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1PPS接口时间同步性能测试方法探讨 被引量:2
1
作者 徐一军 胡昌军 汪建华 《电信网技术》 2010年第10期1-5,共5页
介绍了时间间隔测试基本原理,结合两类测试仪表对测试用例进行了分析,并就搭建测试系统提出了建议。
关键词 1pps 时间同步 时间间隔测量
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基于FPGA和DSP的北斗1PPS授时系统的设计与实现 被引量:3
2
作者 陈芬芬 《黑龙江科技信息》 2008年第36期77-77,共1页
高精度秒脉冲授时信号对现代科技有深远的意义,提出一种基于FPGA和DSP的算法实现在弱电磁环境下精确的北斗授时秒信号,给出了FPGA硬件算法、在Modelsim平台下的仿真结果和在DSP上进行修正的方法,并在基于FPGA+DSP的接收机上实现对星测试... 高精度秒脉冲授时信号对现代科技有深远的意义,提出一种基于FPGA和DSP的算法实现在弱电磁环境下精确的北斗授时秒信号,给出了FPGA硬件算法、在Modelsim平台下的仿真结果和在DSP上进行修正的方法,并在基于FPGA+DSP的接收机上实现对星测试,结果为在输入时钟频率准确度≤1×10-6的条件下,秒信号1PPS(Pulse Per Second)输出的准确度为与标准GPS时间信号源的时间间隔≤1000ns,满足大部分情况下授时需求。 展开更多
关键词 授时 1pps 北斗卫星
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车载T-Box 1PPS输出电路设计
3
作者 常君 叶丹 隋瑶 《汽车电器》 2022年第8期54-55,共2页
为了满足车载设备对高精度时钟信号的需求,保证授时秒脉冲(1PPS信号)在车载环境下不同设备之间能够稳定、可靠地传输,需要将传输信号进行变换和处理,同时对输出电路接口也要采取一定的防护措施,因此本文提出一种精简车载T-Box 1PPS输出... 为了满足车载设备对高精度时钟信号的需求,保证授时秒脉冲(1PPS信号)在车载环境下不同设备之间能够稳定、可靠地传输,需要将传输信号进行变换和处理,同时对输出电路接口也要采取一定的防护措施,因此本文提出一种精简车载T-Box 1PPS输出电路,详细分析其原理和执行过程,并且运用到实际产品中并通过验证,从而实现了在车载环境下不同设备之间低延时、高可靠性传输的目的。 展开更多
关键词 1pps 车载T-Box 时钟同步
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A frequency servo SoC with output power stabilization loop technology for miniaturized atomic clocks 被引量:1
4
作者 Hongyang Zhang Xinlin Geng +3 位作者 Zonglin Ye Kailei Wang Qian Xie Zheng Wang 《Journal of Semiconductors》 EI CAS CSCD 2024年第6期13-22,共10页
A frequency servo system-on-chip(FS-SoC)featuring output power stabilization technology is introduced in this study for high-precision and miniaturized cesium(Cs)atomic clocks.The proposed power stabilization loop(PSL... A frequency servo system-on-chip(FS-SoC)featuring output power stabilization technology is introduced in this study for high-precision and miniaturized cesium(Cs)atomic clocks.The proposed power stabilization loop(PSL)technique,incorporating an off-chip power detector(PD),ensures that the output power of the FS-SoC remains stable,mitigating the impact of power fluctuations on the atomic clock's stability.Additionally,a one-pulse-per-second(1PPS)is