18α-甘草次酸的微波辅助合成及工艺优化

目的将微波合成技术应用于高附加值中药单体18α-甘草次酸的制备,以建立更高效、经济的工艺路线。方法以天然来源丰富且廉价的18β-甘草次酸为原料,通过微波辐射促进C-18β的构型翻转,实现18α-甘草次酸的制备,利用HRMS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、HPLC、旋光和熔点进行结构确认及纯度鉴定;首次实现双键移位副产物的分离并通过X-单晶衍射确认结构,辅助推测反应机制使过程更清晰。结果相比于传统加热,微波辅助技术极大提高了制备效率,以5.0 g反应原料为例,反应温度120℃,反应时间20 min;简化了后处理操作,重结晶溶剂200 mL,回流时间30 min。结论微波辅助合成法是目前18α-甘草次酸高效、经济的制备方法,符合绿色化学的理念;双键移位副产物的首次分离和结构鉴定,弥补了相关研究的空白,为后续质量控制奠定了基础。

18α-甘草次酸通过抗氧化作用促进成年小鼠室管膜下区神经干细胞增殖

目的探讨18α-甘草次酸(18α-GA)对成年小鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖的影响及其机制。方法100只6月龄BALB/c小鼠随机平均分为18α-GA组(腹腔注射18α-GA 40 mg/kg两个月,以DMSO为溶解介质)和DMSO对照组(腹腔注射含等体积DMSO溶解介质的PBS溶液),每组50只,其中15只用于在体实验,其余35只小鼠断头取脑,分离培养SVZ区NSCs。采用Ki-67染色、成球实验、BrdU掺入实验及CCK-8实验检测SVZ区NSCs增殖活力,二氢乙啶(DHE)染色等方法检测活性氧簇(ROS)及超氧化物歧化酶1(SOD1)水平,Real-time PCR及Western blotting检测SVZ区NSCs的核因子E2相关因子2(Nrf2)表达。结果在体实验结果显示,腹腔注射18α-GA后,小鼠SVZ区Ki-67阳性细胞数较DMSO对照组明显增多,ROS水平较DMSO对照组明显下降,而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高,分别是对照组的(3.17±0.073)倍和(2.12±0.02)倍(P<0.05和P<0.001)。细胞实验结果表明,18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs成球速度快,数量多,其中直径在40~60μm和≥60μm的神经球数量分别是DMSO对照组的2.1倍和4倍(P<0.001);18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs活力明显提高(P<0.001),BrdU阳性率是DMSO对照组的(1.75±0.17)倍(P<0.01);18α-GA组小鼠SVZ区NSCs的ROS水平较DMSO对照组下降18.91%±4.33%(P<0.05),而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高(P<0.05和P<0.01)。此外,腹腔注射18α-GA后小鼠SVZ区及其NSCs中Nrf2的mRNA和蛋白水平均高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论在体给予18α-GA可提高成年NSCs的SOD1活性,减少细胞内ROS堆积,维持和改善成年小鼠SVZ区NSCs的增殖潜能。

18α-甘草次酸对IHH-4细胞FTO表达及增殖、迁移的影响

目的:评价肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)蛋白在人甲状腺乳头状癌IHH-4细胞中的表达、生物学作用及18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,AGA)对该细胞FTO表达的影响。方法:体外培养IHH-4细胞,取对数生长期细胞进行实验;采用MTT和Transwell迁移实验评价不同浓度的AGA(80、160、320μmol/L)对IHH-4细胞增殖和迁移能力的影响;通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)的表达;采用Western blot法评价AGA处理前后FTO、周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)和Cofilin-1的表达。结果:不同浓度的AGA均能显著抑制IHH-4细胞的增殖及迁移,差异具有统计学意义(P<0.05);IHH-4细胞高表达FTO、CDK4和Cofilin-1;RNAi下调IHH-4细胞FTO后导致CDK4和Cofilin-1表达水平显著降低(P<0.05),IHH-4细胞的增殖及迁移能力亦显著下降;AGA处理显著减少了IHH-4细胞中FTO、CDK4和Cofilin-1的表达水平(P<0.05);经RNAi处理48 h的IHH-4细胞再加入AGA无法进一步降低FTO、CDK4和Cofilin-1的表达水平及增殖、迁移能力(P>0.05)。结论:FTO在促进人甲状腺乳头状癌细胞的增殖及迁移中具有重要作用;AGA通过控制FTO的表达抑制IHH-4细胞的增殖及迁移。

