circCDR1as/miR-7-5p/RAF1轴参与调控激素性股骨头坏死中的自噬

背景:自噬可能参与激素性股骨头坏死的病理过程。有研究证实环状RNA(circular RNA,circRNA)在激素性股骨头坏死中具有调控机制,然而,circCDR1as是否在激素性股骨头坏死中影响自噬尚未被研究。目的:探讨激素性股骨头坏死中自噬水平及circCDR1as的调控机制。方法:①从GSE26316数据集中获取激素性股骨头坏死及对照组大鼠的基因表达谱并进行差异表达分析,随后分析差异表达基因的生物学功能。通过数据库预测circCDR1as的靶标miRNAs及靶标基因。比较靶标基因与差异表达基因,构建circCDR1as的调控网络。②收集激素性股骨头坏死患者及健康对照人群的股骨头样本;同时应用骨髓间充质干细胞进行细胞实验:随机分为骨髓间充质干细胞组、模型组(甲泼尼龙处理)、模型+si-NC组、模型+si-CDR1as组。利用RT-qPCR检测组织和细胞circCDR1as及靶标基因的表达,Western blot检测自噬相关蛋白的表达。③构建荧光素酶报告基因载体:pmirGLO-CDR1as(WT)、pmirGLO-RAF1(WT)、pmirGLO-CDR1as(MUT)和pmirGLO-RAF1(MUT),转染到细胞中,并设miR-7-5p mimic和mimic NC组,检测circCDR1as网络的靶向调控关系。结果与结论:①大鼠激素性股骨头坏死组与对照组之间鉴定了1283个差异表达基因,主要参与细胞凋亡和自噬信号通路。预测发现circCDR1as靶向调控6个miRNAs,这些miRNAs靶向调控305个靶标基因,其中有31个靶标基因在激素性股骨头坏死中差异表达,RAF1参与自噬被选择为关键基因,并构建了circCDR1as/miR-7-5p/RAF1的调控网络。②与对照组比较,circCDR1as,RAF1和自噬水平在激素性股骨头坏死患者及激素诱导的骨髓间充质干细胞中表达上调(P<0.05),miR-7-5p表达下调(P<0.05);敲降circCDR1as后细胞自噬水平显著下降(P<0.05)。③双荧光素酶报告检测证实了circCDR1as与miR-7-5p以及miR-7-5p与RAF1的靶向调控关系。④结论:CircCDR1as/miR-7-5p/RAF1可能通过自噬信号促进激素性股骨头坏死,靶向circCDR1as是通过部分自噬修复治疗激素性股骨头坏死的潜在策略。

乳腺癌组织中环状RNA CDR1as的表达及临床意义

目的探讨环状RNA CDR1as在乳腺癌组织中的表达以及CDR1as在乳腺癌细胞中的调控作用,为乳腺癌治疗提供新靶点。方法选取江苏大学附属武进医院2022年6月至2023年6月收治的45例三阴性乳腺癌患者,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测乳腺癌组织及其癌旁正常乳腺组织中CDR1as表达情况。购入人正常乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468细胞,采用RT-qPCR检测CDR1as在乳腺正常细胞与癌细胞中的表达情况。通过体外实验验证CDR1as的环状特性,将特异性针对CDR1as的siRNA及过表达载体转入MDA-MB-231细胞,Ad-CDR1as为高表达组,shCDR1s为低表达组,Ad-CON/Si-NC为阴性对照组。并采用蛋白质印迹分析(Western-blot)法检测细胞PCNA蛋白表达水平,MTT法、CCK-8法检测细胞增殖能力的改变,Transwell实验、划痕实验检测乳腺癌细胞迁移、侵袭能力。结果CDR1as在三阴性乳腺癌患者中的表达在不同肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级及临床分期上差异有统计学意义。乳腺癌患者癌组织中CDR1as的表达高于癌旁正常组织。乳腺癌细胞系MDA-MB-231中CDR1as表达量高于MCF-10A细胞。敲低/过表达CDR1as后,CDR1as沉默后乳腺癌细胞的细胞增殖量明显减少,而CDR1as过表达促进细胞增殖,差异有统计学意义。Western-blot结果显示Ad-CDR1as组PCNA表达高于Ad-CON组,Transwell结果显示Ad-CDR1as组细胞侵袭量大于Ad-CON组,而沉默CDR1as后细胞侵袭量显著降低;划痕试验显示,Ad-CDR1as组细胞迁移能力高于Ad-CON组,而沉默CDR1as后细胞迁移能力显著减弱,差异均有统计学意义。结论CDR1as在三阴性乳腺癌患者癌组织中高表达,且与临床病理特征相关。CDR1as在三阴性乳腺癌细胞中高表达,并促进三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,CDR1as可能是治疗三阴性乳腺癌的潜在靶点。

