改进的^18O同位素标记法标记蛋白质多肽

针对18O同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H218O中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(18O/16O峰面积比值>99%)。标记后,对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活,使标记后的肽段稳定性显著提高,放置6d不发生回交反应。对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明:优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽。

MEWS

针对蛋白质组学研究中^18O标记存在的一些问题，北京放射与辐射医学研究所、蛋白质组研究中心、蛋白质组学国家重点实验室钱小红研究小组创新性地提出了一种基于酸酐双功能试剂修饰辅助的稳定同位素^18O标记的蛋白质组双重定量新方法。