ELISA检测CA19-9对胰腺疾病的诊断意义

ＥＬＩＳＡ检测ＣＡ１９┐９对胰腺疾病的诊断意义翟卫中董桂冠（南京铁道医学院附属医院，南京２１０００９）关键词糖类抗原１９－９酶联免疫吸附试验胰腺疾病糖类抗原１９－９（ＣＡ１９－９）为细胞膜上的糖脂质，因由鼠单克隆抗体１９－９识别故名。在血清中以粘蛋白...

糖类抗原19-9单抗制备及DAS-ELISA的建立

目的：为制备糖类抗原19-9（Carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）特异性单克隆抗体。方法：以免疫后小鼠血清效价及其IC50值确定融合用小鼠，融合、筛选获得阳性杂交瘤细胞株。制备、收集并纯化腹水抗体，紫外分光光度法测定抗体浓度；辣根过氧化物酶标记抗体后，筛选配对抗体建立DAS-ELISA检测方法，并与国外检测试剂盒进行对比验证检测性能。结果：细胞融合后获得3株单抗细胞株（ZJY1-2C8、ZJY2-7F10、ZJY3-1G9），筛选确定ZJY3-1G9作为包被抗体、ZJY2-7F10作为酶标抗体，成功建立DAS-ELISA检测方法，最低检测限为26.4 U/ml。线性范围为30～300 U/ml。通过检测病患血清33份，证实与国外试剂盒检测的相关系数r＝0.9504。结论：所制备的单抗可用于CA19-9试剂盒的研制。

温州地区献血者人细小病毒B19感染状况分析

人细小病毒B19是细小病毒科细小病毒属一种单链、无包膜的规模最小的DNA病毒,其通常通过上呼吸道飞沫传播,也可以通过输血传播,感染可引起人类多种疾病,如免疫功能低下、长期的纯红细胞发育不全、慢性溶血性贫血患者可出现短暂的再生障碍性危象,胎儿贫血及死亡等,且该病毒对灭活或清除具有一定抗性,被认为是血液制品的一个危险因素[1-3]。

大学生群体人细小病毒B19感染状况调查

目的调查大学生群体人细小病毒B19(B19V)感染状况,为制定献血者筛查策略及采供血策略提供数据支撑。方法在2023年3月—2024年2月的长春地区献血者标本中,采用随机数原则,每月选取1~3 d的大学生献血者标本进行回顾性分析;采用ELISA法检测B19V IgG/IgM抗体,采用实时定量PCR法检测B19V DNA及病毒载量。结果在1456份大学生献血者标本中,B19V IgG、IgM抗体和DNA阳性率分别为11.54%、0.34%和2.68%。39份B19V DNA阳性标本病毒载量为5.60×10^(2)IU/mL~9.10×10^(6)IU/mL,其中病毒载量>10^(4)IU/mL标本为28份(1.92%);B19V DNA阳性、IgG/IgM阴性标本为11份(0.76%)。结论大学生群体B19V既往感染率较低,被感染风险较高,且B19V IgG阴性的高病毒血症期急性感染比例较高,存在经输血传播风险;有必要对大学生群体进行有针对性的血液安全监测,以监测该人群中B19V DNA的流行情况。

血清CA19-9的酶免测定及临床应用

本文用生物素—链霉亲和素酶联免疫吸附试验（BSA）对203例血清CA19－9水平进行定量测定。结果显示，在32例胰腺癌组为826±411U／ml，40例肝癌组为107±46．5U／ml，与76例正常人对照组21．2±9．24U／ml比较均有明显差异（P＜0．05），以胰腺癌组升高最显著。在39例胃癌组为25．4±11．0U／ml，与正常对照组比较均无明显差异（P＞0．05）。27例胰腺癌病人术前为910±452U／ml，术后为187±89．0U／ml，血清CA19－9水平明显下降（P＜0．05）。血清CA19－9水平分析对胰腺癌的鉴别诊断、疗效观察及预后评估有较高价值。

