利用农杆菌介导法将抗虫基因和高赖氨酸蛋白基因导入超级杂交水稻亲本材料1826中

超级杂交水稻的培育、推广和应用可显著提高水稻的单位面积产量,但许多超级杂交水稻存在抗虫能力较低、品质较差的问题。1826是一个优良的超级杂交水稻亲本材料,但抗褐飞虱能力低,必需氨基酸赖氨酸的含量低。本研究利用基因工程技术将CaMV 35S启动子引导的半夏凝集素基因(PTA)和水稻胚乳特异表达启动子(Glutelin-B1 promoter)引导的马铃薯高赖氨酸蛋白基因(SB401)同时转入1826成熟胚诱导的愈伤组织中,获得了同时含PTA和SB401的转基因植株。本研究为提高1826的抗褐飞虱能力和赖氨酸含量打下了基础。

MDP-Cyclic与CpG-ODN1826对小鼠膀胱瘤免疫治疗效应的初步研究

目的:研究卡介苗(BCG)有效成分MDP-Cyc lic和细菌细胞核有效成分CpG-ODN 1826免疫治疗小鼠膀胱瘤效应。方法:用小鼠膀胱肿瘤细胞(BTT739)在T739小鼠皮下接种,肿瘤形成后,于瘤内多点注射MDP-Cyc lic或CpG-ODN 1826共3次。ELISA检测IFN-γ和IL-4含量,3H-TdR掺入法和MTT法检测脾淋巴细胞增殖效应和对靶细胞杀伤效应。结果:(1)与生理盐水(NS)对照组相比,联合应用MDP-Cyc lic和CpG-ODN 1826组小鼠肿块重量明显减轻,优于单独使用CpG-ODN 1826组;(2)联合用药能明显促进IFN-γ分泌,而对IL-4没有显著影响;(3)脾淋巴细胞对联合用药或单用MDP-Cyc lic刺激均有增殖作用,与NS对照组相比差异有统计学意义;(4)脾淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤率联合用药组高于其它组。结论:联合应用免疫调节剂MDP-Cyc lic和CpG-ODN 1826能抑制小鼠膀胱肿瘤生长。

两系杂交稻培两优1826高产栽培试验示范初报

两系杂交稻培两优 182 6在粤东地区可早、晚两造兼用 ,早造全生育期 140～ 15 0d ,晚造全生育期 119d ,早、晚造单产可达 9.75t/hm2 以上 ,高产田块单产达 11.6t/hm2 。该组合株型理想 ,剑叶坚挺 ,叶片浓绿厚直上举呈指甲型 ,分蘖力强 ,耐肥抗倒。宜采用健身栽培法 ,前、中、后期合理肥水管理。

超级杂交稻培两优1826试验示范及高产栽培技术

超级杂交稻培两优1826在揭阳市试种示范成功,在粤东地区可作早晚造兼用。介绍了培两优1826的试验示范结果及高产栽培技术。

高产优质杂交水稻新组合香龙优1826的选育

香龙优1826是肇庆学院与中国种子集团有限公司三亚分公司用恢复系中种恢1826与香型不育系香龙A配组育成的优质高产杂交水稻新组合。该组合具有稻瘟病抗性强、丰产性突出、米质优等特点,已于2021年8月通过广东省农作物品种审定委员会审定。

CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗对小鼠的免疫效果

目的探讨CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗对C57/BL6小鼠的免疫效果。方法将C57/BL6小鼠随机分为3组:重组质粒(pc DNA3.1-L7/L12)+CpG ODN1826组(Vaccine+CpG组,每只注射20μg重组质粒和10μg CpG ODN1826)、重组质粒组(Vaccine组,每只注射20μg重组质粒)和对照组(注射生理盐水),注射部位均为后腿胫骨前肌。各组均于初次免疫后2周加强免疫1次。于加强免疫后2周,采用ELISA法检测各组小鼠血清中细胞因子水平;MTT掺入法检测小鼠脾细胞非特异性增殖效应;HE染色观察小鼠脾脏组织学变化。结果与Vaccine组和对照组相比,Vaccine+CpG组小鼠血清中Th1型细胞因子IL-2、IL-12、IFNγ含量均显著升高(P均<0.01);脾细胞增殖效应明显增强(P<0.05);脾脏生发中心明显变大,细胞增殖更活跃。结论 CpG ODN1826为佐剂的布氏菌DNA疫苗能够明显诱导C57/BL6小鼠产生Th1型为主的免疫应答,增强脾脏淋巴细胞的增殖反应。