GJIC渐弱剂18α-甘草次酸对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响

目的探讨缝隙连接通讯渐弱剂18α-甘草次酸(GA)对脂肪细胞向成骨细胞横向分化及细胞间缝隙连接通讯的影响。方法选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,分离提取成熟脂肪细胞,使其去分化得到去分化脂肪细胞,取第三代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导,加入GJIC渐弱剂18α-GA设为减弱组,并设立对照组,MTT法观察18α-GA对细胞倍增是否有影响,进行茜素红钙结节染色和I型胶原免疫组化染色对成骨细胞定性检测,Western blot技术和划痕标记染料示踪法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达。结果 MTT法检测结果显示18α-GA对细胞生长增殖无显著影响。茜素红染色显示均发现紫红色结节。免疫组化染色显示减弱组I型胶原表达减弱,SLDT法显示减弱组荧光染料扩散低于对照组,Western blot技术检测结果显示减弱组Cx43蛋白的表达下降。结论 18α-GA可以减弱缝隙连接通讯以降低脂肪细胞向成骨细胞分化的能力。

光学异构体18α-甘草次酸制备方法研究

目的对18α-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)的制备工艺进行优化并结构表征。方法以天然甘草三萜皂苷元18β-甘草次酸(18β-GA)为原料,分别利用分步反应法和一锅法制得其光学异构体18α-GA,对2种制备方法的工艺和产率进行考察;用常规的四大光谱法确定化学结构。结果用分步反应法制得目标化合物的总产率为45%;而用一锅法可直接制得目标产物,产率达63%,简化了操作流程,缩短了反应时间,提高了反应产率;详细描述了目标化合物的光谱特征和理化性质。结论用一锅法制备18α-甘草次酸的操作简单,产率高,是制备光学纯度较高的18α-甘草次酸的较好途径。

18α-甘草次酸及其甲酯的制备

目的制备具有肝靶向潜能的18α-甘草次酸及其甲酯。方法18β-甘草次酸与盐酸的无水甲醇溶液一起加热,经碱性水解、酸化制备了18α-甘草次酸,再经酯化获得了其甲酯。结果制备了18α-甘草次酸(产率34%)及其甲酯;对合成工艺、理化性质和光谱特征进行研究,优化了制备工艺。结论在酸性条件下对18β-甘草次酸进行酯化,再经碱构型转化、水解并用混合溶剂结晶是制备18α-甘草次酸的较好途径。

基于微生物转化得到7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸的优良菌株筛选

目的以7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸为目标产物,通过微生物转化筛选优良菌株。方法使用10种真菌(CGMCC 3.149、CGMCC 3.193、CGMCC 3.3402、CGMCC 3.739、CGMCC 3.2462、CGMCC 3.2886、CGMCC 3.3400、CGMCC 3.577、CGMCC 3.970、Zw-4)进行转化菌株的初筛和复筛实验,采用高效液相色谱法测定转化液中7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸含量,将7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸转化率作为评价指标,选择转化率较高且初筛和复实验结果一致的菌株作为优良菌株。结果7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸在2.56~81.79μg/ml范围内呈良好的线性关系;初筛实验中转化率最高的菌株是CGMCC 3.3400;复筛中转化率最高的菌株是CGMCC 3.970。结论优良菌株为CGMCC 3.970。

