日本血吸虫重组32×10^3蛋白诱导小鼠保护力的研究

目的用重组日本血吸虫32×103蛋白(rSj32×103)免疫Balb/c鼠,检测特异性IgG抗体水平,并观察抗日本血吸虫的保护效果。方法用rSj32×103加佐剂免疫小鼠3次,分别在0、2、4周进行,第6周每鼠经腹部感染(40±1)条日本血吸虫尾蚴,感染后42d剖杀,计算减虫率。并用ELISA方法检测免疫后的抗体反应。结果间接ELISA测得免疫鼠特异性IgG抗体滴度达1∶12800。与对照组相比,减虫率为21.9%。结论用rSj32×103免疫小鼠后可诱导特异性IgG抗体,并能发挥一定的免疫保护作用。

18ku转位蛋白:焦虑症治疗的潜在新靶点

焦虑症是发病率最高的精神疾病之一,但目前其发病机制尚不明确。近几年的研究表明,18×103(18ku)转位蛋白(TSPO)配体对情感性精神疾病,尤其是焦虑症有治疗作用。并且相比于传统的苯二氮卓艹类抗焦虑药物,TSPO配体具有起效快,副反应少且不易产生耐受性等优势。本文从TSPO的分子结构、体内分布、抗焦虑机制及其配体的近期研究进展等几个方面进行综述。

多巴胺转运蛋白显像探针^(18)F-FP-CIT的AllinOne模块自动化制备及大鼠基底节Micro PET/CT显像

目的:验证AllinOne模块自动化制备多巴胺转运蛋白(dopamine transporters,DAT)显像探针18氟-氮-(3-氟丙基)-2β-甲酯基-3β-(4′-碘苯基)去甲基托烷[^(18)F-N-(3-fluoropropyl)-2β-carbomethoxy-3β-(4′-iodophenyl)nortropane,^(18)F-FP-CIT]的稳定性和效率,同时验证产物的安全性和靶向性及对大鼠基底节区的显像作用。方法:以氮-(3′-甲基黄酰氧基丙基)-2β-甲酯基-3β-(4′-碘苯基)去甲托烷作为反应前体,在四丁基氢氧化铵(Tetrabutylammonium Hydroxide,TBAOH)和氨基聚醚(Aminopolyether,Kryptofix 222)催化下,与干燥后的^(18)氟离子(^(18)F^(-))发生氟化反应,产物经高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分离纯化,并以最高产率条件建立AllinOne模块的^(18)F-FP-CIT自动化合成程序,并对产物行质量控制检测和大鼠脑微型正电子发射计算机断层扫描系统(micro positron emission computed tomography,Micro PET/CT)显像验证。结果:由AllinOne模块自动化制备的20批次^(18)F-FPCIT的平均合成时间为(72.9±8.9)min,经衰减校正后,合成平均效率为34.8%±5.7%,平均放射化学纯度为98.4%±2.0%。产物^(18)F-FP-CIT的无菌检测、内毒素检测、毒性检测结果以及溶剂残留乙腈含量均符合临床使用标准。Micro PET/CT显像可见正常大鼠基底节均匀、明显的靶向摄取,基底节摄取^(18)F-FP-CIT的程度分别是大脑皮层的2.6倍,小脑的3.7倍,颅骨的4.1倍。结论:AllinOne模块可稳定、迅速、高质地自动化制备DAT显像剂^(18)F-FP-CIT,有望为帕金森病(Parkinson′s disease,PD)等神经退行性变的临床诊疗提供影像技术支持。