employed to syn-chronize the clock with GPS.Fabricated using 65 nm CMOS technology,the measured phase noise of the FS-SoC stands at-69.5 dBc/Hz@100 Hz offset and-83.9 dBc/Hz@1 kHz offset,accompanied by a power dissipation of 19.7 mW.The Cs atomic clock employing the proposed FS-SoC and PSL obtains an Allan deviation of 1.7×10^(-11) with 1-s averaging time. 展开更多
关键词 CMOS technology atomic clock phase-locked loop output power stabilization 1pps
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基于北斗的高精度时钟设备检测系统
5
作者 张丽萍 贺星 +1 位作者 王晓晨 李晨航 《现代导航》 2024年第1期39-44,共6页
描述了一种基于北斗的高精度时钟设备检测系统。该系统利用北斗接收机对内置铷钟进行实时驯服和校正,作为系统时频基准,通过直接数字式频率合成器技术产生各模块所需的时频源,再分别经过信号调制和调理输出所需的最终信号(各种频率信号... 描述了一种基于北斗的高精度时钟设备检测系统。该系统利用北斗接收机对内置铷钟进行实时驯服和校正,作为系统时频基准,通过直接数字式频率合成器技术产生各模块所需的时频源,再分别经过信号调制和调理输出所需的最终信号(各种频率信号和E1信号)。同时,系统对正弦波、方波和三角波波形调理,采用多周期多相位同步方法实现各种频率信号的测量;并通过FPGA实现多种时频信号的测试,包括B码信号、精密时间协议(PTP)信号、网络时间协议(NTP)信号和秒脉冲+对天时间(1PPS+TOD)信号。 展开更多
关键词 北斗 B码 PTP NTP 1pps+TOD 时频信号
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基于GNSS和ZYNQ的恒温晶振驯服装置研究
6
作者 杨业泉 张浩 冯文杰 《长江信息通信》 2024年第3期130-132,137,共4页
为了提高恒温晶振频率的准确度和稳定度,设计了基于ZYNQ技术的GNSS驯服恒温晶振频标装置。在ZYNQ的PL端采用粗测量加细测量的方法测量时间,PS端使用奇异值剔除与滤波算法对测量数据进行处理,实现恒温晶振频率的驯服和时间跟踪。采用模... 为了提高恒温晶振频率的准确度和稳定度,设计了基于ZYNQ技术的GNSS驯服恒温晶振频标装置。在ZYNQ的PL端采用粗测量加细测量的方法测量时间,PS端使用奇异值剔除与滤波算法对测量数据进行处理,实现恒温晶振频率的驯服和时间跟踪。采用模块化设计和编程,提高了装置的通用性和可移植性。通过实验测试,对恒温晶振驯服前后的数据进行多次比对,结果表明其平均频率准确度达到1.09×10^(-12),频率稳定度达到8.56×10^(-12),其稳定度提升了两个数量级。 展开更多
关键词 ZYNQ GNSS驯服 时间测量 恒温晶振 1pps
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PP1A与GSDME介导的结直肠癌细胞焦亡的临床意义
7
作者 司航 王娜娜 +3 位作者 常文丽 刘素素 石文雅 张骞 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期580-586,591,共8页
目的检测PP1A与GSDME在结直肠癌组织中的表达与CD8^(+)T淋巴细胞丰度,探讨PP1A与GSDME介导焦亡的相关性和临床意义。方法应用GEPIA数据库分析PP1A与GSDME在结直肠癌组织与正常组织中mRNA的表达。采用Western blot法检测结直肠癌组织与... 目的检测PP1A与GSDME在结直肠癌组织中的表达与CD8^(+)T淋巴细胞丰度,探讨PP1A与GSDME介导焦亡的相关性和临床意义。方法应用GEPIA数据库分析PP1A与GSDME在结直肠癌组织与正常组织中mRNA的表达。采用Western blot法检测结直肠癌组织与对应癌旁正常黏膜中PP1A蛋白表达水平,运用免疫组化法检测107例结直肠癌与癌旁正常黏膜中PP1A、GSDME蛋白的表达和CD8^(+)T淋巴细胞丰度。利用Spearman等级相关性分析PP1A、GSDME和CD8^(+)T淋巴细胞丰度的相关性。