miR-1826在前列腺癌中的表达及其对PC-3、DU145细胞侵袭和迁移能力的影响

目的 观察miR-1826在前列腺癌(PC)及其细胞株中的表达,并探讨其对PC-3、DU145细胞侵袭和迁移能力的影响。方法 实时定量PCR(qRT-PCR)研究miR-1826在前列腺癌组织、癌旁正常组织及PC-3、DU145细胞的表达。采用Kaplan-Meier曲线分析miR-1826的表达与PC患者生存率的关系。采用Cox回归分析研究影响PC患者预后的危险因素。用miR-1826模拟物、模拟物阴性对照(NC)、miR-1826抑制剂或抑制剂NC转染PC细胞。通过CCK-8法和集落形成试验研究miR-1826对PC细胞增殖的影响,通过Transwell实验检测miR-1826对PC细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 miR-1826在PC组织中的表达低于邻近正常组织,两种PC细胞系中miR-1826的表达水平均低于正常人前列腺上皮细胞系。与高表达患者相比,miR-1826低表达患者的总生存期较短。miR-1826的下调可以促进PC细胞的迁移和侵袭。结论 miR-1826的低表达可能促进了PC的进展,上调miR-1826能抑制PC细胞的侵袭、迁移能力。

CpG1826对重组新型冠状病毒亚单位疫苗的协同免疫增强效果研究

目的以CpG1826作为疫苗佐剂评价其与铝佐剂对大肠埃希菌表达的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)亚单位疫苗免疫原性的协同增强效果。方法利用大肠埃希菌高效表达SARS-CoV-2亚单位抗原,纯化后加入CpG1826和铝佐剂。将BALB/c小鼠随机分成铝佐剂疫苗组、CpG+铝佐剂疫苗组和空白对照组,每组18只,于0、7和14 d进行腹腔注射免疫。分别于首针免疫后7、14和28 d采血和取脾检测小鼠血清IgG水平、中和抗体水平以及小鼠脾细胞上清中IFN-γ细胞因子水平。结果在首针免疫28 d后,3组小鼠的IgG、结合抗体抑制率和中和抗体水平差异均有统计学意义(F=21.440、159.400和8.470,P均<0.05),其中CpG+铝佐剂疫苗组分别为6.91±0.20、(91.01±4.60)%和65.33±51.70,均高于铝佐剂疫苗组(t=2.892、2.441和2.703,P均<0.05)。在首针免疫7、14和28 d后,3组的特异性IFN-γ的效应T细胞数比较差异有统计学意义(F=25.360、36.990和660.400,P均<0.01),CpG+铝佐剂疫苗组分别为179.68±69.26、395.58±139.64、563.50±43.79,均高于铝佐剂疫苗组(t=3.969、5.292和22.310,P均<0.01)。结论CpG1826能和铝佐剂协同增强大肠埃希菌表达的SARS-CoV-2亚单位疫苗诱导的体液及细胞免疫应答水平,显著提高其免疫原性,具有较强的临床意义。

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸1826对大鼠放射性肺纤维化的预防作用

目的 初步探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸（CpG ODN） 1826对大鼠放射性肺纤维化的防护作用.方法 采用6MVX射线单次左肺照射20 Gy,建立大鼠放射性肺纤维化模型.SD大鼠按完全随机法分为健康对照组、单纯照射组和药物干预组3组,每组30只.在照后0、1、3、5和7d,腹腔注射CpG ODN1826.照后5、15、30和90 d,取材,记录肺系数.照射肺石蜡切片HE染色、Masson染色,行肺纤维化评分.ELISA法检测血清TGF-β1浓度,碱化水解法检测肺组织羟脯氨酸（Hyp）浓度.结果 成功建立了放射性肺纤维大鼠模型.照后5d,健康对照组肺系数低于单纯照射组和药物干预组（t =3.046、2.252,P＜0.05）.照后15、30和90 d,药物干预组肺系数低于单纯照射组（t=4.120、5.226和5.719,P＜0.05）.单纯照射组及药物干预组照后30 d肺系数最高.药物干预组肺纤维化评分低于单纯照射组（t=3.212、4.959,P＜0.05）.药物干预组血清TGF-β1浓度低于照射组（t=4.138、5.924、5.294和4.076,P＜0.05）.单纯照射组照射肺Hyp含量高于药物干预组（t=7.527、8.416,P＜0.05）.结论 CpG ODN1826可以降低放射性肺纤维化大鼠血清TGF-β1浓度及Hyp含量,预防放射性肺纤维化.

