血清miR-184、miR-513c-5p表达与复发性流产相关性研究及临床意义

目的研究血清微小RNA-184(miR-184)、微小RNA-513c-5p(miR-513c-5p)表达与复发性流产(RSA)相关性及临床意义。方法选取2019年3月至2022年7月我院收治的67例RSA患者(RSA组)及67例正常早孕期女性(对照组),比较两组、RSA组血清miR-184、miR-513c-5p表达,将RSA组根据妊娠结局分为再次流产与未再次流产亚组,比较两亚组血清miR-184、miR-513c-5p表达。依次运用Pearson、受试者工作特征(ROC)曲线、临床决策分析曲线(DCA)、比值比(OR)进行相关性、预测效能、临床效用、危险度分析。结果RSA组妊娠前、后血清miR-184、miR-513c-5p均高于对照组,且RSA组妊娠后高于妊娠前(P<0.05);RSA组再次流产患者妊娠后血清miR-184、miR-513c-5p高于未再次流产患者(P<0.05)。RSA组妊娠前、后血清miR-184均与miR-513c-5p呈显著正相关(r=0.800、0.750,P<0.001);血清miR-184+miR-513c-5p表达预测RSA再发流产的ROC曲线下面积(AUC)为0.901,高于单独的血清miR-184、miR-513c-5p(Z=3.892、3.411,P<0.05)。采用该预测方案进行预测和干预,具有良好的临床效用。妊娠后血清miR-184高表达RSA患者再发流产的风险是低表达患者的7.407倍,血清miR-513c-5p高表达RSA患者再发流产的风险是低表达患者的18.125倍(P<0.05)。结论血清miR-184、miR-513c-5p的高表达与RSA及其再妊娠结局有关,联合检测两者可为再妊娠结局的预测提供一定参考,从而指导做出进一步的决策与治疗。

卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的探讨卵巢癌组织中长链非编码核糖核酸(LncRNA)小核仁核糖核酸宿主基因11(SNHG11)、微小核糖核酸184(miR-184)的表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法收集手术切除的104例卵巢癌组织及其癌旁组织(距离癌组织边缘≥2 cm且经病理检查为正常组织),实时荧光定量PCR法检测LncRNA SNHG11、miR-184表达,并分析二者的相关性。根据卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达均值将患者分为高/低表达组,比较两组的生存率;用多因素Cox回归分析卵巢癌患者预后的影响因素。结果卵巢癌组织中LncRNA SNHG11表达高于癌旁组织,miR-184表达低于癌旁组织(P均<0.05)。用StarBase软件预测发现,LncRNA SNHG11与miR-184存在结合位点。Pearson相关分析显示,卵巢癌组织中LncRNA SNHG11与miR-184表达呈负相关(r=-0.711,P<0.05)。不同分化程度、FIGO分期、淋巴结转移的卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达比较差异有统计学意义(P均<0.05)。LncRNA SNHG11高表达组总生存率低于LncRNA SNHG11低表达组(P<0.05),miR-184高表达组总生存率高于miR-184低表达组(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、淋巴结转移、LncRNA SNHG11≥2.27为卵巢癌患者死亡的独立危险因素,miR-184≥1.02为独立保护因素(P均<0.05)。结论卵巢癌组织中LncRNA SNHG11高表达、miR-184低表达,二者表达变化与肿瘤分化程度、FIGO分期、淋巴结转移和预后有关。

血清微小RNA-184、微小RNA-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌根治术后复发转移的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-184、miR-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后复发转移的预测价值。方法选取2020年1月—2021年10月在本院行根治性切除术的203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者为NSCLC组,随访2年根据复发转移情况分为复发转移组30例和无复发转移组173例;另选取同期87名体检健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-184、miR-451a表达。采用多因素Logistic回归模型分析影响Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-184、miR-451a表达对复发转移的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年,203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者术后复发转移率为14.78%(30/203)。与无复发转移组比较,复发转移组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的独立危险因素为ⅡA期、低分化、术后辅助化疗,独立保护因素为miR-184升高、miR-451a升高(P<0.05)。血清miR-184、miR-451a表达联合预测Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的曲线下面积为0.868,大于血清miR-184、miR-451a表达单独预测的0.784、0.781,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者血清miR-184、miR-451a呈低表达,与根治术后复发转移密切相关,血清miR-184、miR-451a联合检测对Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移有较高的预测价值。