急性心肌梗死中环状RNA CDR1as位点筛选的研究

目的 探讨PubMed筛选文献、千人基金组计划(1 000 genomes project)、Haploview软件联合应用于筛选与心肌梗死相关的单核苷酸多态性的文献的可行性。方法 使用PubMed网站检索并确定心血管疾病相关基因,1 000 genomes project网站检索中国汉族人群CDR1as基因的单核苷酸多态性(SNP)数据。应用Haploview软件以最小等位基因频率(MAF)>0.05、r2> 0.8作为筛选标签SNPs指标。结果 CDR1as基因41个SNPs位点筛选出3个检测位点,分别为rs12688274、rs5907638、rs76284232。结论 通过PubMed、千人基因组计划和Haploview联合使用可实现标签SNPs筛选,值得进一步探究。

CircCDR1as调节miR-671-5p/CBX4轴对NSCLC细胞生物学行为的影响

目的探讨环状RNA(CircRNA)反义小脑变性相关蛋白1转录本(CircCDR1as)通过调节miR-671-5p/染色盒同源物4(CBX4)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法体外培养人NSCLC细胞株(NCI-H524、NCI-H1734、Calu-3和A549)和人支气管上皮样细胞(HBE)。A549细胞分成Control组、si-NC组、si-CircCDR1as组、si-CircCDR1as+anti-miR-NC组、si-CircCDR1as+anti-miR-671-5p组、pcDNA组、CircCDR1as组、miR-NC组、miR-671-5p组、miR-671-5p+pcDNA组、miR-671-5p+CBX4组、anti-miR-NC组和anti-miR-671-5p组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CircCDR1as、miR-671-5p和CBX4 mRNA表达。Western blot检测CBX4蛋白表达。分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)、克隆形成实验、流式细胞术和Transwell检测细胞活力、增殖、凋亡、迁移和侵袭。通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-671-5p与CircCDR1as或CBX4之间的靶向关系。结果与HBE细胞相比,CircCDR1as和CBX4在4种NSCLC细胞中表达升高,miR-671-5p表达降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-CircCDR1as组A549细胞活力和克隆形成数显著降低,细胞迁移和侵袭数目减少,凋亡率增高(P<0.05)。miR-671-5p作为CircCDR1as的靶点,其下调减弱了CircCDR1as沉默对NSCLC进展的调控作用(P<0.05)。miR-671-5p靶向CBX4在体外抑制NSCLC的恶性进展(P<0.05)。沉默CircCDR1as可通过上调miR-671-5p水平降低CBX4的表达(P<0.05)。结论CircCDR1as沉默可通过上调miR-671-5p和下调CBX4表达来抑制细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。

circRNA CDR1as靶向miR-876-5p调控肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的研究环状RNA CDR1as对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法运用实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测正常肝细胞L02和肝癌细胞Huh-7、Hep-3B中CDR1as、miR-876-5p的表达;将si-NC组(转染si-NC)、si-CDR1as组(转染si-CDR1as)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-876-5p组(转染miR-876-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-876-5p组(转染anti-miR-876-5p)、si-CDR1as+miR-NC组(共转染si-CDR1as和miR-NC)、si-CDR1as+miR-876-5p组(共转染si-CDR1as和miR-876-5p mimics),均用脂质体法转染至Huh-7细胞;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测细胞的荧光活性;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长。结果与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞Huh-7、Hep-3B中CDR1as表达显著升高,miR-876-5p表达显著降低(P<0.05)。敲减CDR1as、过表达miR-876-5p均明显抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,且miR-876-5p明显负向调控野生型CDR1as细胞的荧光活性;抑制miR-876-5p逆转敲减CDR1as对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论环状RNA CDR1as可调控肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向miR-876-5p相关。

