18β-甘草次酸通过PGK1糖酵解途径抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡研究

基于磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)介导糖酵解途径研究18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetinic acid,GA)抑制氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的分子机制。采用oxLDL(100 mg/L)损伤建立体外人主动脉内皮细胞损伤模型,并给予不同浓度的GA(10、20和40μmol/L)及PGK1激动剂进行干预,Western blot法检测糖酵解关键酶PGK1、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、己糖激酶(hexokinase 2,HK2)和丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)表达水平以及凋亡相关Bax、Bcl2、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平,比色法检测细胞内乳酸和葡萄糖含量。结果表明,与对照组相比,oxLDL组内皮细胞葡萄糖消耗减少、乳酸分泌量增加,PGK1、GLUT1、HK2、PKM2、Bax、cleaved Caspase-3及cleaved Caspase-9蛋白表达水平增加(P<0.05);与oxLDL组相比,GA治疗组(10、20和40μmol/L)内皮细胞葡萄糖消耗增加、乳酸分泌量减少,PGK1、GLUT1、HK2、PKM2、Bax、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.05);加入PGK1激动剂后可以逆转GA对oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡的作用。以上结果表明,GA通过抑制PGK1介导的糖酵解途径进而抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡。

18β-甘草次酸通过调控PIM1对宫颈癌细胞及裸鼠移植瘤自噬与凋亡的影响

[目的]探究18β-甘草次酸(18β-GA)通过调控莫洛尼小鼠白血病病毒前病毒插入位点1(PIM1)对宫颈癌细胞及裸鼠移植瘤自噬与凋亡的影响。[方法]以浓度梯度(50、100、150μmol/L)18β-GA作用于宫颈癌Hela细胞,明场与免疫荧光染色观测细胞形态变化,AutoDock Vina软件对18β-GA与PIM1进行分子对接。用100μmol/L 18β-GA处理敲低及过表达PIM1的Hela细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测增殖抑制率,蛋白印迹检测蛋白表达变化。以Hela细胞构建裸鼠宫颈癌移植瘤模型,成瘤后随机分为18β-GA实验组与对照组,每日分别灌胃100 mg/kg18β-GA与等量生理盐水溶液。14 d后取移植瘤切片,行苏木精-伊红(HE)染色对比两组移植瘤组织形态,免疫荧光染色与蛋白印迹检测对比移植瘤蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,随着18β-GA作用浓度的增加,PIM1、B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)表达降低,自噬蛋白Beclin-1表达升高,细胞增殖抑制率增高(P<0.05)。敲低PIM1与敲低PIM1后加18β-GA处理组比较细胞增殖抑制率、PIM1、Beclin-1与BCL-2表达水平无明显差异(P>0.05),而过表达PIM1与过表达PIM1后加18β-GA处理组比较上述结果有显著差异(P<0.05)。18β-GA可以与PIM1稳定结合于PHE-100,结合能为-7.3 kcal/mol。18β-GA可抑制裸鼠移植瘤组织中PIM1与白细胞介素-6(IL-6)表达,降低信号转导和转录激活因子3(STAT3)磷酸化,进而抑制增殖细胞核抗原(PCNA)、抗凋亡蛋白BCL-2表达,增加Beclin-1表达(P<0.05)。[结论] 18β-GA通过抑制PIM1进而下调BCL-2促进Beclin-1表达,促进宫颈癌细胞自噬与凋亡,减少裸鼠移植瘤STAT3磷酸化,降低PCNA、IL-6表达,进而发挥对Hela宫颈癌小鼠的抑瘤作用。