18α-甘草次酸对游离脂肪酸致HepG2细胞脂毒性的保护作用

目的探讨18α-甘草次酸对游离脂肪酸(FFAs)致HepG2细胞脂毒性的保护作用及经线粒体途径调节的分子机制。方法给予1 mmol/L FFAs,油酸(OA)–棕榈酸(PA)(2∶1)建立体外HepG2细胞脂肪变性模型,细胞分为对照组、模型组和18α-甘草次酸低、中、高剂量(10、20、40μmol/L)组,阳性药(凋亡抑制剂Z-VAD-FMK,10μmol/L)组,采用MTT法检测细胞活力,用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡;免疫荧光染色法观察Bax蛋白激活情况;Western blotting检测细胞色素C在线粒体和胞浆的分布情况;Caspase-3酶活检测试剂盒测定细胞内Caspase-3活性。结果18α-甘草次酸能保护FFAs致HepG2细胞活力下降,减少HepG2细胞脂性凋亡数量;18α-甘草次酸能下调Bax蛋白激活,减少细胞色素C的释放,从而阻止Caspase-3活性的增高,且呈剂量相关性。结论18α-甘草次酸对FFAs致HepG2细胞的脂毒性中存在保护作用,其作用机制与抑制线粒体凋亡通路有关。

甘草次酸差向异构体的HPLC检测方法研究

使用液相色谱型号为Agilent 1260 Infinity II;C18反相色谱柱,4.6 mm×250 mm,粒径5μm;检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μL;流动相甲醇和10 mmol/L高氯酸水溶液(氨水调pH=8.2,体积比为78∶22 v/v),流速1.0 mL/min。在上述条件下进样测定,18α-GA和18β-GA分离度较好,并且能够稳定检测压力,保留时间分别为11.321 min和12.865 min;线性范围为10~100 mg/L,重复性实验RSD依次为0.5%和0.3%。

大鼠肝微粒体CYP3A1/2和CYP2C9/10参与甘草次酸羟化代谢

目的:对参与18α-甘草次酸(GA)羟化代谢的细胞色素P450(cytochromeP450,CYP)亚型进行研究。方法:采用大鼠肝微粒体体外代谢GA的孵育方法和高效液相色谱(HPLC)技术,通过分析甘草次酸在肝微粒体中形成的单羟化代谢物的酶促动力学,分析其酶学模型,然后用不同的CYP同工酶选择性抑制剂和底物进行抑制实验,初步选出介导甘草次酸单羟化代谢所涉及的CYP同工酶。结果:大鼠肝微粒体羟化代谢GA呈反应时间(10～40min),底物浓度(25～200μmol/L)和蛋白浓度(0.25～1.0g/L)依赖性。GA代谢为22α-羟-GA和24-羟-GA的Vmax分别为(7.9±1.4)μmol.min-1.g-1和(3.4±1.0)μmo1.min-1.g-1,Km分别为(33±9)μmol/L和(68±18)μmol/L。抑制性研究可见:TAO和Ery剂量依赖性抑制22α-羟-GA形成,最大抑制率分别为82.4%和45.7%,而Sul无显著抑制作用;Sul剂量依赖性抑制24-羟-GA形成,抑制率依次为26.8%、45.3%和69.5%,而TAO和Ery的抑制作用不显著。红霉素N-脱甲基酶活性与22α-羟化代谢速率高度相关(r=0.864,P<0.01,n=10),与24-羟化代谢速率无明显相关(r=0.310,P>0.05,n=10)。结论:大鼠肝微粒体CYP3A1/2和CYP2C9/10分别参与了GA的C-22α和C-24羟化代谢。

甘草次酸差向异构体的高效液相色谱分离分析

应用整体化色谱柱，反相条件下对18H-甘草次酸差向异构体的拆分进行了探讨。采用Chromolith RP-18e整体化色谱柱，乙酸铵-乙腈-甲醇三元流动相体系，考察了乙酸铵浓度、有机添加剂含量、柱温等因素对甘草次酸差向异构体拆分的影响，在优化的色谱条件下，甘草次酸差向异构体达到了基线分离，分离度可达5．30。18α-甘草次酸与18β-甘草次酸分别在2．16—23．76μg／mL与4．24—46．64μg／mL范围内呈良好的线性关系。建立的方法简便快速，可应用于甘草次酸类药物的质量监测与控制，以及甘草次酸异构体的转化评价。