CDR1as在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨环状RNA ciR-7(CDR1as)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达及临床意义,并分析CDR1as与miR-7的相关性。方法收集2011-2013年手术切除并病理确诊为鳞状细胞癌的标本61例,同期选取病理确诊为炎症或正常黏膜的癌旁组织(距肿瘤切缘大于0.5 cm)标本48例,采用实时荧光定量PCR方法检测喉癌及癌旁组织中CDR1as、miR-7的转录表达水平。结果Real-time PCR显示,在LSCC组织中,CDR1as mRNA表达水平均显著高于癌旁组织(P<0.001);miR-7 mRNA表达水平均显著低于癌旁组织(P<0.0001);CDR1as在淋巴结转移患者的LSCC组织中表达水平较无淋巴结转移患者的LSCC组织中显著增高(P<0.01);CDR1as在不同TNM分期患者的喉癌组织中表达水平差异具有统计学意义(P<0.05);CDR1as在LSCC组织中表达水平与患者的预后相关(P=0.02);同时,CDR1as表达水平与miR-7表达呈负性相关(r=-0.643,P=0.001)。结论CDR1as参与LSCC的发生和发展,其表达可以作为判断预后的一项指标,CDR1as与miR-7呈现出的一定的相关性,CDR1as可能通过靶向调控miR-7的表达影响喉癌进展。

上调Cdr1as表达对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨上调小脑变性相关蛋白1的反义转录物(Cdr1as)表达对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空载体组和Cdr1as组,每组10只。模型组、空载体组和Cdr1as组采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型;术前12 h分别心肌内注射生理盐水、pc DNA和pc DNA-Cdr1as溶液。术后1周,心脏彩超检测大鼠心脏功能;然后取心肌组织,TTC染色法检测心肌梗死面积,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,比色法检测Caspase-3活性,qRT-PCR检测Cdr1as表达水平,Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白。结果:与假手术组相比,模型组、空载体组和Cdr1as组心肌组织中Cdr1as表达水平、心肌细胞凋亡指数、Caspase-3活性、Bax蛋白表达水平以及左室长轴缩短分数、左室射血分数均升高,而左室收缩末期内径、左室舒张末期内径、心肌组织中Bcl-2蛋白表达水平均降低(P <0. 05); Cdr1as组上述指标变化更显著(P <0. 05)。Cdr1as组心肌梗死面积大于模型组和空载体组(P <0. 05)。结论:Cdr1as可能通过间接调控Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达,诱导心肌细胞凋亡,促进心肌梗死。

糖尿病合并急性心肌梗死病人血清环状RNA-CDR1as表达及其临床价值分析

目的探讨环状RNA-CDR1as(circRNA-CDR1as)在糖尿病合并急性心肌梗死病人中的表达情况,并分析其早期诊断价值、疗效评估价值及近期预后预测价值。方法选取2014年10月-2018年10月锦州市中心医院收治的175例AMI病人作为研究对象,根据口服葡萄糖耐量试验(OGTT)分为糖尿病合并急性心肌梗死(DM-AMI)组80例、糖耐量异常合并急性心肌梗死(IGT-AMI)组55例和糖耐量正常合并急性心肌梗死(NGT-AMI)组40例。同期50名健康体检者作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测4组血清circRNA-CDR1as水平;根据临床特征及实验室数据计算病人全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分,并记录住院期间病人预后情况。采用ROC曲线分析血清circRNA-CDR1as对糖尿病合并急性心肌梗死的诊断价值;比较DM-AMI组、IGT-AMI组、NGT-AMI组治疗前后血清circRNA-CDR1as水平;比较生存和死亡病人血清circRNA-CDR1as水平和GRACE评分差异;采用Spearman法分析circRNA-CDR1as与GRACE评分的相关性。结果DM-AMI组、IGT-AMI组、NGT-AMI组和健康对照组血清circRNA-CDR1as分别为4.98±1.56、4.57±1.28、2.81±0.69和1.02±0.25,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),由高到低依次为DM-AMI组、IGT-AMI组、NGT-AMI组和健康对照组。绘制ROC曲线,曲线下面积为0.819(95%CI 0.694~0.998,P<0.05),截断值为3.28,敏感度和特异度分别为98.3%和60.0%。治疗后DM-AMI组、IGT-AMI组和NGT-AMI组血清circRNA-CDR1as均较治疗前明显降低(P<0.05),3组血清circRNA-CDR1as治疗前后差值比较差异有统计学意义(P<0.05),由大到小依次为DM-AMI组、IGT-AMI组和NGT-AMI组。住院期间,175例AMI病人中35例死亡,140例生存;与生存病人比较,死亡病人血清circRNA-CDR1as水平明显升高,且GRACE评分中高危占比大,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Spearman法分析显示,血清circRNA-CDR1as水平与GRACE评分分组呈正相关(r=0.729,P<0.05)。结论AMI病人血清circRNA-CDR1as水平明显升高,糖耐量不同其表达各不相同,有望成为糖尿病合并急性心肌梗死病人早期诊断、疗效评估及住院期间死亡预测的有效指标。