TLR9激动剂诱导建立小鼠子痫前期动物模型的研究

目的:明确TLR9激动剂能否诱导妊娠期小鼠发生子痫前期。方法:给妊娠期小鼠腹腔注射TLR9激动剂ODN1826,构建子痫前期小鼠模型,观察孕鼠血压、尿蛋白及胎鼠体重等变化情况,检测小鼠胎盘和肾脏TLR9表达水平。结果:实验组孕鼠的血压与尿蛋白均高于对照组,而胎鼠体重低于对照组。实验组小鼠胎盘和肾脏中TLR9表达升高。结论:TLR9激动剂能使TLR9表达升高并诱发妊娠期小鼠产生子痫前期样症状,提示TLR9可能参与子痫前期的发病机制。

日本血吸虫22.6 kDa抗原编码基因序列中抑制性片段的确定

目的探讨日本血吸虫22.6kDa(Sj22.6)抗原编码基因序列中是否存在抑制性片段。方法用人工合成的来自Sj22.6抗原编码基因序列中的不同寡脱氧核苷酸和自小鼠脾脏分离的单个核细胞共同孵育,以对小鼠具有刺激作用的免疫刺激序列CpG1826作为刺激物,淋巴细胞增殖试验检测待测定寡脱氧核苷酸对CpG1826诱导的增殖是否具有抑制作用及其作用特征。结果存在于Sj22.6抗原编码基因序列中的寡脱氧核苷酸F311能够抑制刺激性CpG1826诱导的淋巴细胞增殖作用(P<0.05);当寡脱氧核苷酸F311与CpG1826的物质的量之比为1∶10和1∶3时无明显抑制作用(P>0.05),当物质的量之比为1∶1和3∶1时,对CpG诱导的淋巴细胞增殖的抑制率分别为11%和58%;寡脱氧核苷酸F311在先于CpG1826孵育2h加入表现出最强抑制作用。结论Sj22.6抗原编码基因序列中存在具有抑制作用的片段,抑制作用与其浓度和作用时间呈正相关。

CpGODN增强人肺癌细胞株A549放射增敏作用的研究

目的初步探讨CpG ODN增强人肺腺上皮细胞株A549放射增敏作用。方法 ELISA法检测细胞TNF-α、IL-12和INF-γ的分泌水平,Griess检测细胞NO的含量并观察CpG ODN1826与β射线诱导A549细胞AP-1活化的抑制作用。结果 CpGODN增加了人肺癌细胞株A549TNF-α、IL-12、INF-γ和NO的分泌,在联合β射线照射后对A549细胞的杀伤作用更加显著,并显著抑制A549细胞AP-1的活化。结论 CpG ODN对A549有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN增强A549细胞分泌TNF-α、IL-12、INF-γ、NO和抑制A549细胞AP-1的活化有关。

TLR9激动剂对胰腺癌细胞增殖的影响

目的观察Toll样受体9(TLR9)激动剂CPG-寡核苷酸1826(CPG-ODN1826)对体外胰腺癌细胞株PANC-1增殖的影响。方法实验组用CPG-ODN1826干预PANC-1细胞,对照组单独培养PANC-1细胞。采用MTT法、结晶紫实验和软琼脂糖细胞克隆形成实验分析PANC-1细胞增殖能力,Western blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达。结果与对照组相比,实验组PANC-1细胞增殖能力提高(P<0.05),细胞克隆数增多[(35.60±2.70)个vs.(50.40±4.04)个](P<0.05),p-ERK和p-JNK的表达增强(0.455±0.057vs.0.665±0.121和0.301±0.028vs.0.656±0.051)(P<0.05)。结论 TLR9激动剂CPGODN1826能够促进胰腺癌细胞增殖。