LncRNA SNHG11通过抑制miR-184/CARM1信号轴促进卵巢癌生长

目的探讨长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因11(LncRNA SNHG11)靶向调控miR-184/CARM1信号轴对卵巢癌细胞的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测卵巢癌组织与细胞中LncRNA SNHG11表达及卵巢癌细胞miR-184表达。将卵巢癌SKOV3细胞分为si-NC组、si-SNHG11组、si-SNHG11+anti-NC组、si-SNHG11+anti-miR-184组、miR-NC组、miR-184 mimics组、miR-184 mimics+pcDNA组、miR-184 mimics+CARM1组,分别检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及CARM1、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达,裸鼠成瘤实验检测各组细胞在动物体内成瘤能力,双荧光素酶报告基因实验检验miR-184与LncRNA SNHG11、CARM1的靶向关系。结果LncRNA SNHG11在卵巢癌组织与细胞中表达升高,miR-184在卵巢癌细胞中表达降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-SNHG11组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力下降,瘤体质量与体积减小,N-cadherin表达降低,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与si-SNHG11+anti-NC组比较,si-SNHG11+anti-miR-184组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭细胞能力升高,瘤体质量与体积增大,N-cadherin蛋白表达升高,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-184 mimics组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力下降,瘤体质量与体积减小,N-cadherin蛋白表达降低,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与miR-184 mimics+pcDNA组比较,miR-184mimics+CARM1组SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭能力升高,瘤体质量与体积增大,N-cadherin蛋白表达升高,细胞凋亡率与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);LncRNA SNHG11靶向调控miR-184/CARM1信号轴。结论LncRNA SNHG11通过调节miR-184/CARM1信号轴,促进卵巢癌生长。

MiR-184通过调节FOXO3促进卵巢癌细胞增殖能力

目的 探讨miR-184通过调节FOXO3促进卵巢癌细胞增殖能力的影响。方法 荧光定量PCR检测样品中miR-184的表达水平;将miR-184mimic和miR-184 inhibitor转染至人源SKOV3卵巢癌细胞株中,并采用MTT法对转染目的基因成功的人源SKOV3卵巢癌细胞进行体外增殖活力的检测,同时检测cyclin D1、p27和FOXO3 mRNA的表达水平。结果 卵巢癌组织和细胞中miR-184的表达显著高于癌旁组织,SKOV3细胞中miR-184的表达显著高于人卵巢上皮细胞IOSE80;与IOSE80细胞相比,SKOV3细胞中FOXO3和p27 mRNA表达水平显著降低,而cyclin D1 mRNA表达水平显著升高。MTT试验表明,过表达miR-184后,SKOV3细胞增殖活性显著提高;当抑制miR-184表达后,SKOV3细胞增殖活性显著降低。此外,过表达miR-184后,SKOV3细胞的cyclin D1 mRNA表达量显著升高,而FOXO3和p27 mRNA表达量则显著降低(P<0.05)。与此相反,当抑制miR-184的表达后,SKOV3细胞的cyclin D1 mRNA表达量显著降低,而FOXO3和p27 mRNA表达量则显著升高(P<0.05)。结论 miR-184能影响卵巢癌细胞的增殖能力,并调节细胞周期相关基因的表达。