环状RNA CDR1as促进小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化和成血管相关基因表达

目的 探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1的反义转录物(antisense to the cerebellar degeneration-related protein 1 transcript,CDR1as)在Balb/C小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对其成骨和成血管相关基因的影响。方法 体外培养及鉴定BMSCs,将含过表达与沉默circRNA CDR1as基因的慢病毒(lentiviruses,LV)载体及对照组慢病毒分别转染至小鼠BMSCs并筛选稳定的细胞株,分为circRNA CDR1as过表达组、过表达对照组、circRNA CDR1as低表达组和低表达对照组。各组成骨诱导14、21 d后分别进行茜素红染色和碱性磷酸酶染色;qRT-PCR检测目的基因circRNA CDR1as、成骨分化特异标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关基因2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥素(osteopontin,OPN)、锌指结构转录因子(osterix,OSX)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-I,COL-1),以及成血管特异标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的mRNA表达水平。结果 茜素红和ALP染色均显示:过表达实验组钙沉淀和ALP染色区域多于过表达对照组;而低表达实验组钙沉淀和ALP染色区域少于低表达对照组,随着成骨诱导天数的增加,各组的钙沉淀和ALP染色面积也增大。qRT-PCR结果显示:过表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的mRNA表达水平显著升高(P<0.001);低表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的m RNA表达水平显著降低(P<0.001)。结论 过表达circRNA CDR1as基因可促进BMSCs的成骨分化及血管生成的能力;低表达circRNA CDR1as基因可抑制BMSCs的成骨分化及血管生成的能力。

环状RNA CDR1as与miR-7在癫痫患者血浆中的表达及与脑电图异常的关系分析

目的探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as)与微小RNA-7(miR-7)在癫痫患者血浆中的表达及与脑电图异常的关系。方法选取2016年12月—2019年12月在新乡医学院第二附属医院门诊及住院的癫痫患者87例为观察组,并根据脑电图结果分为正常组(6例)、轻度异常组(18例)、中度异常组(37例)及重度异常组(26例);选取同期健康体检者90例为对照组。实时荧光定量PCR(qPCR)法检测血浆CDR1as、miR-7水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血浆白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β水平;Pearson法分析癫痫患者血浆CDR1as、miR-7水平与IL-2、TNF-α和IL-1β水平的相关性。结果对照组、正常组、轻度异常组、中度异常组、重度异常组血浆CDR1as、IL-2、TNF-α和IL-1β水平总体呈升高变化,miR-7水平总体呈降低变化,差异均有统计学意义(P<0.05)。癫痫患者血浆CDR1as水平与IL-2、TNF-α和IL-1β水平呈正相关(P<0.05),miR-7水平与IL-2、TNF-α和IL-1β水平呈负相关(P<0.05)。结论CDR1as、miR-7在癫痫患者血浆中分别呈高表达、低表达,与炎症因子水平、脑电图异常程度密切相关,可能通过影响炎症反应引起脑部异常放电。

通过pR1aS导肽提高植物中绿色荧光蛋白的激发强度

绿色荧光蛋白在植物细胞胞质表达中对转化植物细胞的再生存在不利的影响,为增强绿色荧光蛋白在植物细胞中的表达,在mgfp的5'端连接了pR1aS信号肽序列,同时在3'末端引入滞留在内质网中的特异序列KDEL,成功构建了植物表达载体pBLG-pR1aS-gfp,经转基因烟草表达分析,结果表明:转化体植株显著增加了绿色荧光蛋白在烟草中的表达,同时消除了绿色荧光蛋白对植物潜在的光毒害。这为植物转基因转化频率的研究和转基因植物安全性评价提供了一种有利的工具。

