17D黄热病病毒在鸡胚成纤维细胞(DF-1)上的传代培养

比较17D 213-77黄热病病毒株(17D)在不同基质细胞中的培养,观察病毒增殖的情况,探索一种替代目前黄热病疫苗生产的方法。以17D在经典的全鸡胚卵黄囊中传代培养作为对照方法,分别研究其在鸡胚成纤维细胞(DF-1细胞)和Vero细胞上传代培养条件,优化病毒感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)和培养时间;将17D在DF-1细胞上连续传代,观察子代病毒的滴度变化;同时将17D在原代鸡胚细胞(Primary Chicken Embryonic Fibroblasts,CEF)上传代培养。17D在DF-1细胞传代培养最适MOI为0.0001,最佳培养时间为3 d,且连续传代后可以保持稳定的病毒滴度(>8 Lg PFU/m L);17D在Vero细胞传代培养最适MOI为0.01,最佳培养时间为4 d;4种方式传代17D在接种量、培养时间和收获病毒量上有一定区别。DF-1细胞在培养17D上存在一定优势,有成为生产17D黄热病疫苗的基质细胞的可能。