结果GEPIA数据库检索显示,PP1A与GSDME的mRNA在结直肠癌组织和正常组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,结直肠癌组织中PP1A相对表达量明显高于癌旁组织(0.937 vs 0.643,P<0.001)。免疫组化结果显示,结直肠癌组织中PP1A的表达明显高于正常黏膜,而GSDME的表达明显低于正常黏膜(P<0.05),GSDME表达与结直肠癌患者年龄、临床分期和错配修复蛋白密切相关(P<0.05);CD8^(+)T细胞在癌浸润前沿的分布明显高于癌旁正常黏膜,且CD8^(+)T细胞在癌组织中的分布与pT分期、临床分期及淋巴结转移相关。Spearman相关性分析显示,PP1A与GSDME表达呈负相关(r=-0.196,P<0.05)。PP1A阳性结直肠癌患者的总生存期低于PP1A阴性患者(P<0.05),患者预后与分化程度、淋巴结转移、pT分期和临床分期相关。PP1A表达、肿瘤分化程度、临床分期、pT分期和淋巴结转移均是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素。结论PP1A在结直肠癌中高表达,与GSDME介导的细胞焦亡呈负相关,两者表达差异性与结直肠癌的发生、发展及预后均密切相关,可作为判断结直肠癌患者预后的潜在指标,CD8^(+)T细胞的差异性分布可能与GSDME介导的细胞焦亡及肿瘤的发展相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 PP1A GSDME 细胞焦亡 CD8^(+)T淋巴细胞 预后
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PP1A在肿瘤发生发展过程中的作用及研究进展
8
作者 司航 王娜娜 +1 位作者 刘素素 张骞 《国际医药卫生导报》 2023年第23期3336-3340,共5页
蛋白磷酸酶是一组在人类细胞中广泛存在并催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子。而磷酸蛋白磷酸酶催化亚基超家族是一组主要使丝氨酸/苏氨酸残基去磷酸化的蛋白磷酸酶,其中蛋白磷酸酶1(protein phosphatase-1,PP1)... 蛋白磷酸酶是一组在人类细胞中广泛存在并催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子。而磷酸蛋白磷酸酶催化亚基超家族是一组主要使丝氨酸/苏氨酸残基去磷酸化的蛋白磷酸酶,其中蛋白磷酸酶1(protein phosphatase-1,PP1)参与了真核生物大部分的去磷酸化反应,并参与调节多种生物活动。由PPP1CA基因编码的PP1催化亚基α(catalytic subunit alpha of protein phosphatase-1,PP1A)是修饰PP1最重要的一种亚型,在多种肿瘤生存和转移中起着重要作用,但其在肿瘤中也会表现出抑制作用,这使其可能成为肿瘤治疗的新靶标。因此,本文旨在对PP1A在多种肿瘤中关键作用进行综述,并针对其作为肿瘤治疗的新靶标潜力进行评价。 展开更多
关键词 蛋白磷酸酶 PP1A PPP1CA 癌症 进展
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模数与模式变化适应性初探:PREVI实验住宅再认识
9
作者 易智丽 吴国源 《住区》 2023年第3期118-125,共8页
通过强调PREVI实验竞赛在历史维度内的角色重要性,进而突出其变化适应性主题的历史意义。根据PREVI针对的问题及群体,将关注点集中到PP1试点项目及其设计要求和结果。其中,对两个最具争议性方案的设计方法——Ohl的模数与C·亚历山... 通过强调PREVI实验竞赛在历史维度内的角色重要性,进而突出其变化适应性主题的历史意义。根据PREVI针对的问题及群体,将关注点集中到PP1试点项目及其设计要求和结果。其中,对两个最具争议性方案的设计方法——Ohl的模数与C·亚历山大的模式语言的共性与区别展开重点讨论。对PREVI的再关注试图为低成本住宅设计提供理论与实例上的当代参考策略。 展开更多
关键词 PREVI(PP1) 模数 模式语言 变化适应性 秘鲁利马 实验住宅
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GPS/INS组合导航系统时间同步系统设计 被引量:20
10
作者 李倩 战兴群 +1 位作者 王立端 翟传润 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1752-1756,共5页