环状RNA CDR1as:恶性肿瘤的新型调控因子

环状RNA(circRNA)是一类闭合环状结构的新型非编码RNA,广泛分布于各种组织中。与传统的线性RNA相比,circRNA不具有5′-和3′-末端,不会轻易被核酸外切酶降解,能够稳定存在于多种体液且进化保守,目前已成为临床非编码RNA的重点研究对象。恶性肿瘤具有发现晚、进展快、易复发等特点,目前尚缺乏有效的治疗方式,其发病率和死亡率一直居高不下。如何对其进行早期诊断、治疗干预以及预后评估,是当代医学研究的重点和热点之一。CDR1as是研究最为广泛的circRNA。它能够通过海绵微RNA(miRNA)或直接结合RNA结合蛋白(RBP),调控其下游基因的表达,激活相关信号通路,从而促进或抑制肿瘤的进展,甚至影响肿瘤的化疗敏感性。CDR1as主要存在于细胞质中,通常在疾病发生的早期即可释放入血。因此,CDR1as可能成为恶性肿瘤早期诊断的生物标志物或者治疗干预的理想靶标。本文以circRNA的特征及生物学功能为基础,对CDR1as在恶性肿瘤发生发展中的表达水平、作用机制及其相关信号通路等作一综述。同时,对CDR1as目前的研究概况进行了分析,对其未来应用于临床可能面临的问题进行初步了归纳,并对CDR1as未来的研究方向提出设想和建议。

环状RNA CDR1as在小鼠巨噬细胞泡沫化中的作用机制

目的研究环状RNA CDR1as在小鼠巨噬细胞泡沫化中的表达水平及其作用机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,分为对照组和不同浓度氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导组,分别用完全培养基和25、50、100μg/mL的ox-LDL对RAW264.7细胞进行诱导。采用油红O染色观察细胞内脂质情况,实时荧光定量PCR检测细胞内CDR1as和miR-7a-5p的表达情况。结果与对照组比较,ox-LDL诱导组细胞内脂质增多,泡沫化程度随诱导浓度的升高而加重,差异有统计学意义(P<0.05)。CDR1as的表达水平随ox-LDL诱导浓度的升高而降低,而miR-7a-5p的表达水平随ox-LDL诱导浓度的升高而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞泡沫化中CDR1as与miR-7a-5p表达水平具有相关性(R2=0.7879,P<0.01)。结论CDR1as表达水平在ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化进程中逐渐降低,可能通过海绵miR-7a-5p来调节巨噬细胞源性泡沫细胞的行为,进而影响动脉粥样硬化的发展。

CDR1as在喉鳞状细胞癌中的作用机制研究

目的:探讨小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的作用及其可能机制。方法:将Hep-2和AMC-HN-8细胞系按不同处理方法分组,CCK-8法检测各组细胞的增殖,Transwell实验观察细胞迁徙和侵袭能力,实时定量PCR法检测CDR1as、微RNA-7(miR-7)和细胞周期蛋白E1(CCNE1)、磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基δ(PIK3CD)的表达。结果:PCR检测显示Hep-2和AMCHN-8细胞过表达和敲除CDR1as基因模型构建成功。过表达CDR1as的两种细胞系细胞增殖明显,迁徙和侵袭能力增强;敲除CDR1as的两种细胞系细胞凋亡增加,迁徙和侵袭能力下降。两种细胞系过表达CDR1as后miR-7表达下调、CCNE1和PIK3CD表达上调,而过表达miR-7可抵消上述作用。结论:CDR1as通过上调靶基因miR-7表达而促进LSCC的发生、发展和转移。

MPP^(+)对N2a细胞中CDR1as基因表达的影响

目的探讨1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))对N2a细胞中环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as)基因表达的影响。方法常规培养N2a神经母细胞瘤细胞,给予100μmol/L的MPP^(+)分别处理3、6、9和12 h。采用实时荧光定量PCR检测CDR1as基因的表达。结果与用基础培养液处理的对照组相比,经MPP^(+)处理3、6、9和12 h的N2a细胞CDR1as基因表达明显降低(F=10.010,q=7.003~8.609,P<0.05)。结论MPP^(+)能诱导N2a细胞中CDR1as基因的表达显著降低,提示CDR1as基因可能参与帕金森病的发病。