18α甘草次酸对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠急性溃疡性结肠炎的保护作用及机制研究

目的探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用,为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:DSS模型组,阳性药对照组,18α-GA高、中、低剂量组,每组8只,5组小鼠均采用3%DSS溶液连续喂养7 d建立急性UC动物模型,同时各组分别每天腹腔注射100 mg/kg生理盐水、100 mg/kg柳氮磺吡啶、40 mg/kg 18α-GA、20 mg/kg 18α-GA、10 mg/kg 18α-GA。每天测量并记录小鼠的体重,评估小鼠疾病活动指数(DAI)。第8天处死小鼠,取小鼠结肠测量其长度;切片观察结肠黏膜并进行病理学评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路相关蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结肠组织中IL-1β含量。结果与DSS模型组比较,18α-GA高、中剂量组第7天时的体重减轻幅度明显更小(均P<0.05);结肠长度更长(均P<0.05),结肠黏膜病理学评分明显更低(均P<0.05);结肠组织中GSDMD、cleaved-caspase1及IL-1β的表达显著更低(均P<0.05);18α-GA高剂量组DAI评分更低(P<0.05);结肠组织中NLRP3表达更低(P<0.05)。结论18α-GA可通过抑制NLRP3炎症小体通路的激活,改善DSS诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎。

18α-GA激活Nrf2对成体神经干细胞的影响

目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(a NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持a NSCs活力的有效途径。方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSCs),观察随年龄增长NSCs中Nrf2的表达变化。以18α-GA作用a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验比较18α-GA组与DMSO对照组a NSCs的Nrf2表达变化。构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的Nrf2-shRNA慢病毒载体(LV)感染a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验检测shRNA对Nrf2的沉默效率。将a NSCs按照干预条件不同分为DMSO组、18α-GA组、LV-GFP组和LV-Nrf2-shRNA组,运用Brd U掺入实验、Tuj1免疫荧光染色、CCK-8实验、Hoechst 33342/PI双染色和活性氧簇(ROS)水平测定等方法评价18α-GA是否通过激活Nrf2对a NSCs的增殖、分化、细胞活力、细胞凋亡以及氧化应激水平产生影响。结果:随年龄增长,成年和老年小鼠a NSCs的Nrf2 mRNA表达水平较新生小鼠NSCs显著降低(P<0.01),但a NSCs的ROS水平显著高于新生小鼠NSCs(P<0.05)。应用18α-GA后,a NSCs的Nrf2 mRNA与蛋白表达水平较DMSO组明显升高(P<0.01),并且a NSCs的Brd U阳性率也显著增加(P<0.01)。2 mg/L 18α-GA作用后,a NSCs的Tuj1阳性率和细胞活力较DMSO组显著升高(P<0.05),而凋亡率和ROS水平显著下降(P<0.05和P<0.01)。但是,敲减a NSCs的Nrf2并应用18α-GA干预后,LV-Nrf2-shRNA组Brd U阳性率、Tuj1阳性率以及细胞活力均较LV-GFP组显著下降(P<0.05),ROS水平却显著上升(P<0.05)。结论:18α-GA可能通过激活Nrf2提高a NSCs的抗氧化能力,促进a NSCs增殖和分化,维持a NSCs潜能。

甘草酸二铵改善Con A致小鼠肝损伤的作用研究

探讨甘草酸二铵(Diammonium glycyrrhi zinate,DG)对刀豆蛋白(Concanavalin A,Con A)致小鼠肝损伤的保护作用及机制。连续给予ICR小鼠各保肝药的临床等效量7天后,再以Con A造成小鼠肝损伤。生化法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)含量;HE染色观察肝组织病理学特征;通过药物代谢物与转氨酶异常大鼠血清共孵育,检测DG对转氨酶活性的直接作用;免疫组化、Western blot检测肝组织中凋亡蛋白和炎性细胞因子的水平,探讨DG的保肝机制。结果显示,58. 5 mg/kg DG能够改善Con A所致小鼠肝脏病理损伤,降低小鼠血清中AST、ALT水平,而对AST、ALT的活性没有直接抑制作用;并且DG可以抑制肝细胞凋亡(下调cleaved Caspase-3、cleaved PARP以及BAX/BCL-2的表达)和炎性反应(降低TGF-β1、COX-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ等炎性因子水平)。综上所述,DG可改善Con A致小鼠急性肝损伤,其作用机制可能与抑制细胞凋亡和炎症反应有关。

