19-去甲睾酮异源性ciELISA试剂盒的研制及应用

筛选抗19-去甲睾酮(NT)单克隆抗体,建立异源性ciELISA试剂盒。用人工抗原NT-17-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立1株抗NT单克隆杂交瘤细胞NT1-B7,同种型为IgG1/k,腹水效价达0.64×105,亲和常数(Ka)为4.31×109L/mol,半数抑制浓度(IC50)为0.55ng/ml,与群勃龙和雌二醇的交叉反应率(CR)分别为2.2%和1.6%,与其它化合物无CR。异源性ciELISA试剂盒在猪肉、猪尿、牛肉和牛尿四种基质中的检测限分别为0.24ng/ml、0.23ng/ml、0.22ng/ml和0.17ng/ml,批内和批间相对标准差(RSD)在4.4%～21.8%,添加回收率在85%～110%,4℃下保存期至少6个月。NT-Kit的基质pH适用范围为6.5～7.5,温育过程优化后可节约检测时间30～90min。试剂盒灵敏度高、特异性强,可应用于样品基质中NT残留检测。