ET-1AS-ODN对糖尿病大鼠心肌重构效应的保护作用

目的探讨内皮素-1反义脱氧寡核苷酸(ET-1AS-ODN)对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌重构效应的保护作用及其机制。方法一次性腹腔注射STZ(60mg.kg-1),建立大鼠糖尿病模型,并观察ET-1AS-ODN预防性给药对大鼠糖尿病心肌重构效应的保护作用。结果实验动物饲养5周后,与生理盐水对照(NC)组相比,糖尿病模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),心肌细胞重构明显,表明糖尿病心肌病变(diabetic cardiomyopathy,DC)模型已构建;与DC组比较,ET-1AS-ODN各治疗组心脏指数和心室指数均减小;大鼠心肌VG染色观察仅见心肌细胞间有少量胶原纤维沉积,但大部分心肌纤维结构完整,横纹清楚。结论内皮素-1反义寡核苷酸可减轻STZ诱导的糖尿病大鼠的心肌重构效应,对心肌组织具有保护作用。其机制可能与ET-1 AS-ODN降低糖尿病大鼠内源性ET水平,减少胶原合成,从而改善心肌重构效应有关。

分子束外延生长掺铒GaAs和GaA1As的1.54ηm室温电致发光

用分子束外延法生长了掺饵GaAs和GaAlAs双异质结发光二极管.这两种器件在温度为300K时呈现1.54μm电致发光.注入电流低到0.8mA/Cm^2时,所检测到的GaAlAs:Er的光谱线比GaAs:Er的要窄得多.同时还发现,温度300K时外量子效率为10^(-6)。本文还提供了有关从注入载流子到稀土能量传递的初始数据。

外周血环状RNA CDR1as在动脉粥样硬化中的诊断价值

目的探讨外周血单个核细胞中环状RNA CDR1as在动脉粥样硬化(AS)患者中的表达差异及可能的临床意义。方法选取2020年9月至2021年1月牡丹江医学院附属红旗医院就诊的20例AS患者作为研究对象,另选同期就诊的20名健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组外周血单个核细胞中CDR1as的表达水平,并建立受试者工作特征曲线,评估CDR1as对AS的诊断价值。结果CDR1as在AS患者组外周血中的表达水平低于健康组,差异有统计学意义(P<0.01)。CDR1as对AS诊断性能的曲线下面积为0.827(P<0.05),灵敏度和特异度分别为70%和85%。结论环状RNA CDR1as在AS患者外周血中的表达水平明显低于健康人,外周血中CDR1as表达水平对AS具有一定诊断价值,可能成为AS的新型分子标志物。

磷酸胆碱聚合物MPC_(30)-DEA_(70)负载转化生长因子β1AS-ODN转染心肌细胞

背景:目前反义寡核苷酸的基因治疗已经拥有良好的应用前景,但是反义寡核苷酸的相对分子质量小却不容易入细胞并且易被核酸酶降解,能否有效地穿过细胞膜且不被核酸酶降解从而与目的基因结合发挥作用,因此人们一直致力于理想载体的选择、基因转移效率的增加和转移特异性等研究。目的:探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70能否有效地负载转化生长因子β1反义寡核苷酸(AS-ODN)进入心肌细胞,并观察其对该基因胞内生物表达的影响。方法:按不同N/P电荷比值将载体MPC30-DEA70与转化生长因子β1 AS-ODN络合成形成基因复合物并且对其总电性进行表征;采用MTT法检测MPC30-DEA70与心肌细胞的生物相容性;共聚焦激光扫描显微镜观察MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN在细胞内的分布和定位;应用流式细胞仪检测MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN(FAM标记)的细胞转染效率和荧光强度;Western blot、RT-PCR法检测转化生长因子β1细胞内表达水平。结果与结论:MPC30-DEA70与心肌细胞具有较好的细胞相容性,在较高质量浓度(>20 mg/L)下才表现出一定的细胞毒性并呈剂量依赖;MPC30-DEA70/TGF-β1AS-ODN复合物对心肌细胞具有较高的转染效率,并且能够携带转化生长因子β1 AS-ODN进入细胞后下调转化生长因子β1 m RNA和蛋白的表达。新型阳离子磷酸胆碱基聚合物MPC30-DEA70可以有效负载和运输转化生长因子。