18β-甘草次酸对失血性休克大鼠肾损伤的保护作用

目的:探讨18β-甘草次酸(18β-Gly)对失血性休克(HS)大鼠急性肾损伤的保护作用。方法:将实验用SD雌性大鼠随机分为5组:假手术(SHAM)组、模型(HS)组、18β-Gly低剂量组、18β-Gly中剂量组、18β-Gly高剂量组,通过18β-Gly预处理,采用股动脉放血制作HS大鼠模型,检测大鼠HS后肾体比、肾组织病理形态改变,尿素氮(BUN)及血肌酐(CRE)的表达情况。结果:与HS组比较,18β-Gly中剂量组和18β-Gly高剂量组HS 2 h肾体比及CRE水平降低较明显,差异有统计学意义(P<0.05),而18β-Gly中剂量组BUN降低较明显,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,与HS组比较,18β-Gly中剂量组和18β-Gly高剂量组病理损伤减轻较明显。结论:18β-Gly能有效降低HS大鼠肾/体比、BUN和CRE的水平,减轻HS大鼠肾组织病理损伤,起到肾保护作用。

18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及其细胞内Ca^(2+)水平的变化

背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的动态变化在诱发细胞凋亡过程的多个环节中起重要作用,因此本研究也探讨由18-甘草次酸诱导的MCF-7细胞凋亡发生与[Ca2+]i变化的关系。方法:用50~250μmol/L浓度梯度的18β-甘草次酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。分别用100μmol/L BAPTA-AM和0.5 mmol/L EGTA与150μmol/L 18β-甘草次酸联合处理MCF-7细胞24 h,用单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。结果:从100μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01和P<0.05),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC 50)为234.33μmol/L。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01和P<0.05);18β-甘草次酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.05)。18β-甘草次酸与BAPTA-AM联合处理组和18β-甘草次酸与EGTA联合处理组的凋亡率均明显低于单纯的150μmol/L18β-甘草次酸处理组(P<0.05和P<0.01)。结论:18-甘草次酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用,而18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡的作用在抑制该细胞增殖方面起主要作用。18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡依赖于细胞内Ca2+水平上调,而细胞外Ca2+内流是导致细胞内Ca2+水平上调的原因之一。

全反式维甲酸、18β-甘草次酸和甘草酸诱导人肝癌细胞分化和凋亡的研究

目的:探讨全反式维甲酸、18β-甘草次酸和甘草酸对BEL-7402人原发性肝癌细胞诱导分化和凋亡的作用。方法:用此三种药物处理BEL-7402人肝癌细胞,观察细胞增殖,测定核质比例、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶(TAT)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性,用RIA法测定甲胎蛋白(AFP)分泌量,用吖啶橙(AO)和溴乙锭(EB)荧光双染法和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果:维甲酸、18β-甘草次酸和甘草酸对肝癌细胞增殖均有抑制作用,并有量效关系,其IC_(50)分别为16.29μmol/L、78.23μmol/L和3.94mmol/L。10μmol/L维甲酸、60μmol/L 18β-甘草次酸和2.5mmol/L甘草酸均使肝癌细胞核质比例显著下降(P<0.05和P<0.01),并使代表肝癌细胞分化的酶OCT、TAT和ALP比活力明显升高,使AFP分泌量和γ-GT比活力明显下降。60μmol/L、90μmol/L 18β-甘草次酸、20μmol/L维甲酸和5mmol/L甘草酸均使肝癌细胞凋亡率明显升高(P<0.05和P<0.01)。结论:维甲酸、18β-甘草次酸和甘草酸有抑制肝癌细胞增殖和诱导其分化的作用,且在同等效果下18β-甘草次酸所需的浓度比甘草酸的浓度约低40倍;三种药物均有诱导肝癌细胞凋亡的作用。

