滋阴清热药和强的松对狼疮小鼠血清ABTS、MDA及抗ds-DNA抗体的影响

目的研究滋阴清热药和强的松对MRL/lpr狼疮小鼠血清2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、丙二醛(MDA)及抗双链DNA(ds-DNA)抗体的影响。方法将24只雌性12周龄的MRL/lpr狼疮小鼠随机分为4组:滋阴清热药组、强的松组、滋阴清热药和强的松合用组、空白对照组。采用滋阴清热药按0.02 mL·g-1剂量对滋阴清热药组灌胃,每日1次;采用0.3 g·L-1强的松药液按0.02 mL·g-1剂量对强的松组灌胃,每日1次;采用滋阴清热药和强的松药液对合用组灌胃,方法和剂量同前;采用0.6 mL生理盐水对空白对照组灌胃,每日1次。观察3个月,抽取小鼠血清检测ABTS、MDA和抗ds-DNA抗体水平。结果滋阴清热药组ABTS水平高于其他3组,差异有统计学意义(均P<0.05);强的松组ABTS水平低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。强的松组MDA水平高于其他3组,差异有统计学意义(均P<0.05)。滋阴清热药组、强的松组、合用组抗ds-DNA抗体水平均低于空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);滋阴清热药组、强的松组、合用组抗ds-DNA抗体水平比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论滋阴清热药能显著增强抗氧化能力,强的松能显著降低抗氧化能力,两者均能引起抗ds-DNA抗体水平下降,提示滋阴清热药治疗系统性红斑狼疮(SLE)有不同于糖皮质激素的作用机制,体现了中医药治疗SLE的特色。

UPLC-PDA-MS-ABTS阳离子自由基在线分析藤茶的抗氧化活性成分

采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-质谱-2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基在线法对藤茶中的抗氧化活性成分进行定性鉴别;以Trolox为对照品,采用标准曲线法,对藤茶中的主要成分二氢杨梅素的抗氧化活性进行定量分析。结果表明,从藤茶中共鉴定出4个化合物,其中主要抗氧化活性成分为二氢杨梅素;对市售12批藤茶样本进行抗氧化活性分析,其中产于湖北恩施和福建武夷山的样本抗氧化活性最高。所建定量分析方法快捷、稳定、可靠,可用于藤茶样本的在线抗氧化分析。

基于UPLC-ABTS-Q-TOF-MS的艾草不同部位抗氧化活性成分比较研究

为了对中药艾Artemisia argyi不同部位(根、茎、叶、籽)中化学成分进行表征与鉴定,筛选具有抗氧化活性的化合物,该研究采用超高效液相色谱-2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-ABTS-Q-TOF-MS)在线联用技术,以Poroshell 120 SB-Aq(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为色谱柱,乙腈(A)-0.2%的甲酸水(B)为流动相,进行梯度洗脱,在正、负离子模式下分别扫描,运用MassLynx软件,结合对照品及相关文献,对艾草不同部位进行化学成分鉴定并比较不同部位化学成分的差异,采用抗氧化活性成分在线检测体系,对抗氧化活性成分进行检测,并以清除效率为指标对艾草不同部位活性成分的抗氧化活性进行比较评价。结果从艾草不同部位提取物中共鉴定出87个化合物,根、茎、叶、籽分别鉴定出38、72、85、33个成分;共筛选出具有22个抗氧化活性的化合物,根、茎、叶、籽分别鉴定出14、17、20、11个具有抗氧化活性的化合物。研究表明艾草不同部位化学成分和抗氧化成分均存在一定差异,为艾草的资源利用和进一步研究开发提供数据支持。

3种检测方法比较忍冬药用和非药用部位的抗氧化活性

目的:分析和比较忍冬药用部位(金银花和忍冬藤)和非药用部位(忍冬叶)的体外抗氧化活性,为忍冬非药用部位——忍冬叶的综合利用和产品开发提供科学依据。方法:分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法和铁离子还原能力(FRAP)微量法测定45份金银花、忍冬叶和忍冬藤样品的抗氧化活性,并分别采用描述性统计、直观分析、系统聚类分析(HCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等统计学方法进行数据处理和挖掘。结果:3种方法测定的抗氧化活性结果基本相似,测定结果具有较高的可信度。不同产地的金银花、忍冬叶和忍冬藤抗氧化活性大小:连云港≥河南>山东(金银花);连云港>河南>山东(忍冬叶);河南≥山东≥连云港(忍冬藤)。忍冬藤的抗氧化活性较弱,金银花和忍冬叶的抗氧化活性较强。金银花和忍冬叶的抗氧化活性大小因其产地不同而存在差异:忍冬叶≈金银花(河南),忍冬叶>金银花(连云港),忍冬叶<金银花(山东)。HCA和PLS-DA分析将45份样品分为2个组别,其中忍冬藤为一组,金银花和忍冬叶为另一组。忍冬藤的抗氧化活性明显不同于金银花和忍冬叶,而金银花和忍冬叶的抗氧化活性则较为相近。结论:忍冬植物的非药用部位——忍冬叶资源丰富,其抗氧化活性比忍冬藤强,与金银花相当,极具综合利用价值和产品开发潜能。