miR-184在葡萄膜炎发病过程中对白细胞介素-18和TLR-8表达的调控作用机制

目的:检测miR-1、miR184与多巴胺转运体在多巴胺细胞系SH-SY5Y内的表述,研究miR、miR-184在SH-SY5Y细胞系中对DAT基因表述的作用与其体制。方法:使用microRNA.org、miRBase、TargetScan.等网络数据库预估与文献检索相融合的模式,选择可以作用于DAT基因的候补miRNAs,并化学合成候补miRNAs模拟物转染到SH-SY5Y细胞内。依次转染后12h与24h后,提炼NC-mimics组、NC-inhibitor组、miRNAs mimics组与miRNAs inhibitor组细胞总RNA与蛋白;使用实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞内的候补miRNA、DATmRNA表述情况;使用Western Blot检测各组细胞内DAT蛋白表述水平。结果:(1)通过生物信息理论检测融合检索资料选择出的候补miRANs是miR-1、miR-184;(2)miRNAs表述水平:miR-1 mimics 12h组与miR-1 mimics 24h组的miR-1表述量明显超过对照组(Ps<0.001),miR-1 inhibitor 12h组、miR-1 inhibitor 24h组合对照组比较没有明显差异(Ps>0.05);miR-184 mimics24h处理组中miR-184的表述量和对照组比较都有明显差异(P<0.01),miR-184 inhibitor 12h、miR-184 mimics12h与miR-184 inhibitor 24h处理组与对照组比较并无明显差异(Ps>0.05);(3)DATmRNA表述水平:miR-1 mimics 12h处理组内DAT mRNA的表述量和对照组比较有明显差异(P<0.05),miR-1 mimics 24h、miR-1 inhibitor 12h组与miR-1inhibitor 24h组DAT mRNA的表述量和对照组比较都缺乏明显差异(Ps>0.05),miR-184 mimics 12h组、miR-184 inhibitor 12h组与miR-184 inhibitor 24h组DAT mRNA的表述量和对照组比较都缺乏明显差异(Ps<0.05)。结论miR-1、miR-184参加SH-SY5Y细胞内DAT基因表述的控制,过表达的miR-1与miR-184都能压抑SH-SY5Y细胞内的DAT蛋白的表述。

白杨素通过调控SNHG9/miR-184对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的保护作用

目的 探讨白杨素对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及可能机制。方法 体外培养人软骨细胞,不同浓度(20、40、60μg/L)的白杨素与10 ng/ml的IL-1β共同干预软骨细胞24 h后,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹法检测细胞中裂解的半胱氨酸蛋白水解酶(Cleaved-caspase)3蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中IL-8、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,RT-聚合酶链反应(qPCR)检测细胞中小核仁RNA宿主基因(SNHG)9和miR-184表达。转染SNHG9过表达载体或小干扰RNA至软骨细胞后,用10 ng/ml的IL-1β干预24 h或60μg/L白杨素与10 ng/ml IL-1β共同干预24 h,上述相同方法检测细胞增殖、凋亡、Cleaved-caspase3蛋白表达及细胞培养上清中IL-8、IL-6、TNF-α水平。双荧光素酶报告基因实验验证SNHG9和miR-184靶向关系。结果 20、40、60μg/L的白杨素显著提高了IL-1β诱导的软骨细胞光密度(OD)值(P<0.05),显著降低了细胞凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白表达量(P<0.05),同时显著降低了软骨细胞培养上清中IL-8、IL-6、TNF-α表达量(P<0.05),且呈浓度依赖性。上调SNHG9显著提高了IL-1β诱导的软骨细胞OD值(P<0.05),显著降低了细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达量及细胞培养上清中IL-8、IL-6、TNF-α表达量(P<0.05),而下调SNHG9与上调SNHG9的作用相反。SNHG9靶向负调控miR-184。白杨素促进IL-1β诱导的软骨细胞中SNHG9的表达,而抑制了miR-184的表达。下调SNHG9逆转白杨素对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎症因子表达的抑制作用。结论 白杨素可抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和炎性因子表达,其可能通过调控SNHG9/miR-184轴发挥作用。