雷公藤内酯酮联合甘草次酸对促进人肝癌HepG2细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究雷公藤内酯酮(TPN)单独或联用甘草次酸(GA)对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移、凋亡及相关信号通路Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法采用CCK-8法测定TPN单独或TPN(0.3、0.6、1.2μmol/L)联用GA(2、10、20μmol/L)对HepG2细胞24 h的增殖抑制作用,利用增效指数(q值)判定协同药效;Annexin V-FITC/PI染色法检测给药后细胞凋亡率变化;细胞划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;Western-blot法检测Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果TPN、GA单独作用对HepG2细胞24 h的半数抑制浓度(IC 50)分别为(7.28±2.13)和(26.56±6.32)μmol/L。TPN(1.2μmol/L)和GA(2μmol/L)联用组的q值(1.505)最大,细胞抑制率为(62.28±6.13)%;该联用组对HepG2细胞的总凋亡率高于单独使用TPN(P<0.05),同时抑制HepG2细胞的迁移,使细胞内Caspase-3蛋白表达水平升高、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论TPN联用GA对HepG2细胞的增殖具有良好的协同抑制效果,可能与其通过下调Bcl-2基因表达与激活Caspase基因家族共同诱导肝癌细胞的凋亡有关,两者联用能增强抑制肝癌HepG2细胞的迁移。

18α-甘草次酸的微波辅助合成及工艺优化

目的将微波合成技术应用于高附加值中药单体18α-甘草次酸的制备,以建立更高效、经济的工艺路线。方法以天然来源丰富且廉价的18β-甘草次酸为原料,通过微波辐射促进C-18β的构型翻转,实现18α-甘草次酸的制备,利用HRMS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、HPLC、旋光和熔点进行结构确认及纯度鉴定;首次实现双键移位副产物的分离并通过X-单晶衍射确认结构,辅助推测反应机制使过程更清晰。结果相比于传统加热,微波辅助技术极大提高了制备效率,以5.0 g反应原料为例,反应温度120℃,反应时间20 min;简化了后处理操作,重结晶溶剂200 mL,回流时间30 min。结论微波辅助合成法是目前18α-甘草次酸高效、经济的制备方法,符合绿色化学的理念;双键移位副产物的首次分离和结构鉴定,弥补了相关研究的空白,为后续质量控制奠定了基础。

基于微生物转化得到7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸的优良菌株筛选

目的以7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸为目标产物,通过微生物转化筛选优良菌株。方法使用10种真菌(CGMCC 3.149、CGMCC 3.193、CGMCC 3.3402、CGMCC 3.739、CGMCC 3.2462、CGMCC 3.2886、CGMCC 3.3400、CGMCC 3.577、CGMCC 3.970、Zw-4)进行转化菌株的初筛和复筛实验,采用高效液相色谱法测定转化液中7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸含量,将7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸转化率作为评价指标,选择转化率较高且初筛和复实验结果一致的菌株作为优良菌株。结果7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸在2.56~81.79μg/ml范围内呈良好的线性关系;初筛实验中转化率最高的菌株是CGMCC 3.3400;复筛中转化率最高的菌株是CGMCC 3.970。结论优良菌株为CGMCC 3.970。

甘草次酸对人胃癌HGC-27的抑制增殖和诱导凋亡作用

目的:研究18β-甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)对人胃癌细胞HGC-27生长抑制作用及对细胞凋亡的影响。方法:分别以12.5、25、50、100和200μM的GA处理HGC-27细胞,MTT法检测不同时间点(24、48和72h)的细胞增殖抑制率,以AO/EB法初步观察GA诱导HGC-27凋亡的情况,以Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率确定凋亡的发生。结果:GA能抑制HGC-27细胞生长,且呈剂量依赖性,GA可以引起HGC-27细胞核皱缩、染色质浓缩、细胞膜发泡、等凋亡特征,提示了凋亡的参与,通过Annexin V/PI双染色法最终确定GA可剂量依赖性地引起HGC-27的凋亡。结论:GA可抑制人胃癌细胞HGC-27增殖,其作用机制可能与GA引起HGC-27凋亡有关。