响应面法优化超声提取益母草中多酚工艺及其抗氧化作用研究

目的:优选出益母草中多酚提取工艺,并对其进行抗氧化活性研究。方法:在单因素实验基础上,以没食子酸标准品为对照,以乙醇浓度、料液比、超声时间为自变量,以益母草多酚得率为响应值,运用响应面法优化超声辅助提取工艺参数;并通过DPPH、ABTS自由基法研究益母草多酚体外抗氧化作用。结果:益母草中多酚最优工艺为:乙醇浓度42%,料液比1∶8(g/mL),超声时间15 min,此时得率为3.78%,与理论得率3.82%,相差0.04%,工艺稳定、可行,可用于益母草中多酚提取。抗氧化实验可知,益母草多酚和维生素C对DPPH、ABTS的清除率均随二者在测试浓度(4~14 mg/mL)范围内正相关;当浓度为14 mg/mL时,维生素C和益母草多酚对DPPH的平均清除率分别是89.34%和75.96%,差异不明显;对ABTS的平均清除率分别是79.52%和61.81%,差异在高浓度时较为显著。结论:益母草多酚具有一定的抗氧化作用。该研究为益母草资源广泛开发提供参考。

HPLC-ABTS-DAD-Q-TOF/MS在线检测大黄抗氧化活性成分

目的:建立大黄特征化学成分和抗氧化活性相关联的二维指纹图谱,研究大黄抗氧化活性物质。方法:利用高效液相多检测器联用的抗氧化活性成分在线检测体系,对大黄中化学成分进行检测,共鉴定出大黄中化学成分15种;其中8种具有抗氧化活性;然后采用清除效率为指标对各活性成分的抗氧化活性进行评价。结果:结果发现化合物葡萄糖紫丁香酸、腺嘌呤、没食子酸、儿茶素或表儿茶素、双花母草素、2-O-桂皮酰-没食子酰葡萄糖等具有较强的清除ABTS^·+的活性,而蒽醌类成分对ABTS^·+的清除作用较弱。结论:采用HPLC-ABTS-DAD-Q-TOF/MS对大黄中的抗氧化活性成分进行快速分析鉴定,初步阐明大黄在抗氧化环节起作用的效应物质。

HPLC-ABTS-DAD-Q-TOF/MS在线筛选黄连抗氧化活性物质

建立黄连特征化学成分和抗氧化活性相关联的二维指纹图谱,研究黄连抗氧化活性物质。利用高效液相多检测器联用的抗氧化活性成分在线检测体系,对黄连中化学成分进行检测,共鉴定出黄连中化学成分14种,其中具有抗氧化活性的成分8种;然后采用清除效率为指标对各活性成分的抗氧化活性进行评价。结果发现化合物2,3,4-三羟基苯丙酸、绿原酸、阿魏酸、枯拉灵、3-O-阿魏酰奎宁酸和阿魏酰基酪胺等具有较强的清除ABTS·＋的活性,而生物碱类成分对ABTS·＋的清除作用较弱,为黄连的抗氧化物质基础研究提供数据支持。

3种不同类型黄酒抗氧化作用比较研究

目的比较3种不同类型黄酒的抗氧化作用。方法测定了3种不同类型黄酒中总酚含量,采用二苯苦味酰肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法、2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]法、邻苯三酚自氧化法及羟自由基抑制法对3种不同类型黄酒的清除自由基活性进行比较。结果传统型、清爽型和特型黄酒中总酚含量分别为254、185、205mg/L。传统型黄酒对DPPH自由基、ABTS·^+自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为63.2%、63.8%和58.6%,清爽型对上述3种自由基的清除率分别为28.9%、25.8%和22.7%,特型黄酒对这3种自由基的清除率分别为45.9%、35.9%和34.7%。传统型、清爽型和特型黄酒对羟自由基的抑制率分别是38.6%、18.2%和24.1%。结论 3种不同类型黄酒对DPPH自由基、ABTS·^+自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基均具有较强的清除作用,其中,传统型黄酒抗氧化能力最强。