为了说明高动态环境中时间同步对于组合导航系统的重要性,在Kalman滤波方程的基础上,推导了时间同步误差与Kalman滤波结果之间的定性关系。提出一种利用GPS接收机中1PPS(Pulse Per Second)信号作为同步标签的时间同步方法,将IMU中的数... 为了说明高动态环境中时间同步对于组合导航系统的重要性,在Kalman滤波方程的基础上,推导了时间同步误差与Kalman滤波结果之间的定性关系。提出一种利用GPS接收机中1PPS(Pulse Per Second)信号作为同步标签的时间同步方法,将IMU中的数据加上精确的时间标签,从而达到时间同步的目的。全部时间同步功能由FPGA实现,利用Verilog HDL语言进行开发,整体硬件结构简单而且适用范围广。试验结果显示了这种时间同步设计可以明显减小滤波结果的估计误差,有效的提高了组合导航系统的定位精度。 展开更多
关键词 GPS/INS 时间同步 KALMAN滤波 FPGA 1pps
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VVER1000反应堆汽水失配工况运行研究
11
作者 王兵 《中国设备工程》 2023年第S02期18-20,共3页
为了汽水失配在不同瞬态工况下满足设计功能,优化汽水失配逻辑,使反应堆产生并传递到蒸汽发生器的能量与二回路给水能够带走的能量之间的匹配。本研究采用一、二回路热力平衡模型,通过计算得到不同瞬态工况下汽水失配保护引入的时机,并... 为了汽水失配在不同瞬态工况下满足设计功能,优化汽水失配逻辑,使反应堆产生并传递到蒸汽发生器的能量与二回路给水能够带走的能量之间的匹配。本研究采用一、二回路热力平衡模型,通过计算得到不同瞬态工况下汽水失配保护引入的时机,并对各种工况进行动态实验。研究结果表明,预测引入汽水失配保护的时机与动态试验结果较好地符合。因此,本研究能够实现在各种瞬态工况下,通过汽水失配逻辑触发第一类预保护(PP1)或快速预保护(APP),通过降低反应堆的功率来恢复汽水平衡,进而保证蒸汽发生器液位和反应堆的安全,避免更严重事故的发生。 展开更多
关键词 汽水失配 PP1 APP
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IRIG-B(DC)码在光纤高精度授时设备中的应用 被引量:3
12
作者 杨君刚 王超 王凯 《光通信技术》 北大核心 2016年第3期29-32,共4页
为了实现光纤授时设备输入/输出标准IRIG_B(DC)码,提出了一种基于FPGA的IRIG-B(DC)编解码设计方案。通过Quartus II建立工程文件,采用Verilog HDL语言设计了B(DC)码编解码电路,解决了传统设计中B码准秒时刻对齐和1PPS恢复的问题。
关键词 IRIG-B(DC) FPGA VERILOG HDL 1pps
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基于FPGA的低功耗无缆地震仪校钟系统 被引量:3
13
作者 李君辉 陈祖斌 +2 位作者 申茂冬 朱亚东洋 庞广华 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2014年第11期30-33,共4页
为了降低当前无缆地震仪的功耗,并且提高其同步采集的精度,文中采用定时开启GPS,利用GPS输出的1 PPS脉冲校准采集站内置32.768 MHz恒温晶振,将校正输出的秒分频信号作为无缆地震仪采集站的同步时标。同时,利用GPS接收机输出的UTC信息校... 为了降低当前无缆地震仪的功耗,并且提高其同步采集的精度,文中采用定时开启GPS,利用GPS输出的1 PPS脉冲校准采集站内置32.768 MHz恒温晶振,将校正输出的秒分频信号作为无缆地震仪采集站的同步时标。同时,利用GPS接收机输出的UTC信息校正采集站内部时钟,从而达到低功耗校钟的目的。 展开更多
关键词 FPGA 定时校钟 低功耗 GPS 1pps
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高精度GPS时间信息的研究与应用 被引量:2
14
作者 强成虎 李铮 +1 位作者 郑铮 王希东 《国外电子测量技术》 2007年第3期68-70,共3页
本文介绍了GPS系统传递高精度时间信息的技术原理,提出了用GPS时间信息锁定高稳定度晶体振荡器的方法,建立了Kalman滤波模型,在GPS信号失效时通过滤波估计保持晶振正常输出。通过性能指标测量、分析,结果验证了GPS晶体频率标准具备较高... 本文介绍了GPS系统传递高精度时间信息的技术原理,提出了用GPS时间信息锁定高稳定度晶体振荡器的方法,建立了Kalman滤波模型,在GPS信号失效时通过滤波估计保持晶振正常输出。通过性能指标测量、分析,结果验证了GPS晶体频率标准具备较高的频率准确度和稳定性,能够用于时间频率的测量基准。 展开更多
关键词 GPS系统 高精度GPS时间信息 1pps 伺服 KALMAN滤波