miR-184通过TIMP-2/MMP-14促进PNX模型中代偿性肺生长

目的:探究微小RNA-184(miR-184)对多原发肺癌(MPLC)肺叶切除术后代偿性肺生长(CLG)的影响和作用机制。方法:(1)收集MPLC患者和肺叶切除术后恢复较好患者(CLG)的肺组织样本(n=16)。RT-qPCR检测miR-184的表达。(2)将人肺泡上皮细胞根据转染物分为NC-mimic组、miR-184 mimic组、OE-NC组、金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)过表达(OE-TIMP-2)组和miR-184 mimic+OE-TIMP-2组(n=3)。RT-qPCR检测细胞中miR-184、TIMP-2 mRMA和基质金属蛋白酶14(MMP-14)mRNA表达;Western blot检测TIMP-2和MMP-14蛋白表达;CCK-8和集落形成实验检测细胞增殖能力。(3)将C57BL/6J小鼠分为肺切除术(PNX)组和PNX+miR-184 mimic组(n=5)。用flexiVent肺功能检测系统检测小鼠肺活量和肺顺应性;水置换法检测肺容量;HE染色观察肺组织变化。结果:miR-184在肺叶切除术后恢复较好患者中的表达显著升高(P<0.01)。过表达miR-184能促进人肺泡上皮细胞增殖和PNX后小鼠肺功能恢复。miR-184与TIMP-2存在靶向结合关系;过表达miR-184通过抑制TIMP-2促进MMP-14的表达,进而促进人肺泡上皮细胞增殖和PNX后小鼠肺功能恢复。结论:miR-184通过TIMP-2/MMP-14轴促进PNX后的CLG。

基于Wnt信号通路探究上调miR-184对糖尿病视网膜病变模型大鼠的干预效果

目的基于Wnt信号通路探究上调miR-184对糖尿病视网膜病变模型大鼠的干预效果。方法选取40只SD健康大鼠,10只作为正常组,剩余30只建立糖尿病视网膜病变模型,并随机分为模型组、下调miR-184组、上调miR-184组。对4组大鼠分别进行干预,同时对4组大鼠视网膜组织进行苏木素-伊红(HE)染色处理。对总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖水平进行检测对比。采用免疫比浊法、酶联免疫吸附试验分别对谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平进行检测。结果与正常组相比,模型组TC、TG、空腹血糖、VEGF、TNF-α、NO水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,下调miR-184组TC、TG、空腹血糖、VEGF、TNF-α、NO水平显著升高(P<0.05);与下调miR-184组相比,上调miR-184组TC、TG、空腹血糖、VEGF、TNF-α、NO水平显著降低(P<0.05);与正常组相比,模型组GSH显著下降(P<0.05);与模型组相比,下调miR-184组GSH显著下降(P<0.05);与下调miR-184组相比,上调miR-184组GSH显著上升(P<0.05);与正常组相比,模型组糖原合成激酶(GSK)-3β表达显著升高、β-连环蛋白(catenin)、原癌基因(C-Myc)表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,下调miR-184组GSK-3β表达显著升高、β-catenin、C-Myc表达显著降低(P<0.05);与下调miR-184组相比,上调miR-184组GSK-3β表达显著降低,β-catenin、C-Myc表达显著升高(P<0.05)。结论上调miR-184干预糖尿病视网膜病变模型大鼠,对血脂、血糖水平具有调控作用,可改善眼底视网膜环境,有效降低血管通透性,从而达到治疗糖尿病视网膜病变的效果。

miR-184靶向TNFAIP2调控肺癌血管新生的分子机制

目的 探讨微小RNA(miR)-184靶向肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导蛋白(TNFAIP)2对肺癌增殖、血管新生的调控作用及其分子机制。方法 聚合酶链式反应(PCR)检测正常人及非小细胞肺癌患者血清miR-184与TNFAIP2 mRNA的表达,qRT-PCR及Western印迹分别检测人支气管黏膜上皮细胞(BEAS-2B)、肺癌A549细胞miR-184与TNFAIP2 mRNA及蛋白的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血管内皮生长因子(VEGF)蛋白,血管形成实验检查各组血管新生能力。过表达miR-184及干扰TNFAIP2后,观察各组细胞增殖及血管新生能力,双荧光色素酶试验验证miR-184与TNFAIP2的结合位点。结果 miR-184在肺癌组表达水平显著降低,VEGF蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。A549细胞miR-184表达水平显著低于BEAS-2B细胞,而TNFAIP、VEGF蛋白表达水平显著高于BESA-2B细胞(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-184组血管新生能力明显减弱,而干扰TNFAIP2表达后,si-TNFAIP2组血管新生能力也明显减弱(P<0.05)。结论 miR-184抑制肺癌A549细胞血管新生,其主要分子机制是通过靶向TNFAIP2调控VEGF的表达而发挥作用。