ABTS分光光度法测定水中微量二溴海因中的有效溴

为检测水中低浓度二溴海因（DBDMH）,基于有效溴与2,2＇-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（ABTS）在pH=2条件下产生绿色稳定存在的ABTS.＋自由基的原理,使用ABTS显色分光光度法在405 nm测定二溴海因中的有效溴。该方法在0.08~1.61 mg/L有效溴范围内线性良好,最低检测限为0.02 mg/L。二溴海因水解产生的氨氮对测定影响很小。

改良的DPPH与ABTS自由基法评价不同葡萄籽油抗氧化能力

本研究采用改良的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl,DPPH)法和2,2'-联氮双-(3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸)二胺盐[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]法测定不同方法提取葡萄籽油极性部分、非极性部分及全油的抗氧化能力,测定不同葡萄籽油多酚含量,研究多酚与葡萄籽油极性部分抗氧化能力的相关性。热榨毛油与溶剂法毛油在经过精炼后多酚含量和抗氧化能力显著降低;在溶剂法精炼油、热榨法精炼油、低温压榨油、超临界CO_2萃取葡萄籽油中,低温压榨油极性部分清除DPPH与ABTS自由基的能力最强,低温压榨油的多酚含量最高,超临界CO_2萃取葡萄籽油非极性部分与低温压榨油全油的DPPH与ABTS自由基清除能力最强;各不同葡萄籽油总酚含量与极性部分DPPH和ABTS自由基的清除能力具有显著的正相关性。

近红外光谱结合偏最小二乘回归所建模型快速预测雪菊的抗氧化活性

将10批不同产地的雪菊样品自然干燥,粉碎,过筛,分取0.2 g,加入50 mL 35%(体积分数)甲醇溶液,静置过夜,超声处理30 min,抽滤,收集滤液,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法测定雪菊的抗氧化活性(参考值)。利用近红外光谱仪对100个雪菊粉末样品分别进行光谱扫描,采用近红外积分球漫反射模式进行光谱采集,分别采用标准正态变量(SNV)+连续小波变换(CWT)和CWT对原始近红外光谱数据进行预处理,结合偏最小二乘回归(PLSR),在4767~4960 cm^(-1)、5153~6966 cm^(-1)、7120~8813 cm^(-1)波段内建立DPPH抗氧化活性模型,在5153~7081 cm^(-1)、7660~8624 cm^(-1)波段内建立ABTS抗氧化活性模型。结果表明:DPPH抗氧化活性模型的交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.772,相关系数(R)为0.948,预测残差值(RPD)为3.17;ABTS抗氧化活性模型的RMSECV为0.365,R为0.884,RPD为2.52。利用模型预测雪菊样品的DPPH和ABTS抗氧化活性,预测值和参考值基本一致,并且DPPH抗氧化活性模型的预测均方根误差(RMSEP)为0.705,ABTS抗氧化活性模型的RMSEP为0.377。

广林9号桉叶多酚抗氧化活性研究

采用不同极性有机溶剂对广林9号桉叶提取物进行系统萃取分离,用福林-酚法测定各组分的总酚含量,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、还原能力3种体外抗氧化活性方法测定了桉叶各组分的抗氧化活性。结果表明,不同萃取组分中,乙酸乙酯组分总酚含量最高,达到502.67mg/g;其对DPPH自由基和ABTS+.的清除能力和还原能力也最强,优于阳性对照物茶多酚,其清除两种自由基的IC50分别为0.097mg/mL和0.034mg/mL;通过总酚含量与抗氧化活性比较发现,其抗氧化活性与总酚含量成正相关,由此判断桉叶提取物的抗氧化活性成分主要为多酚类物质;桉叶粗提物中多酚含量达到30%以上,与茶叶粗提物中多酚含量相当,具有开发意义。

4种蜂花粉油脂抗氧化活性研究

采用ABTS.+清除、DPPH自由基清除、磷钼络合物法3种体外抗氧化方法,以天然抗氧化剂VE(α-生育酚)作为对照,评价并比较五味子、芝麻、玉米和蚕豆蜂花粉油脂的抗氧化活性。结果表明:4种蜂花粉油脂对ABTS.+和DPPH自由基均具有清除能力,但清除能力存在极显著性差异(P<0.01),IC50值分别在0.029～0.708mg/mL和0.059～2.203mg/mL之间;在磷钼络合物法中,抗氧化活性为五味子>玉米、蚕豆>芝麻。在3种抗氧化方法中五味子蜂花粉油脂的抗氧化能力最强,与天然抗氧化剂VE相当。

