靶向人Ⅰ型胶原蛋白α1链分子的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的构建靶向人Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)分子的shRNA真核表达载体并检测其对靶分子的干扰效应。方法根据靶分子COL1A1基因序列,设计、合成编码其shRNA的互补寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSilencerTM2.1-U6 neo载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,RT-PCR及Western blot法检测其对靶分子COL1A1表达的影响。结果酶切及DNA测序证实重组质粒pshRNA-COL1A1序列正确。与对照组比较,重组表达质粒pshRNA-COL1A1-1和pshRNA-COL1A1-2在mRNA和蛋白水平均能显著抑制COL1A1基因的表达(P<0.05),抑制率分别为(44.41%±3.90%,63.05%±3.13%)及(45.50%±2.71%,66.98%±2.08%)。结论成功构建靶向人乳腺癌MDA-MB-231细胞COL1A1基因的shRNA真核表达载体。

Preparation, Characterization and Crystal Structure Determination of (C_6H_(14)N)_5(V_5O_(15))

A 1D chain-like organic/inorganic composite material with polyoxovanadates serving as building blocks has been synthesized by the reaction of cyclohexylamine with vana- dium pentoxide, and characterized by IR, UV spectra and TG-DTA technique. The title compound (C30H70N5O15V5, Mr = 995.61) crystallizes in orthorhombic, space group P212121 with a = 6.0093(12), b = 26.780(5), c = 27.979(6) ? V = 4502.6(16) 3, Z = 4, Dc = 1.461 g/cm3, F(000) = 2060, = 1.063 mm-1, R = 0.0651 and wR = 0.1084 for 3426 observed reflections (I > 2(I)). Single-crystal X-ray structural analysis indicates that the title compound consists of five proto- nated cyclohexylamine molecules and a polyoxovanadate anion of V5O155-. In addition, the results of IR spectra and single-crystal X-ray diffraction exhibit that there exists comparatively stronger interaction between the organic groups and polyoxovanadate anion in solid state. Adjacent structure units are bridged through corner-sharing oxygen atoms of VO4 tetrahedra to construct a novel one-dimensional zigzag infinite linear chain arrangement. The curves of TG- DTA elucidate that the process of weight loss of the title compound is divided into two stages, and also reveal that the framework of polyoxovanadate anion decomposes at 473.0 ℃.

双吡啶酰腙Schiff碱Hg(Ⅱ)/Cd(Ⅱ)配合物的合成及其对甲醇蒸气的吸附

合成了双吡啶酰腙Schiff碱配体(L),并采用核磁共振氢谱、质谱、红外光谱和元素分析等手段对其结构进行了表征。进一步采用溶剂挥发法合成了2个配合物{[Cd(L)2Cl2]·2DMF·6H2O}n(1)和[Hg(L)Cl2]n(2)。通过X射线单晶衍射技术测定了配体及2个配合物的单晶结构,并对配合物的热稳定性及其在常温下对甲醇蒸气的吸附进行了考察。实验结果表明,2个配合物均为1D配位聚合物,配合物1对甲醇蒸气有较好的吸附能力。

联合检测血清X型胶原α1链和ⅡA型前胶原氨基端肽在骨关节炎早期诊断中的意义

目的评价联合检测血清Ⅹ型胶原α1链（COL10A1）和血清ⅡA型前胶原氨基端肽（PⅡANP）在骨关节炎早期诊断中的价值。 方法所收集89例膝骨关节炎（KOA）患者均为2014年9月至2016年4月在新疆医科大学第一附属医院关节外科门诊就诊和住院患者，采集清晨空腹血5 ml，依据影像学Kellgren-Lawrence（K-L）分级评分系统进行病情严重程度分级，Ⅰ级20例，Ⅱ级25例，Ⅲ级23例，Ⅳ级21例，正常对照组23例，所有血清标本应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测COL10A1和PⅡANP浓度。 结果人血清COL10A1水平在KOA组[（1.30±0.65） ng/ml]明显高于正常对照组[（0.46±0.15） ng/ml]，差异有统计学意义（P＝0.000），对照组血清PⅡANP水平[（23.88±4.68） ng/ml]明显高于KOA组[（13.22±4.74） ng/ml]，差异有统计学意义（P＝0.000），血清COL10A1在KOA-Ⅱ级组[（1.84±0.44） ng/ml]和Ⅲ级组水平[（1.68±0.47） ng/ml]最高，与正常对照组[（0.46±0.15） ng/ml]比较差异均有统计学意义（P＝0.000），血清PⅡANP水平在KOA各亚组随着K-L分级等级依次降低，Ⅰ级组[（19.37±3.01） ng/ml]〉Ⅱ级组[（13.14±2.68） ng/ml]〉Ⅲ级组[（11.41±3.32） ng/ml]〉Ⅳ级组[（9.44±3.58） ng/ml]，且与正常对照组[（23.88±4.68） ng/ml]比较差异均有统计学意义（P＝0.001、0.000、0.000、0.000）。 结论骨关节炎患者血清COL10A1水平较正常对照组高，而PⅡANP水平较正常对照组低，因此联合检测血清生物学标志物COL10A1和PⅡANP有望成为KOA早期诊断的一种有效方法。