18β-甘草次酸对K19-C2mE自发胃肿瘤转基因鼠的干预效果及对COX-2、IL-1β表达的影响

目的探讨18β-甘草次酸对K19-C2mE自发胃肿瘤转基因鼠的干预效果及对环氧合酶-2(COX-2)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法选取40只状态良好的K19-C2mE转基因子代小鼠,随机分为模型组、干预组,另选择20只野生型C57BL/6N小鼠纳入对照组。模型组和对照组小鼠正常饮水,干预组小鼠6周龄时给予0.1%18β-甘草次酸水溶液作为饮水,3组小鼠每周称量体重,生长至52周时观察小鼠胃肿瘤情况,取小鼠胃黏膜组织,采用免疫组化方法检测微血管密度(MVD),采用蛋白印记杂交测定COX-2、IL-1β表达情况。结果3组小鼠各时间点体重差异无统计学意义(P>0.05)。对照组小鼠解剖可见胃黏膜形态光滑,未见肿瘤及其他病理表现;模型组及干预组小鼠可见胃内肿物形成,伴有胃黏膜出血;模型组小鼠胃肿瘤发生率显著高于干预组(P<0.05)。HE染色显示,对照组小鼠胃组织未见增生性病变,模型组及干预组小鼠可见慢性炎症,淋巴滤泡形成及增生性病变。模型组小鼠黏膜MVD及COX-2、IL-1β表达量显著高于对照组及干预组(P<0.05),干预组显著低于模型组(P<0.05)。结论18β-甘草次酸可降低K19-C2mE自发胃肿瘤转基因鼠胃肿瘤发生率,减轻黏膜炎性反应,抑制新生血管生成,其机制可能与下调COX-2、IL-1β等因子表达有关。

18α-甘草酸二铵对丝裂霉素C诱导的HepG2细胞凋亡的影响及机制

目的探讨18α-甘草酸二铵对丝裂霉素(MMC)诱导的HepG2细胞凋亡的影响及机制。方法 18α-甘草酸二铵不同浓度与低剂量MMC(50μg/ml)MMC联合作用,采用MTT比色法观察MMC对HepG2细胞活性率的影响;流式细胞术分析凋亡细胞的百分率、线粒体膜电位的改变及Caspase-3的活性变化;Western Blot检测细胞内细胞色素C的表达及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达情况。结果单独MMC(50μg/ml)处理的HepG2细胞活性率明显降低,凋亡率显著增加,线粒体膜电位下降,Caspase-3活性增加,细胞内细胞色素C表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少,而促凋亡蛋白Bax表达增加。不同浓度的18α-甘草酸二铵与MMC合用组,这些指标的变化均受到抑制。结论 18α-甘草酸二铵可抑制MMC诱导的HepG2细胞凋亡,其机制可能通过调控凋亡相关蛋白的表达而实现。

甘草次酸抑制胃溃疡大鼠胃黏膜细胞的凋亡

目的分析甘草次酸对幽门螺杆菌感染胃溃疡大鼠的影响,并探讨其作用机理。方法采用乙酸处理后幽门螺杆菌感染法制备胃溃疡大鼠模型,检测不同剂量甘草次酸处理后大鼠溃疡指数以及胃酸、胃蛋白酶活性。同时检测甘草次酸对大鼠胃黏膜组织及体外胃黏膜上皮细胞中B淋巴细胞瘤-2(BCL2)和天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)表达、糖原合成酶激酶-3(GSK3β)活性及细胞凋亡水平的影响。结果甘草次酸可降低大鼠的溃疡指数以及胃液中胃酸、胃蛋白酶活性。甘草次酸处理后,大鼠胃黏膜组织及体外胃黏膜上皮细胞中凋亡抑制因子BCL2的表达显著增高,而凋亡因子Caspase-3的表达量、激酶GSK3β活性及细胞凋亡水平则明显下降。GSK3β激活剂LY294002作用于细胞后,BCL2水平下调,Caspase-3表达增多,细胞凋亡水平上升。结论甘草次酸可通过调控GSK3β激酶活性,抑制胃黏膜上皮细胞的凋亡,进而促进幽门螺杆菌感染胃溃疡的愈合。