中国献血人群中人细小病毒B19的分子流行病学调查

目的人细小病毒B19(Human parvovir-usB19)属于细小病毒科(Parvoviridae),嗜红细胞病毒属(Erythrovirus)。B19是1种单链无包膜病毒,其病毒基因组长约5.6kb,目前B19在世界范围的流行株有3种基因型。B19可通过呼吸道传播,引起胎儿水肿、宫内死胎、自发性流产、传染性红斑、急性关节炎等多种疾病。B19还可通过血液和血液制品传播,并且可抵抗大多数病毒灭活/去除方法,显示其在输血安全中的重要性。然而其在中国献血人群中的存在情况、流行株和病毒的载量还不清楚。由于B19有较高的发病率,献血者B19感染时会出现较高的病毒血症,因而用于加工的大量汇集血浆中会含有B19病毒。在欧美等国家都将小样本汇集的Q-PCR方法引入了他们的血液筛查方案中,病毒载量高于104IU/ml的样本都要拆分和废弃。在我国,B19的检测并没有被列为血液制品的筛查项目。本研究旨在调查中国献血人群中人细小病毒B19的病毒DNA和血清学流行率,了解我国B19病毒在献血人群中的流行情况,对我国未来的献血筛查策略提供数据支持。同时,献血人群中,存在一部分HIV感染者,而B19感染免疫缺陷病人,能造成严重的慢性贫血,并由于机体无法形成B19抗体或抗体无效,因而造成持续性感染。本研究也检测了HIV阳性献血者中人细小病毒B19的病毒DNA和血清学流行率,了解我国B19病毒在HIV阳性献血人群中的流行情况,并对B19病毒在正常人群和免疫缺陷人群中不同的表现进行比较研究,从而对这一人群的抗病毒治疗提供指导。

食品中残留19-去甲睾酮免疫原的合成与鉴定

19-去甲睾酮(19-nortestosteroneNT),属于半抗原生物小分子,具有免疫反应性,但不具有免疫原性。本文中19-去甲睾酮经羧甲基羟胺肟化,质谱(MS)检验后,采用混合酸酐法将肟化产物与牛血清蛋白(bovineserumalbuminBSA)偶联,紫外分光光度法测定其交联率为24。用此合成产物进行动物体免疫,获得了NT的多克隆抗体。经间接酶联免疫测定,其抗血清的稀释度可以达到1:102400,证明诺龙免疫原的合成成功,为诺龙酶联免疫试剂盒的研究奠定基础。

人细小病毒B19-VP2-IgM的检测及其应用价值的研究

目的 评估 EL ISA法检测抗人细小病毒 B19主要衣壳蛋白 Ig M(B19- VP2 - Ig M)诊断 B19病毒感染的价值 ;并初步了解 B19病毒感染临床表现多样性 .方法 对 5 5例小儿常见疾病包括急性再生障碍性贫血 (AA) 10例 .特发性血小板减少性紫癜 (ITP) 10例、急性淋巴细胞白血病 (AL L ) 15例、幼年类风湿关节炎 (JRA) 12例、过敏性紫癜 (SHP) 8例患者血清进行 B19- VP2 - Ig M检测 ;并对上述标本用巢式 PCR检测 B19- DNA作为对照研究 .结果 1EL ISA法检测 B19-VP2 - Ig M特异性高 ,稳定性好 . 2 B19- VP2 - Ig M总阳性率为10 / 5 5 (18.2 % ) ,其中 AA,ITP,AL L,JRA,SHP阳性率分别为 :2 / 10 (2 0 .0 % ) ,3/ 10 (30 .0 % ) ,2 / 15 (13.3% ) ,2 / 12(16 .7% ) ,1/ 8(12 .5 % ) . 3B19- DNA总阳性率为 17/ 5 5(30 .9% ) ,其中 AA,ITP,AL L ,JRA,SHP阳性率分别为 :3/ 10 (30 . 0 % ) ,4/ 10 (40 . 0 % ) ,4/ 15 (2 6 . 7% ) ,4/ 12(33.3% ) ,2 / 8(2 5 .0 % ) . 4B19- VP2 - Ig M阳性率略小于B19- DNA阳性率 ,但统计学检验无显著差异 (P >0 .0 5 ) .结论 1EL ISA法检测 B19- VP2 - Ig M简便快速 ,特异性高 ,适用于 B19病毒感染早期诊断 . 2 B19病毒感染临床表现多种多样 ,与小儿 AA,ITP,AL L,JRA,SHP关系密?