敲降miR-222-3p靶向PTEN对甲状腺癌^(131)Ⅰ放疗抵抗的影响及其机制

目的:探讨miR-222-3p通过人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因(PTEN)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-222-3p在甲状腺癌131Ⅰ放疗抵抗中的作用及机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人甲状腺癌细胞和人正常甲状腺滤泡上皮Nth-ori 3-1细胞中miR-222-3p表达水平。以人甲状腺癌K1细胞和放射抗性K1(K1R)细胞为研究对象,实验分为空白对照组、131Ⅰ处理组、131Ⅰ+miR-222-3p敲降组、131Ⅰ+PTEN过表达组和131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组。空白对照组K1和K1R细胞不经任何处理,131Ⅰ处理组K1和K1R细胞经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞转染miR-222-3p inhibitor后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达组K1和K1R细胞转染PTEN过表达载体后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞同时转染PTEN过表达载体和miR-222-3p mimic后再经1和3 Gy131Ⅰ处理。克隆形成实验检测K1和K1R细胞克隆形成数,CCK-8实验检测K1和K1R细胞增殖活性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测K1和K1R细胞凋亡率,Western blotting检测K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-222-3p与PTEN的靶向关系。结果:与Nth-ori 3-1细胞比较,甲状腺癌细胞中miR-222-3p表达水平升高(P<0.01);且甲状腺癌K1R细胞中miR-222-3p表达水平高于甲状腺癌K1细胞(P<0.01)。与131Ⅰ处理组比较,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞克隆形成数减少(P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01)。与miR-NC-PTEN-WT组比较,miR-222-3p-PTEN-WT组HEK-293细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。与敲降前比较,敲降miR-222-3p后K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平升高(P<0.01)。与131Ⅰ+PTEN过表达组比较,131Ⅰ+PTEN+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞克隆形成数增加(P<0.01),细胞增殖活性升高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论:敲降miR-222-3p靶向PTEN并上调其表达水平可以缓解甲状腺癌131Ⅰ的放疗抵抗。

喉鳞状细胞癌组织中USP18、BTG3表达变化及与预后的相关性

目的 观察喉鳞状细胞癌组织中泛素特异性蛋白酶18(USP18)和B细胞转位基因3(BTG3)的表达变化,并探讨其与预后的关系。方法 应用免疫组化法检测82例喉鳞状细胞癌组织和50例癌旁正常喉黏膜组织中的USP18、BTG3表达水平,分析二者表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果 喉鳞状细胞癌组织中USP18高表达率为37.80%,高于癌旁正常组织的12.00%;BTG3高表达率为45.12%,低于癌旁正常组织的82.00%。肿瘤直径≥3cm、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、中低分化、合并淋巴结转移患者USP18高表达率低于肿瘤直径<3cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高分化、无淋巴结转移患者(P均<0.05);肿瘤高分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者BTG3高表达率高于肿瘤中低分化、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移患者(P均<0.05)。USP18低表达患者的3年总生存率、3年无进展生存率均高于USP18高表达患者,BTG3高表达患者的3年总生存率、3年无进展生存率均高于BTG3低表达患者(P均<0.05)。单因素和多因素回归分析显示,USP18高表达、BTG3低表达是影响喉鳞状细胞癌患者生存时间的危险因素(OR=0.241,95%CI为0.092~0.661,P=0.007;OR=0.336,95%CI为0.182~0.935,P<0.001)。结论 喉鳞状细胞癌组织中USP18表达升高,BTG3表达降低;USP18、BTG3表达状态与临床病理特征具有明显相关性,USP18高表达和BTG3低表达是影响喉鳞状细胞癌患者预后的危险因素。

非FDGPET肿瘤显像技术

2-脱氧-2^18F代-D-葡萄糖（^18F-FDG）自1976年被开发以来，因其反映细胞葡萄糖转运、摄取和磷酸化等生物特性而在临床和生物研究中获得越来越广泛的应用。肿瘤细胞的糖代谢机制与正常组织不同，肿瘤细胞的葡萄糖转运mRNA表达增加，葡萄糖转运蛋白Glut1、Glut3和己糖激酶水平升高，葡萄糖-6-磷酸酶水平下调，使肿瘤细胞对FDG的摄取异常增加。因此，90％以上的临床PET肿瘤显像使用^18F-FDG，使之成为核医学工作中无可争议的“辕马（work horse）”。