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时频系统数字锁相技术研究 被引量:2
15
作者 王鹏宇 杨志刚 郑丽丽 《宇航计测技术》 CSCD 2019年第5期44-50,共7页
为了利用外部1PPS信号或10MHz频率信号驯服铷钟或晶振,本文推导建立了数字二阶/三阶锁相环频标模块的仿真模型,对模型中的锁相环、鉴相器量化、DA位数、定点运算、环路更新频率对相位噪声性能的影响等关键问题进行了分析,给出了参数设... 为了利用外部1PPS信号或10MHz频率信号驯服铷钟或晶振,本文推导建立了数字二阶/三阶锁相环频标模块的仿真模型,对模型中的锁相环、鉴相器量化、DA位数、定点运算、环路更新频率对相位噪声性能的影响等关键问题进行了分析,给出了参数设置依据及仿真结果,完成了频标模块的硬件设计,验证了模型的正确性。 展开更多
关键词 数字锁相环 秒脉冲(1pps) 频率准确度 频率稳定度
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BD2无源授时原理分析与测试
16
作者 翟昆朋 何文涛 +1 位作者 徐建华 叶甜春 《电子技术应用》 北大核心 2013年第5期32-34,共3页
从卫星系统的授时原理、授时精度评估、接收机1PPS授时脉冲产生出发,分析了基于卫星的无源授时,并基于自主研制的GPS/BD2多模接收机和支持GPS单系统的LEA-5T授时模块进行了对比测试。测试结果显示,接收机在单BD2模式下,1PPS授时脉冲的... 从卫星系统的授时原理、授时精度评估、接收机1PPS授时脉冲产生出发,分析了基于卫星的无源授时,并基于自主研制的GPS/BD2多模接收机和支持GPS单系统的LEA-5T授时模块进行了对比测试。测试结果显示,接收机在单BD2模式下,1PPS授时脉冲的精度优于10 ns(1σ)。 展开更多
关键词 BD2 GPS 单向授时 1pps
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一种高可用北斗授时装置设计与实现
17
作者 戎强 刘铁强 +1 位作者 尹继凯 王彬 《电子制作》 2022年第15期22-25,共4页
针对常见北斗授时设备存在的输出信号类型固定不变、输出信号路数相对较少的问题,提出了一种北斗授时链路时延模型,在介绍北斗授时相关原理的基础上,设计实现了一种输出信号类型可按照用户需求配置的高可用北斗授时装置,并开展了实验验... 针对常见北斗授时设备存在的输出信号类型固定不变、输出信号路数相对较少的问题,提出了一种北斗授时链路时延模型,在介绍北斗授时相关原理的基础上,设计实现了一种输出信号类型可按照用户需求配置的高可用北斗授时装置,并开展了实验验证。结果表明:研制的北斗授时装置可实现高精度的10MHz、1pps、B码、NTP、PTP等多种体制的授时服务,其输出信号的可配置设计极大的提高了装置的可用性,可满足大多数应用场合的授时应用需求。 展开更多
关键词 北斗 授时 1pps B码 NTP PTP
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时频系统数字锁相技术研究
18
作者 王鹏宇 杨志刚 郑丽丽 《电光系统》 2019年第1期25-32,共8页
文章推导了采用外部1pps信号或10MHz频率信号驯服钮钟或晶振的数字二阶/三阶锁相环结构,建立了频标模块的仿真模型,对模型中的锁相环、数字量化等关键问题进行了分析,给出了参数设置依据及仿真结果,完成了频标模块的硬件设计,验证了模... 文章推导了采用外部1pps信号或10MHz频率信号驯服钮钟或晶振的数字二阶/三阶锁相环结构,建立了频标模块的仿真模型,对模型中的锁相环、数字量化等关键问题进行了分析,给出了参数设置依据及仿真结果,完成了频标模块的硬件设计,验证了模型的正确性。 展开更多
关键词 数字锁相环 1pps 频率准确度 频率稳定度
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东海地区高压-超高压变质带中变质橄榄岩及其原岩和成因类型的判别——以PP1孔和PP3孔为例 被引量:7
19
作者 王希斌 杨经绥 +2 位作者 李天福 陈松永 任玉峰 《地质学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期946-963,共18页