18α-GA通过上调蛋白酶体活性促进晚期骨髓间充质干细胞增殖

目的:明确18α-甘草次酸(18α-glycyrrhetinic acid,18α-GA)对晚期骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老标志物和增殖能力的影响。方法:晚期BMSCs(≥14代)应用2.0 mg/L的18α-GA持续作用30 d,比较18α-GA组与DMSO组蛋白酶体活性;衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色和Western blot检测衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达变化;CCK-8、Brd U掺入试验、流式细胞术和Western blot分别检测细胞增殖能力、细胞周期分布及细胞周期相关分子表达变化。结果:应用18α-GA后BMSCs蛋白酶体活性较DMSO组增高约0.2倍(P<0.01)。18α-GA组SA-β-Gal阳性衰老细胞较DMSO组减少,且细胞着色浅淡;衰老相关蛋白p53和p21表达水平分别较对照组降低(P<0.05)。CCK-8实验及流式细胞术结果显示18α-GA组细胞增殖能力较DMSO组增高,S期细胞显著增多(P<0.05),18α-GA组Brd U染色阳性细胞率较DMSO对照组增高(P<0.05)。18α-GA组细胞周期相关蛋白cyclin D1及CDK4表达水平分别较DMSO组增高(P<0.05)。结论:18α-GA可激活晚期BMSCs蛋白酶体活性延缓细胞衰老,并且可能通过上调细胞周期相关蛋白表达水平促进晚期BMSCs增殖。

18α(18β)-甘草次酸30位酰胺衍生物的合成工艺研究

目的制备甘草次酸30位酰胺类衍生物N-β-羟乙基-18β-甘草次酸-30-酰胺(Ⅲ)和N-β-羟乙基-18α-甘草次酸-30-酰胺(IV),并优化其制备工艺。方法 18β-甘草次酸(18β-GA,Ⅰ)经高温碱催化进行构型转化反应得到18α-甘草次酸(18α-GA,Ⅱ);化合物Ⅰ、Ⅱ分别与2-氨基乙醇缩合制得目标化合物Ⅲ、Ⅳ;用常规光谱方法鉴定结构;同时考察不同种类缩合剂、溶剂量、物料比、处理方法对目标化合物产率的影响,筛选最佳制备工艺。结果目标化合物Ⅲ、Ⅳ的产率分别为63%、48%。结论确定以EDCI、HOBt、DMAP为催化系统,配料比分别为18β-GA-EDCI-HOBt-DMAP(1∶1.5∶1∶0.5)及18α-GA-EDCI-HOBt-DMAP(1∶2∶1∶0.5),二氯甲烷为溶剂,化合物Ⅲ、Ⅳ的反应时间分别为18、28h,所用工艺是制备甘草次酸30位酰胺类衍生物的较好工艺。

甘草次酸18位差向异构体对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的研究甘草次酸18位差向异构体即18α-甘草次酸、18β-甘草次酸对Caco-2细胞上P-糖蛋白功能和表达的影响。方法建立Caco-2细胞模型,采用罗丹明-123摄取法评价P-糖蛋白的功能;使用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA;Westernblot分析Caco-2细胞膜上P-糖蛋白的表达。结果中、高浓度(1,10μmol.L-1)的18α-甘草次酸和高浓度(10μmol.L-1)的18β-甘草次酸使细胞内罗丹明-123摄取减少。高浓度(10μmol.L-1)的18α-甘草次酸在转录水平上调MDR1 mRNA的表达;实验浓度的18β-甘草次酸未影响MDR1 mRNA的表达;高浓度(10μmol.L-1)18α-甘草次酸对P-糖蛋白有诱导作用,实验浓度的18β-甘草次酸没有影响P-糖蛋白表达。结论 18α-甘草次酸对P-糖蛋白功能和表达的影响均表现为诱导作用,而18β-甘草次酸只对P-糖蛋白功能表现出一定的诱导作用。