抗人CA19-9单克隆抗体的制备和鉴定及化学发光检测体系的建立

目的制备抗人糖抗原19-9（CA19-9）单克隆抗体（mAb）,建立双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。方法 CA19-9免疫小鼠后,通过细胞融合技术,获得抗CA19-9的mAb。鉴定其抗体的纯度、效价、特异性和配对,建立双抗体夹心化学发光体系。在包被缓冲液、包被浓度及加样模式上优化化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性评估以及血清样本的检测。结果获得4株名称为#1-1、#2-1、#3-1和#4-1的mAb。抗体效价均大于10^-8,与CA125、CA15-3、CA72-4均无交叉反应。其中#3-1 mAb与#2-1-HRP建立的双抗体夹心体系经优化后,其检测范围为0~1 000 U/mL;最低检测限为2.0 U/mL;线性相关系数为0.9999。与罗氏试剂检测结果对比,Kappa系数大于0.75;相关系数大于0.9。结论成功制备了抗人CA19-9 mAb,建立了双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。

肿瘤型M2丙酮酸激酶与癌类抗原19-9联合检测在胰腺癌诊断中的应用

目的:探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶(TumorM2-PK,TuM2-PK)、糖类抗原19-9(CA19-9)在胰腺癌中的表达特性。方法:采用ELISA法分别检测50例胰腺癌患者、35例胰腺炎患者及80名健康体检人血中TuM2-PK、CA19-9含量。结果:胰腺癌患者血中TuM2-PK、CA19-9值分别是(164.9±41.3)U/mL、(630.1±200.3)U/mL。在胰腺癌的诊断中单独检测时TuM2-PK、CA19-9敏感性分别为75%、74.5%,特异性分别为90%、85%,联合测定敏感性、特异性分别达到82.3%、100%。结论:联合检测TuM2-PK、CA19-9有助于提高对胰腺癌诊断的特异性和敏感性。

人细小病毒B19在育龄妇女中的感染状况分析

目的统计在我院进行孕前检查的育龄妇女人细小病毒B19的感染情况,观察其整体发病率以及是否有年度差异和季节性差异。方法利用酶联免疫吸附实验,检测育龄妇女血清中人细小病毒B19的IgM及IgG抗体。回顾性分析2016年9月至2019年8月的年度差异及季节性差异。结果人细小病毒B19 IgM抗体阳性率0.78%,并且连续3年阳性率无差别,但在不同季节的统计中差异具有统计学意义,其中秋季阳性率最高,细小病毒B19 IgG抗体阳性率为10%。结论在育龄妇女中存在的细小病毒B19感染发病率虽然不高,但有显著的季节性差异,可帮助临床有针对性的进行预防。

联合检测血清CEA、VEGF、CA19-9在大肠癌诊治中的价值

目的探讨联合检测血清CEA、VEGF、CA19-9在大肠癌诊治中的价值。方法采用ELISA及电化学发光法联合检测大肠癌(大肠癌组)、大肠良性病变(良性病变组)、健康体检者(健康体检组)血清中CEA、VEGF、CA19-9浓度,比较分析三者之间的异同。大肠癌组中,对不同病理类型、不同临床分期及不同部位肿瘤血清的CEA、VEGF、CA19-9情况进行统计学分析。结果大肠癌组血清CEA、VEGF、CA199浓度显著高于良性病变及健康体检组(P<0.05);3项联合监测的阳性率高于任何两项组合及单项监测(P<0.05);不同病理类型大肠癌血清中CEA、VEGF、CA19-9浓度各不相同,其中低分化腺癌和黏液腺癌以CA19-9阳性率最高,印戒细胞癌中CA724阳性率最高,高分化腺癌中CEA阳性率最高;不同部位大肠癌血清CEA、VEGF、CA19-9浓度比较无显著性差异(P>0.05);血清CEA、VEGF、CA19-9浓度与临床分期有关,临床分期越晚,浓度就越高。结论联合检测CEA、VEGF、CA19-9浓度在大肠癌的诊断率,同时在大肠癌的分期及疗效预测方面也有重要价值。

胰腺癌血清学CA19-9检测39例分析

目的 :探讨消化系统肿瘤相关抗原 (CA19 9)对胰腺癌的临床意义及实用价值。方法 :用酶联免疫吸附法 ,对 39例临床确诊的胰腺癌患者术前及术后 2个月进行血清学CA19 9跟踪检测 ,以 6 0名健康献血员作对照。结果 :胰腺癌患者的手术前、后及对照组CA19 9值分别为 48.2± 14.5u/ml、2 4.4± 9.1u/ml和 15 .7± 5 .6u/ml。其敏感性为 89.7% ,特异性 10 0 % ,术前与术后及对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :CA19 9对胰腺癌具有高度特异性 ,它不仅对胰腺癌的辅助诊断 ,而且可对高危人群的普查和筛选有重要意义 ,并可对患者术后进行有效监控。