金刚烷胺硝酸盐的晶体结构

报道了金刚烷胺硝酸盐(三环[3,3,1,11,7]癸烷-1-胺硝酸盐,C10H18N2O3,Mr = 214.26)的晶体结构。该晶体属于正交晶系,空间群为P212121, 晶胞参数:a = 6.380(1),b = 7.349(2),c = 22.801(5) ,V = 1069.0(4) 3,m(MoKa) = 0.098 mm-1,Z = 4,F(000) = 464,Dc =1.331 g/cm3。对于1172 (I ≥2s(I))个可观察衍射点,最终偏离因子R = 0.0310,wR = 0.0757。该晶体由金刚烷铵阳离子和硝酸根阴离子组成,金刚烷基为由椅式构象组成的一个稳定的三环结构。由于氢键作用,晶体呈二维平面无限结构。

SBDP145评估脑出血患者脑损伤程度及预后的临床价值

目的探讨自发性脑出血(ICH)患者血清和脑脊液αⅡ-脑血影蛋白的裂解产物145×10^(3)(SBDP145)水平在诊断ICH、评估脑损伤程度和判断预后中的临床价值。方法选取新疆军区总医院2020年9月至2021年1月收治的80例ICH患者为ICH组,按照对照组纳入标准选择80例体检者作为血清对照组,25例同期住院患者作为脑脊液对照组。分别采集ICH组和对照组的血清和脑脊液标本,采用ELISA检测血清和脑脊液SBDP145、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)水平,采用比色法和比浊法分别检测血清和脑脊液清蛋白水平,阅读CT图片获得血肿大小指标。对ICH组进行格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分分级,采用格拉斯哥预后评分(GOS)判断预后。统计分析SBDP145与ICH致脑损伤严重程度和预后的关系。结果与脑脊液对照组相比,ICH组患者脑脊液中GFAP、SBDP145、清蛋白商值(QAlb)均显著升高(P<0.05)。与血清对照组比较,GCS评分<15分的ICH组患者血清SBDP145、GFAP水平显著升高(P<0.05)。脑脊液和血清SBDP145诊断ICH的灵敏度分别为78.3%、76.3%,特异度分别为72.0%、65.0%。ICH组患者脑脊液SBDP145水平与QAlb呈正相关(r=0.596,P<0.05),与血肿大小呈正相关(r=0.457,P<0.05)。6个月随访结果提示,预后不良患者血清SBDP145水平明显较预后良好患者高(P<0.05)。30 d内死亡患者血清SBDP145水平明显较预后出院患者高(P<0.05),血清SBDP145水平预测死亡结局的灵敏度和特异度分别为70.5%、92.0%。结论血清和脑脊液中SBDP145水平可用于评估ICH患者脑损伤严重程度和判断预后。

20例NMOSD患者CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)调节性T细胞数量和FoxP3 mRNA的表达水平

目的评估视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者中CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)调节性T细胞(Treg)的百分比,以及叉头蛋白3(FoxP3)mRNA的表达水平。方法采用病例对照研究法以20例NMOSD患者(NMOSD组)和20例健康受试者(正常对照组)为研究对象,收集外周血单个核细胞,使用荧光素记的CD4、CD25和FoxF3单克隆抗体,采用流式细胞术检测CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg细胞百分比,采用实时聚合酶链反应法检测FoxP3基因表达。通过酶联免疫吸附试验检测转化生长因子β1(TGF-β1)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素10(IL-10)的水平。结果与正常对照组相比,NMOSD组CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg细胞百分比和FoxP3 mRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。NMOSD组IFN-γ水平显著升高(P<0.05),IL-10水平降低(P<0.05),但TGF-β1水平无明显差异(P>0.05)。结论NMOSD可能与循环CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg细胞功能的丧失以及FoxP3基因表达水平降低有关。