18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜纤毛超微结构的影响

目的观察变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠鼻黏膜纤毛超微结构改变及18β-甘草次酸对纤毛病理改变的影响。方法将96只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、氯雷他定组、18β-甘草次酸组,每组24只。采用卵清蛋白致敏法建立大鼠AR模型,造模后各组分别给药干预。于给药2、4、6、10周后比较各组大鼠行为学改变,并采用扫描电镜和透射电镜观察各组鼻黏膜纤毛超微结构改变。结果模型组出现典型AR症状,鼻黏膜纤毛紊乱、倒伏、黏附聚集甚至脱落,纤毛膜破裂,微管减少或消失,并出现密集的短小纤毛,纤毛顶端黏液毯增厚并含中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞等炎性细胞;在变应原持续作用下,模型组鼻黏膜纤毛随时间延长而呈进行性损害改变。经氯雷他定和18β-甘草次酸干预后,AR症状逐渐减轻,鼻黏膜上皮病理损害逐渐恢复,纤毛整齐密集接近空白组,短小纤毛减少,纤毛顶端增厚覆盖的黏胶层消失。结论在大鼠AR模型中,随着变应原的持续接触,鼻黏膜纤毛超微结构呈进行性损害。18β-甘草次酸可一定程度延缓或逆转鼻黏膜纤毛的病理改变。

18β-甘草次酸对人胃癌细胞BGC823增殖的抑制

目的:观察18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetinic acid,GA)对人胃癌细胞系BGC823细胞增殖的影响,并从细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(p16,p21,p27)方面探讨GA可能的作用机制。方法:以不同浓度的GA处理胃癌BGC823细胞后,用MTT法检测细胞增殖,以流式细胞仪检测细胞周期,采用Western blot方法检测胃癌细胞p16,p21,p27蛋白水平变化。结果:GA能抑制BGC823细胞增殖,且呈浓度依赖性。胃癌细胞经GA处理后,细胞周期发生G0/G1期阻滞。另外发现,胃癌细胞p21,p27的蛋白水平上调,但p16的蛋白水平没有明显变化。结论:GA可抑制人胃癌细胞增殖,其机制与G0/G1期阻滞、p21,p27表达上调有关。

18β-甘草次酸A环开环衍生物的合成及抗肿瘤活性

采用化学方法在18β-甘草次酸A环上进行结构修饰,合成了一系列新颖的A环具有不同官能团的开环衍生物.初步研究了它们对人体肝癌细胞HepG-2的体外细胞毒活性,结果表明,羟基的数目和位置对抑制HepG-2细胞增殖起着重要的作用.

18β-甘草次酸对K19-C2mE转基因鼠胃肿瘤的抑制作用及其机制

目的:探讨18β-甘草次酸(18β-GA)对K19-C2mE转基因鼠胃肿瘤的抑制作用,阐明其抑制炎症反应及肿瘤生成的作用机制。方法:采用K19-C2mE自发胃肿瘤转基因鼠模型,随机分为对照组(n=36)和实验组(n=34),对照组小鼠正常饮水,实验组小鼠给予质量浓度0.1%的18β-GA饮水投药。52周后处死小鼠取胃组织,分别观察和测量胃肿瘤形态和大小;HE染色观察小鼠胃组织病理学形态;免疫组织化学染色及H-score评分检测对照组和实验组肿瘤组织炎症因子环氧化酶2(COX-2)和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平。结果:2组小鼠体质量随周龄变化无明显差异。对照组和实验组小鼠胃肿瘤发生率分别为77.8%(28/36)和41.2%(14/34),实验组肿瘤发生率显著降低(P=0.002);与对照组比较,实验组小鼠胃黏膜肉眼形态较规则,胃部肿块体积小,表面光滑,黏膜充血及溃疡少见;HE染色显微镜下观察,实验组炎症反应较轻,细胞及组织结构异型性反应减弱;免疫组织化学染色及H-score评分,与对照组比较,实验组小鼠胃组织中COX-2和IL-1β表达水平明显降低(P<0.001)。结论:18β-GA能够显著降低K19-C2mE转基因鼠胃肿瘤的发生率,有效减轻胃黏膜炎症反应,其机制可能是通过下调胃黏膜炎症因子COX-2和IL-1β表达水平从而抑制胃肿瘤的发生发展。