微小miR-184在调控女性滋养层细胞凋亡中的作用及其分子机制探究

目的:探究微小miR-184(miR-184)在调控女性滋养层细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法:利用定量的反转录(PCR)技术检测62例女性滋养层细胞组织中微小miR-184的表达,以分析和观察女性滋养层细胞组织中的miR-184在人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/Svneo)和滋养层细胞系(Swan71)两种细胞中的表达水平和对细胞增殖与凋亡的作用机制。结果:miR-184在人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/Svneo)和人滋养层细胞(Swan71)两种细胞中的相对表达水平在滋养层细胞中比在正常的上皮组织细胞中更高(均P<0.05);转染小干扰RNA(siRNA)沉默miR-184促使miR-184的表达能够抑制HTR8/SVneo和Swan71细胞的增殖,利用si-miR-184的转染降低miR-184的表达水平能够阻碍女性滋养层细胞的凋亡(P<0.01),而miR-184的过度表达能够明显推动女性滋养层细胞的凋亡(P<0.01)。结论:通过抑制miR-184表达可以调控和诱导滋养层细胞凋亡的保护作用。

miRNA-184与肾脏纤维化的相关性研究

目的 探讨miRNA-184与肾脏纤维化的相关性。方法 以肾穿刺结果肾脏纤维化比例超过50%的患者为观察组,无肾脏纤维化患者作为对照组,采用qRT-PCR检测血清miRNA-184的表达水平;以单侧输尿管结扎(UUO)模型小鼠作为观察组,假手术小鼠和未处理的小鼠作为对照用qRT-PCR检测肾组织内miRNA-184的表达水平。结果 实验组患者血清miRNA-184的表达水平高于对照组。与假手术小鼠和未处理小鼠相比,UUO小鼠模型肾脏组织中miRNA-184的表达水平更高;而假手术小鼠和未处理小鼠相miRNA-184的表达水平差异无统计学意义。结论 miRNA-184在肾脏纤维化时表达上调。

胶质瘤中MicroRNA-184的表达及其预后价值

目的研究人脑胶质瘤石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)中微小RNA-184(microRNA-184,miR-184)的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨其在预测胶质瘤患者预后中的价值。方法采用微阵列芯片法和RT-PCR检测108例胶质瘤FFPE和32例正常脑组织中的mi R-184表达,同时Kaplan-Meier法分析胶质瘤患者总生存期和无病生存期情况。结果胶质瘤组织中miR-184的表达下调,并用RT-PCR进一步验证;miR-184低表达与WHO分级(P=0.007)、Karnofsky评分(KPS)(P=0.029)、复发时间(P=0.037)和生存时间(P=0.019)显著相关;Kaplan-Meier分析结果表明,miR-184低表达与高表达患者总生存期(OS)(P=0.001)和无病生存期(DFS)(P=0.006)差异有统计学意义,mi R-184低表达患者预后较差。多因素分析显示胶质瘤中miR-184的差异表达是预测OS[风险比(HR):7.52;95%CI:2.63~21.42;P=0.002]和DFS[HR:11.56;95%CI:5.17~25.93;P<0.001]的独立危险因素。结论 miR-184的表达与胶质瘤患者预后显著相关,表明miR-184可作为预测胶质瘤患者预后的独立标志物。