猪流行性腹泻IgA抗体间接ELISA检测方法的建立

本实验将构建的重组表达质粒pET-32a(+)-S798转入大肠杆菌中诱导表达,获得表达量较高的包涵体蛋白。以纯化的S重组蛋白作为包被抗原,初步建立了母猪乳汁中IgA抗体的间接ELISA检测方法。抗原包被浓度为0.938ug/mL,乳汁稀释度为1:320,对反应条件进行优化,批内批间重复性试验变异系数均小于10%,与市售试剂盒相比特异性为90%、敏感性为94%、符合率为92%,本方法具有良好的特异性和敏感性,可以对猪乳汁中抗流行性腹泻病毒的IgA抗体水平进行快速检测。

血清MG7-Ag、CA19-9和IAP联合检测对胃癌的诊断价值

分别用ELISA和免疫扩散法检测 5 2例胃癌的MG7-Ag、CA19- 9和IAP含量。结果这 3种标志物诊断胃癌的敏感性分别为 48.1%、5 3.8%和 5 9.6 % ,特异性为 76 .2 %、80 .9%、71.4% ,阳性预测值为 6 2 .5 %、70 .0 %和6 3.3%。通过联合检测 ,以 3项之一为诊断依据时 ,敏感性、特异性和阳性预测值为 6 9.2 %、79.4%和 73.5 % ;以 3者同时阳性为依据时 ,敏感性、特异性和阳性预测值分别为 44 .2 %、10 0 %和 10 0 %。认为 3项指标中 ,MG7-Ag和CA19- 9特异性高 ,而IAP敏感性较高 ,联合检测对胃癌的早期诊断价值提高。

消化道肿瘤血清CA19-9的检测及其意义

消化道肿瘤血清ＣＡ１９－９的检测及其意义俞悦王萱仪姚冬明（南京医科大学第一附属医院普外科实验室，南京２１００２９）关键词消化道肿瘤；ＣＡ１９－９糖类抗原１９－９（ＣＡ１９－９）是应用抗结肠癌单克隆抗体发现的一种胃肠道碳水化合物抗原，是一种较好的肿瘤标...

消化道恶性肿瘤患者检测CA19-9及CEA的意义

目的 通过对外周血CA19-9、CEA的联合检测,了解其对消化道恶性肿瘤的诊断价值及临床意义.方法采用酶联免疫吸附法对128例消化道恶性肿瘤患者的CA19-9、CEA水平进行测定.结果 肿瘤组CA 19-9水平显著高于正常对照组(P<0.05),阳性率:结/直肠癌组16.66%,胃/贲门癌组13.28%.肿瘤组CEA水平显著高于正常对照组(P<O.001),阳性率:结/肠癌组52.38%,胃/贲门癌组38.64%.结论 CA 19-9和CEA的联合检测,可提高消化道肿瘤诊断的特异性,并对疗效观察、监测肿瘤的转移与复发有实际意义.

新型冠状病毒ELISA试剂盒灵敏度和特异度评价

探针反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法对呼吸道样品检测灵敏度有限,血清学检测新型冠状病毒抗体逐渐被用作新型冠状病毒核酸检测的辅助工具.本研究利用10名健康者、46名结核病患者及57例确诊新型冠状病毒感染者的血清,对两种新冠病毒IgM酶联免疫检测试剂盒进行评估.结果显示,北京酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒对新冠病毒检测的灵敏度和特异度达到87.7%和83.9%,检测效果较好;珠海ELISA试剂盒对新冠病毒检测的灵敏度和特异度分别为70.1%和89.2%.分析ELISA检测结果与患者发病时间发现,新冠抗体IgM的检测阳性率在发病时间超过14 d的患者群体中,高于发病时间为0~14 d的群体.实验结果证明,新型冠状病毒抗体IgM检测可用于临床新型冠状病毒的诊断,但也显示两种新型冠状病毒抗体检测酶联免疫试剂盒在灵敏度和特异度方面存在一定的差异.