18β-甘草次酸哌嗪衍生物抗肝癌SMMC-7721细胞活性研究

目的研究18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞增殖的的抑制作用及对凋亡的影响。方法用18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35以不同浓度、不同时间段处理SMMC-7721细胞,显微镜下观察其对肝癌SMMC-7721细胞形态结构的影响;MTT法检测18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞的增殖抑制率;Hoechst-33258细胞凋亡染色试剂盒检测细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。结果MTT检测结果表明,18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35能够抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,且呈浓度依赖性(P<0.05);流式细胞仪检测细胞凋亡率,D35为26.71%、D34为36.95%。结论 18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞有增殖抑制作用和促凋亡作用,且优于18β-甘草次酸(GA)。

18β-甘草次酸A环官能团化衍生物的合成及抗肿瘤活性

采用化学方法对18β-甘草次酸A环进行改造,合成了一系列新型18β-甘草次酸A环官能团化衍生物.对人白血病细胞株HL-60、K562、肝癌细胞BEL-7404及乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外抗肿瘤活性筛选结果表明,化合物5对4种肿瘤细胞系的抑制活性均强于18β-甘草次酸;构效关系分析表明,A环内烯键的形成对抑制肿瘤细胞增殖有重要影响;同时利用Hoechst33258和AO/EB染色,在荧光显微镜下观察到了细胞凋亡小体的形成.

甘草次酸诱导U266细胞凋亡及对Survivin表达的影响

本研究旨在观察甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)对人骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及survivin表达的影响。用MTT法检测GA对U266细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测不同浓度GA作用于U266细胞后细胞凋亡,细胞周期的变化;扫描电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;实时定量PCR检测GA对U266细胞survivin基因表达的影响。结果表明:GA对U266细胞有增殖抑制作用,其抑制作用呈现为时间和浓度依赖性;GA可以诱导U266细胞凋亡;扫描电子显微镜下可见核仁染色质边集,凝聚成块;GA可以诱导U266细胞周期阻滞于G0/G1期,表现为G0/G1期细胞比例升高,而G2/M及S期细胞比例下降。GA可以下调U266细胞survivin基因的表达,下调作用与浓度呈正相关。结论 :CA能抑制U266细胞增殖,呈浓度和时间依赖性,诱导其凋亡,其作用机理可能与细胞周期阻滞于G0/G1期和下调survivin基因表达有关。

18β-甘草次酸对2型糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

目的探讨18β-甘草次酸对2型糖尿病大鼠血糖、血脂及胰岛素敏感性的影响。方法采用高脂高糖饲料诱导结合一次性小剂量注射链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组(CON)、正常给药组(CGA)、糖尿病组(DM)、糖尿病+甘草次酸治疗组(DGA)、糖尿病+格列苯脲阳性对照组(DGL),采用灌胃方式分别给予溶剂(5%DMSO)、18β-甘草次酸[100 mg/(kg·d)]和格列苯脲[600μg/(kg·d)]。45 d后,检测实验大鼠的空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、LDL-C和HDL-C)以及血清胰岛素。结果18β-甘草次酸显著降低了糖尿病大鼠的FBG、TG、TC、LDL-C和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并升高了其抗动脉粥样硬化指数(AAI)。结论 18β-甘草次酸能有效降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂,改善胰岛素抵抗。