miR-184及miR-205在绵羊不同生长时期毛囊及其他组织中的表达研究

为了研究miR-184及miR-205在绵羊毛囊发育过程中的作用,本研究以绵羊为研究材料,检测了miR-184及miR-205在毛囊3个发育时期及不同组织中的表达情况,进行了基因组定位及前体预测,并预测了可能的靶基因及调控的基因通路。结果发现,miR-184的表达量从毛囊生长期到衰退期呈逐步上升的趋势,而miR-205则表现为先上升后下降,其在衰退期表达量最高。2个microRNA在绵羊的多个组织中均有表达。两者的候选靶基因涉及15个基因通路,可能通过Wnt通路调控毛囊的生长周期。

miR-184靶向AGO2调控AKT/mTOR信号通路对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的研究miR-184在膀胱癌发生、发展过程中的作用及其相关机制。方法收集2015年1月至2017年1月南阳市中心医院87例膀胱癌患者的手术切除标本,采用qRT-PCR检测膀胱癌及癌旁组织中miR-184的表达;通过生物信息学方法预测miR-184的靶基因并采用双荧光素酶实验及免疫荧光进行验证。在人膀胱癌细胞系T24中转染miR-184过表达质粒,MTT、Transwell侵袭和划痕实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力,Western blot检测AKT/mTOR通路蛋白的表达。结果miR-184在膀胱癌组织中的相对表达水平1.238±0.026明显低于癌旁组织2.601±0.054,差异有统计学意义(t=22.57,P<0.01);且其表达水平与膀胱癌患者的TNM分期(t=-5.61,P<0.001)、淋巴结转移(t=-2.35,P=0.011)及组织学分级存在明显相关(t=2.171,P=0.033)。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验证实miR-184能直接靶向结合AGO2基因3′-UTR。体外实验结果表明,转染miR-184模拟物后,膀胱癌细胞T24中AGO2 mRNA和蛋白的表达水平明显下调,细胞增殖、迁移及侵袭能力降低,p-mTOR、p-AKT蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-184在膀胱癌组织中低表达,上调miR-184表达可抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与AKT/mTOR信号通路的调节有关。

miRNA-184在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miRNA-184在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响以及胶质瘤发生发展过程中的分子机制。方法:利用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miRNA-184在患者胶质瘤组织以及癌旁组织中的表达水平;利用体外细胞培养实验向胶质瘤细胞中转染miRNA-184 mimics;利用CCK-8比色法和流式细胞仪分别检测转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞的增殖能力和凋亡情况;利用Western blot检测转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞中AKT蛋白的表达水平。结果:荧光定量PCR检测结果表明,miRNA-184在患者胶质瘤组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);细胞体外转染实验结果表明,转染miRNA-184 mimics后,胶质瘤细胞的增殖能力显著下降,凋亡率显著升高(P<0.01);Western blot检测结果表明,转染miRNA-184 mimics后胶质瘤细胞中AKT蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论:miRNA-184在胶质瘤组织中显著低表达,miRNA-184与胶质瘤的发生发展密切相关;过表达miRNA-184可以抑制胶质瘤细胞的增殖,促进胶质瘤细胞的凋亡;miRNA-184可能通过抑制AKT信号通路从而抑制胶质瘤的发生发展。

MicroRNA-184调控Ras/MAPK/ERK途径与老年肾细胞癌肿瘤细胞增殖、迁移及凋亡的关系

目的探讨MicroRNA-184(miR-184)对老年肾细胞癌ACHN细胞增殖、迁移和凋亡的影响及相关的分子机制。方法ACHN细胞转染miR-184 mimics(miR-184 mimics组)、miR-NC(miR-NC组),对照组未做任何处理,q-RT-PCR检测miR-184的转染效率,MTT法、细胞划痕实验、流式细胞术检测ACHN细胞的增殖、迁移距离和凋亡率,Western印迹检测Ras/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白ERK、磷酸化(p)-ERK的表达情况。结果q-RT-PCR结果显示,与对照组和miR-NC组相比,miR-184表达水平显著升高(P<0.05);MTT结果显示,过表达miR-184降低了ACHN细胞的存活率、迁移距离,增加了细胞的凋亡率(P均<0.05);过表达miR-184降低了ACHN细胞中p-ERK蛋白表达水平(P<0.05),抑制了Ras/MAPK/ERK信号通路。结论miR-184可能通过调控Ras/MAPK/ERK途径抑制老年肾癌ACHN细胞增殖能力和迁移能力,促进ACHN细胞的凋亡作用。