甘草次酸18位差向异构体对P-gp底物罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响

目的研究甘草次酸18位差向异构体即18α-甘草次酸(α-GA)、18β-甘草次酸(β-GA)对P-糖蛋白(P-gp)底物罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响。方法采用MTT法检测不同摩尔浓度的18α-甘草次酸、18β-甘草次酸及维拉帕米对Caco-2细胞生长抑制作用;建立Caco-2单层细胞模型,以P-糖蛋白底物罗丹明123(Rho-123)为荧光探针,评价甘草次酸18位差向异构体和P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响。罗丹明123浓度采用酶标仪检测。结果高浓度(10μmol.L-1)18α-甘草次酸瞬时作用于Caco-2细胞单层模型,或者干预单层模型72 h后,均使罗丹明123单位面积BL-AP侧累积转运量(transport B-A)增加,外排率(ER)增大,诱导P-糖蛋白底物罗丹明123外向转运;高浓度(10μmol.L-1)18β-甘草次酸瞬时作用于Caco-2细胞单层模型没有表现出诱导作用,但在干预Caco-2单层模型72 h后,表现出对罗丹明123外向转运的诱导;各实验药物均没有对罗丹明123 AP-BL侧转运产生影响。结论跨膜转运实验结果表明,18α-甘草次酸、18β-甘草次酸能诱导P-糖蛋白的外向转运,加速P-糖蛋白底物的外排,可能是甘草酸制剂增强肝脏解毒的机制之一。

18α-和18β-甘草次酸甲磷酰氮芥酯的制备及结构表征

目的制备18α-和18β-甘草次酸甲磷酰氮芥酯抗癌前药偶合物,并表征其化学结构。方法以18β-甘草次酸为起始原料,经构型转化和拆分得18α-甘草次酸,再经C30-位羧基的甲酯化得到18α-和18β-甘草次酸甲酯,两者分别与环磷酰胺的抗癌活性代谢物二氯磷酰氮芥偶连而获得目标化合物。结果合成得到了两种目标化合物,18α-甘草次酸的构型转化率为45%;两种目标化合物的产率分别为25%、35%。结论目标化合物的制备中,磷酰酯化反应条件应控制为无水条件,配料比为1∶1.25,于65℃反应3～4 h。

甘草提取物及其主要成分对HepG2细胞中二相代谢酶UGT1A基因表达的影响

目的研究甘草提取物及18α-甘草酸(18α-GL)、18β-甘草酸(18β-GL)、18α-甘草次酸(18α-GA)、18β-甘草次酸(18β-GA)对HepG2细胞上UGT1A蛋白表达和UGT1A mRNA作用的影响。方法建立HepG2细胞模型,采用Western blot分析HepG2细胞中二相代谢酶UGT1A的蛋白表达,采用Q-PCR从转录水平检测UGT1A mRNA。结果 Western blot实验结果表明18α-GL、18β-GL对UGT1A的蛋白表达有增加作用但差异无统计学意义;18α-GA和18β-GA使UGT1A的蛋白表达量增加且具差异有统计学意义(P<0.05)。Q-PCR实验结果表明18α-GL、18β-GL使UGT1A的mRNA表达有上调作用;18α-GA对UGT1A的mRNA表达有上调作用,但差异没有统计学意义,而18β-GA使UGT1A的mRNA表达上调,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论甘草提取物、18α-GL、18β-GL、18α-GA和18β-GA对UGT1A蛋白表达和mRNA影响均表现为诱导作用,且18β-GA对UGT1A的诱导作用差异有统计学意义。