本文在总结全球地幔橄榄岩岩石学和地球化学特征的基础上,首次提出了一个用于判别HP-UHP变质带中变质橄榄岩原岩及其成因类型的判别图解。该图主要由镁铁总量MgO+<FeO>(%)和一个参数m+f/si比值构成。另用Al2O3和CaO分别与MgO+<... 本文在总结全球地幔橄榄岩岩石学和地球化学特征的基础上,首次提出了一个用于判别HP-UHP变质带中变质橄榄岩原岩及其成因类型的判别图解。该图主要由镁铁总量MgO+<FeO>(%)和一个参数m+f/si比值构成。另用Al2O3和CaO分别与MgO+<FeO>(%)制成两个辅助图解,以示方辉橄榄岩和二辉橄榄岩之间在Al2O3和CaO含量上的分界。通过原岩判别结果和研究表明,PP3孔和PP1孔两者在变质组合、原岩成因类型、地球化学和变质条件方面存在一系列的重大差异。分别代表来自两种极端的地球化学类型和两种不同大地构造环境的UHP变质体。PP3钻孔以Ol+Gt+Cpx+Opx+Sp为变质矿物共生组合的含石榴石纯橄岩,其原岩系来自地幔残余成因的方辉橄榄岩遭受UHP变质作用的产物,它以成分高度均一,富Mg(Mg’=92),极端亏损不相容元素REE(∑REE<1×10-6可称为超亏损型)为特征。在变质相中仍保留原岩的残余矿物铬尖晶石(Sp),其成分显示蛇绿岩地幔橄榄岩的成分趋势。并出现以Gt和Sp共存相为特征的变质相。据实验结果(klemme,2004)表明该共存相的稳定域的P-T条件Cr-Sp可达7Gpa,T1400℃,即形成于200km的地幔深度。综合研究显示该孔变质橄榄岩原岩(方辉橄榄岩)具有大洋岩石圈地幔残余成因的某些印记,而不是同深度原生地幔岩相转变的产物。PP1孔变质橄榄岩是由无水矿物相(Ol+Opx+Cpx+Gt)+含水矿物相(Phl±Chu)组成的石榴石橄榄岩杂岩,其原岩来自两种不同成因的超镁铁岩系列:一为具地幔成因的方辉橄榄岩-二辉橄榄岩系列(可能相当于地幔楔中的Al型橄榄岩),另一部分(少数)来自具岩浆成因的超镁铁岩系列(纯橄岩—异剥橄榄岩—辉石岩组合,可能相当于A2型橄榄岩)。该套变质橄榄岩,以成分高度不均一,极端富集REE(∑REE平均>20×10-6可称为超富集型)和大离子亲石元素(K、Ba、Rb)为特征。这种异常现象并不反映其原岩原有的地球化学特征,它可能是由于在俯冲过程中受到陆壳物质的污染,或壳-幔相互作用所致。据该孔变质相中缺乏Sp相,而以Gt为标志的变质相的事实,推断其形成的压力条件应>7Gpa,即形成的深度应大于200km。上述研究表明在苏鲁UHP变质带中,不仅有来自大陆地幔楔中的地幔残余的UHP变质体,而且首次提出有可能来自大陆俯冲前锋具大洋岩石圈地幔性质的(蛇绿岩型地幔残片)变质体存在,这对揭示该区UHP变质带的形成和演化过程提供了新的信息。 展开更多
关键词 超高压 变质橄榄岩 变质组合 原岩类型 判别图解 PP1孔 PP3孔 东海
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硒蛋白PP1(SEPP1)过表达抑制786-O和769-P人肾癌细胞增殖并引起G2/M期阻滞 被引量:5
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作者 刘侃 赵超飞 +5 位作者 陈建文 巫胜攀 姚远新 武翀 罗国雄 张旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期764-769,共6页
目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Pur... 目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1载体并进行基因测序验证。将重组慢病毒载体与包装质粒共同转染HEK293T细胞,进行病毒包装。用病毒上清感染786-O和769-P细胞,采用Western blot法检测SEPP1蛋白表达。按照重组慢病毒感染细胞、空载体感染细胞、未感染细胞进行分组,通过MTS法检测细胞增殖活性、细胞平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期。结果酶切后凝胶电泳得到与SEPP1的DNA大小相一致的片段与空载体片段,基因测序的结果与SEPP1序列完全一致。经p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染的786-O、769-P细胞在感染48 h后,荧光显微镜下可见EGFP明显表达,实验组与空载体组、空白对照组相比较,SEPP1蛋白表达水平均明显提高。p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染组的细胞增殖能力降低,SEPP1过表达细胞集落形成能力明显降低,SEPP1过表达引起肾癌细胞G2/M期阻滞。结论在786-O和769-P细胞过表达SEPP1显著降低细胞增殖能力,并在786-O细胞中引起G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 硒蛋白PP1(SEPP1) 重组慢病毒载体 肾透明细胞癌 肿瘤增殖
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