聚集和凝血功能的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为5组:对照组(含0.5%DMSO的生理盐水),YLSC低、中、高剂量组(2.5,5,10 mg.kg-1),阳性药阿司匹林组(10 mg.kg-1)。尾静脉注射相应药物1周后,腹主动脉采血,分别加入二磷酸腺苷(ADP)、胶原和花生四烯酸(AA)诱导血小板聚集,测定大鼠体内外血小板聚集率;同时观察YLSC对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响。结果:与对照组相比,YLSC能显著抑制ADP和胶原诱导的大鼠体内、外血小板最大聚集率(P<0.05或P<0.01),最大抑制率分别为38.4%,42.5%,对AA诱导的血小板聚集无明显抑制作用;YLSC能显著延长大鼠血浆TT,APTT(与对照组比较,P<0.05或P<0.01),对PT无显著影响。结论:YLSC具有对抗血小板聚集和抗凝血作用。

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对垂体后叶素致大鼠心肌缺血的保护作用

目的:观察17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对垂体后叶素(Pit)致心肌缺血大鼠的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,每组10只:正常对照组,模型对照组,溶媒组,阳性药对照组,YLSC低、中、高剂量组(1.25,2.50,5.00 mg.kg-1)。各组尾静脉给予相应药物后,观察垂体后叶素致心肌缺血大鼠Ⅱ导联心电图的变化,伊文思蓝和三苯基氯化四氮唑(TTC)双重染色确定心肌缺血面积,HE染色观察心肌形态学变化,Elisa法检测血清生化标志物MB型肌酸激酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)和肌红蛋白(MyoG)的含量。结果:YLSC能剂量依赖性的减少大鼠15 s,30 s,1 min,5 min的ST段抬高,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);同时能剂量依赖性的缩小模型组心肌缺血面积(P<0.05或P<0.01),减少心肌标志物CK-MB,cTnI,MyoG的漏出(P<0.05或P<0.01),改善心肌水肿、出血和炎细胞渗出的状况。结论:YLSC对垂体后叶素所致心肌缺血大鼠有明显保护作用。

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对心肌细胞内游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对H2O2诱导的心肌细胞内钙超载的拮抗作用及对L型钙电流(ICa-L)的影响。方法:采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,实验分为①正常对照组;②H2O2组:上机前加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;③预先给予低、中、高不同终浓度YLSC药物处理组:分别给予100,200,400μmol.L-1YLSC的无血清培养基,孵育24 h,上机前加入终浓度为0.3 mmol.L-1H2O2,以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入H2O2后15 min内检测细胞内[Ca2+]i的变化;分离昆明种小鼠单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录YLSC对ICa-L的影响。结果:①与正常对照组比较,H2O2诱导的模型组细胞内[Ca2+]i增加60.43%±7.75%,而高、中、低YLSC预处理组[Ca2+]i分别增加38.39%±13.87%,14.49%±2.94%,-28.1%±1.52%,与模型组比较显著降低(P<0.01)。②YLSC可使心室肌细胞ICa-L的电流-电压(I-V)关系曲线上移,能改变ICa-L的激活和失活特征,使ICa-L的激活曲线和稳态失活曲线左移。结论:YLSC对心肌细胞钙离子通道有较好的阻断作用,能显著减轻H2O2诱导的心肌细胞内[Ca2+]i超载。

YLSC对心肌缺血再灌注损伤细胞ASK1、Cyt-C、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察从壮族特色药材玉郎伞中分离的新化合物17-甲氧基-7-羟基—苯并呋喃查尔酮(YLSC)对大鼠缺血再灌注诱导的细胞凋亡的影响及机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组、YLSC低剂量组、YLSC高剂量组、地尔硫艹卓组,每组10只。各组均于造模前10 min通过尾静脉注射药物2 mL/kg,所用药物前两组为生理盐水;溶媒组为含0.5%二甲基亚砜的生理盐水;YLSC低、高剂量组为2.5、5.0 mg/kg的YLSC;地尔硫艹卓组为盐酸地尔硫艹卓注射液2.0 mL/kg。各组均按照文献制备心肌缺血再灌注模型(缺血30 min再灌注1h),假手术组仅穿线不结扎。实验结束后立即处死动物取心肌组织,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Westernblot法检测凋亡信号调节蛋白1(ASK1)、细胞色素c(Cyt-C)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果假手术组仅见个别散在的凋亡细胞,余五组凋亡细胞均明显多于假手术组,YLSC低、高剂量组及地尔硫艹卓组凋亡细胞数均显著少于模型组,其中YLSC高剂量组显著少于低剂量组(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,YLSC低、高剂量组ASK1、Cyt-C、Bax蛋白表达均明显降低,Bcl-2蛋白表达明显升高,且呈YLSC剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。结论 YLSC能明显减轻缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达、下调ASK1、Cyt-C、Bax蛋白表达有关。

玉郎伞MHBFC调控eNOS-NO信号通路逆转大鼠心室重构的机制研究

目的观察玉郎伞单体17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(MHBFC)调控心肌微血管内皮细胞(MMVEC)eNOS-NO信号通路,逆转大鼠压力超负荷心室重构的机制。方法将缩窄腹主动脉的成活大鼠随机分为假手术组、模型组、MHBFC 6 mg·kg^(-1)组、MHBFC 12 mg·kg^(-1)组、MHBFC 12 mg·kg^(-1)+亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)50 mg·kg^(-1)组、L-NAME 50 mg·kg^(-1)组。假手术组只游离腹主动脉,不缩窄。分组后,各组给予相应药物6周。化学消化法分离左心室组织获得MMVEC;Dil-Ac-LDL吞噬实验鉴定MMVEC;qPCR检测MMVEC eNOS、PI3K和Akt基因表达;Western blot检测MMVEC p-eNOS、p-PI3K和p-Akt蛋白表达。结果 MHBFC预处理组明显上调MMVEC p-eNOS、p-PI3K、p-Akt蛋白表达,以及MMVEC eNOS、PI3K、Akt基因表达;L-NAME组MMVEC p-eNOS蛋白及eNOS基因表达明显下调;合用MHBFC后明显逆转上述指标的下调。结论 MHBFC可能通过增加MMVEC PI3K、Akt磷酸化及PI3K、Akt基因表达,增加MMVEC eNOS蛋白磷酸化及eNOS基因表达,激活MMVEC eNOS-NO信号通路,从而逆转压力超负荷心室重构。

制备液相色谱分离制备玉郎伞查尔酮类化合物

目的对壮药玉郎伞查尔酮类化合物进行分离制备和结构鉴定。方法利用制备液相色谱分离、制备查尔酮类化合物,经HPLC测定其质量分数、用UV,IR,MS,1D、2D-NMR,X射线单晶衍射等对其进行结构鉴定。结果从玉郎伞中首次分离制备出两种查尔酮类化合物,其结构分别为cis-2,6-二甲氧基查尔酮和cis-17-甲氧基-7-羟基-苯骈呋喃查尔酮。结论该方法制备玉郎伞查尔酮类化合物质量分数很高,且简便、快速、可靠。