不同基质材料修饰的Sylgard184与C2C12细胞的相容性

目的筛选能提高硅酮橡胶弹性体（Sylgard184）与C2C12相容性的理想基质材料。方法Sylgard184双组分以10∶1的比例均匀混合,倒入6孔板的其中4孔,室温下静置固化,其余2孔做为空白对照培养组（A组）;固化后的Sylgard184表面依次经过以下处理：I型胶原包被（B组）、层黏连蛋白包被（C组）、多聚赖氨酸包被（D组）;未经包被（E组）,每组共6个样本。在不同基质材料修饰的Sylgard184表面培养C2C12细胞,利用倒置显微镜观察5组C2C12细胞的增殖、分化状态,流式细胞术（FCM）检测增殖培养48h后C2C12细胞的分裂增殖情况,RT-PCR检测增殖和分化培养48h后C2C12细胞内MyoD、myogenin mRNA的表达。结果Sylgard184材料存在细胞毒性,E组接种的C2C12细胞在24h内全部漂浮死亡;D组的大多数细胞出现死亡,仅少数贴壁存活;而B、C两组材料包被后明显减少Sylagard184的毒性,增强其表面与C2C12细胞的相容性,且C组细胞处于合成期的百分比以及增殖期的MyoD和分化期Myogenin基因mRNA的表达水平均显著高于A、B两组（P〈0.05）。结论经层黏连蛋白包被后的Sylgard184表面更有利于C2C12细胞的增殖及分化活性的表达。

MicroRNA-184靶向作用EPB41L5抑制肾细胞癌存活与迁移研究

目的:研究MicroRNA-184(miR-184)对肾癌细胞存活与迁移的影响,并分析其靶基因及功能。方法:RT-PCR法检测肾细胞癌模型小鼠肿瘤组织及细胞系中miR-184的表达水平。脂质体法转染miR-184mimic至肾癌细胞A498、786-O,利用平板克隆及Transwell法测细胞克隆形成及迁移能力。生物信息学分析预测miR-184靶基因,荧光素酶报告基因法检测miR-184对靶基因的作用,Western blot法检测靶基因表达量。转染靶基因siRNA检测细胞克隆形成及迁移情况。结果:肾细胞癌小鼠肿瘤组织及肾癌细胞中miR-184表达水平显著降低(P<0.05)。转染miR-184mimic后,肾癌细胞的克隆形成能力及细胞迁移数目显著减少(P<0.05)。靶基因预测结果表明,EPB41L5的3’-UTR包含miR-184的潜在结合位点。miR-184mimic转染降低EPB41L5正常3’-UTR载体的荧光素酶活性,而对突变3’-UTR的荧光素酶活性则无影响。EPB41L5siRNA转染后,肾癌细胞中EPB41L5表达水平较对照组明显下降,同时,细胞体外克隆形成数目及迁移数目显著减少。结论:miR-184可通过作用靶基因EPB41L5而调控肾癌细胞的存活及迁移能力,影响肾细胞癌的发展。

胃癌组织中miR-184、Beclin1、LC3B的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中miR-184、自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达及临床意义。方法收集103例胃癌患者的临床及病理资料,通过荧光实时定量PCR技术测量miR-184、Beclin1及LC3B的表达情况,并分析其临床特征。采用Pearson相关分析法检验miR-184、Beclin1及LC3B的相关性。结果胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达量较癌旁组织下降(P均<0.05)。存在淋巴结转移及TNM分期Ⅲ-Ⅳ期患者胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达降低(P均<0.05)。miR-184和Beclin1、miR-184和LC3B、Beclin1和LC3B的表达量均呈显著正相关(r分别为0.845、0.787、0.793,P均<0.05)。结论胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达均降低,且与淋巴结转移和TNM分期密切相关,能够在一定程度上评估患者病情。