奶牛生殖激素的分析 Ⅵ.发情周期和怀孕期间奶桶混合乳17β-雌二醇的变化

采用放射免疫分析法测定了21头黑白花奶牛在发情周期和怀孕期间奶桶混合乳17β-雌二醇的变化。测定结果表明,发情周期和怀孕期奶桶混合乳17β-雌二醇的变化趋势与外周血浆基本一致。在发情当天17β-雌二醇出现一次分泌高峰(P<0.01),以后无论在发情周期或是在怀孕期间17β-雌二醇的变化只能说是呈现一种脉冲式的变化(P>0.05),无所谓第二次或第三次高峰。奶桶混合乳17β-雌二醇的含量为外周血浆的6倍。

雌二醇对兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨17b-雌二醇(E2)对兔心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法通过结扎冠状动脉左前降支建立兔在体心肌I/R损伤模型,将36只兔随机分为3组(每组12只),对照组:心肌缺血前静脉注入1ml乙醇;早期组:心肌缺血前注入10μg/kgE2;晚期组:再灌注前注入10μg/kgE2。化学发光法测定E2的浓度,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的变化,称重法测定心肌梗死范围,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果与对照组比较,早期组和晚期组CK-MB、MDA含量明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05),心肌梗死范围及凋亡指数显著降低(P<0.05),但早期组和晚期组之间比较差异无统计学意义。结论E2对减轻心肌I/R损伤的作用是在再灌注过程中,这种作用可能是通过抗氧化、抗凋亡和减少心肌细胞坏死途径实现的。

诸氏鲻虾虎鱼卵黄蛋白原基因全长cDNA的克隆及表达

为了探讨诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)卵黄蛋白原组织分布及17β-雌二醇(E2)暴露对雄性诸氏鲻虾虎鱼Vg的影响,作者采用RT-PCR、RACE方法克隆并分析了诸氏鲻虾虎鱼卵黄蛋白原(Vg)基因的全长cDNA序列,并对Vg在诸氏鲻虾虎鱼体内的组织表达分布及E2诱导后不同时间表达规律进行了研究。结果表明:获得的Vg cDNA序列全长5 067 bp,开放阅读框(ORF)含4 992 bp,编码1 663个氨基酸,含有信号肽、多丝氨酸区域,推测其编码氨基酸分子量为186.2 ku,等电点为9.31。荧光定量PCR结果显示,Vg在诸氏鲻虾虎鱼肝脏中表达量最高。E2诱导后,诸氏鲻虾虎鱼肝脏中Vg m RNA的表达量第1天达到小高峰,第3天达到高峰,第7天开始明显下降,第11天仍能维持较高水平。本研究成功克隆了诸氏鲻虾虎鱼Vg基因全长cDNA序列,诸氏鲻虾虎鱼肝脏是Vg主要合成场所,E2诱导雄性诸氏鲻虾虎鱼Vg的表达作为生物标志物用于近海环境雌激素类物质的检测具有良好的应用前景。

雌二醇对兔心肌缺血/再灌注损伤的急性保护作用

目的探讨17b-雌二醇(17b-E2)对兔在体缺血/再灌注(I/R)心肌的急性保护作用及其相关机制。方法通过结扎冠状动脉左前降支建立兔在体心肌I/R模型(心肌缺血40 min,再灌注3 h);采用抽签法将24只健康雄性新西兰白兔随机分为两组(每组12只),对照组:心肌缺血前静脉注入1 ml乙醇;实验组:心肌缺血前静脉注入10μg/kg 17b-E2。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别于心肌缺血前、缺血40 min、再灌注1 h、2 h和3 h不同时间点检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;蛋白印迹法(Western blotting)测定心肌p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达;脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡。结果缺血过程中,实验组TNF-α较对照组降低(F=0.007,P=0.001),而IL-6变化不明显(F=0.616,P=0.095);再灌注过程中,实验组TNF-α和IL-6的含量明显低于对照组(P<0.01);同时实验组p38MAPK的活性和心肌凋亡指数均明显低于对照组(45.07%±2.73%vs.61.25%±2.41%,t=-15.398,P=0.000;11.21%±3.85%vs.22.02%±4.49%,t=-6.332,P=0.000)。结论 17b-E2通过抑制炎症反应及抗凋亡途径减轻心肌I/R损伤,其作用可能是通过对p38MAPK的抑制而实现的。