茯砖茶不同溶剂提取物抗氧化活性研究

目的研究茯砖茶不同溶剂提取物体外抗氧化活性,并测定其总多酚、黄酮含量。方法以抗坏血酸为阳性对照,采用二苯代苦味酰基(DPPH)、[2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)三种抗氧化模型,评价茯砖茶80%乙醇(总提物)、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水5种不同溶剂提取物体外清除DPPH、ABTS+自由基能力和对铁离子的还原/抗氧化能力。结果茯砖茶乙酸乙酯提取物总多酚含量最高,正丁醇提取物黄酮含量最高,分别为(291.38±5.24)、(222.86±6.12)mg/g。茯砖茶不同溶剂提取物均具有一定的抗氧化活性,清除ABTS+自由基和铁离子还原/抗氧化能力为:总提物>乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>水提物>石油醚提取物;清除DPPH自由基的能力为:乙酸乙酯提取物>总提物>正丁醇提取物>水提物>石油醚提取物。茯砖茶总提物和乙酸乙酯提取物均具有良好的抗氧化活性,清除DPPH自由基能力的半清除率浓度(IC50)分别为0.048、0.043 g/L,清除ABTS+自由基能力的IC50分别为0.025、0.027 g/L。茯砖茶抗氧化能力与总多酚含量呈正相关。结论茯砖茶提取物具有良好的抗氧化能力,为开发功能性抗氧化剂提供科学依据。

酪醇酯类衍生物的合成及生物活性

以酪醇为原料,对其醇羟基进行了结构修饰,合成了25种酪醇衍生物.化合物的结构经核磁共振波谱和高分辨质谱分析确证.体外抗氧化实验结果表明,在实验浓度下大部分化合物表现出一定的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除活性,化合物3k和3y具有良好的DPPH清除活性,其中化合物3y的清除活性高于对照药奎诺二甲基丙烯酸酯(Trolox);在实验浓度下大部分化合物表现出一定的2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)清除活性,化合物3k,3x和3y具有良好的ABTS清除活性,其中化合物3y的清除活性高于Trolox;在实验浓度下大部分化合物对铁离子-2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪(Fe3+-TPTZ)复合物表现出一定的铁离子还原抗氧化能力(FRAP),化合物3k,3w和3y具有良好的Fe3+-TPTZ复合物还原能力,其中化合物3y的还原能力高于Trolox.

五峰绿茶的体外抗氧化活性研究

对湖北五峰生产的绿茶总提物的抗氧化活性进行研究。通过测定五峰绿茶总提物的还原能力、对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS+]自由基以及超氧阴离子的清除能力、对酪氨酸酶活性的抑制能力,探讨绿茶的体外抗氧化活性。绿茶提取物对DPPH自由基的最大清除率为92.479%,IC50为50.561μg/mL;对ABTS+自由基的最大清除率为99.971%,IC50为8.811μg/mL;最大还原力为96.303%,IC50为87.548μg/mL;对超氧阴离子的最大清除率为57.343%,IC50为196.095μg/mL;对酪氨酸酶的相对抑制率为36.259%。表明五峰绿茶具有良好的体外抗氧化和一定的酪氨酸酶活性抑制能力。

二氧化硫抗氧化能力及其在干果中的含量分析

在前期干果品质分析时,发现部分干果的抗氧化能力异常,推测可能与二氧化硫有关。因此,该文采用了二苯代苦味酰基自由基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基[2,2-diamine-(3-ethyl benzothiazolin-6-sulfonic acid)diammonate,ABTS]、铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power,FRAP)和氧自由基清除能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)4种方法分析二氧化硫的抗氧化能力,同时测定8种新疆常见干果的二氧化硫含量。试验结果:在试验浓度范围内,二氧化硫具有一定抗氧化能力,1 mg二氧化硫相当于1μmol～2μmol 6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸(6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid,Trolox)的抗氧化能力。此外,二氧化硫浓度与抗氧化能力呈线性相关,其中ORAC法的抗氧化能力最好(R^2=0.998 4);在8种干果中,黄提、枸杞、吊干杏、大无花果和小无花果中检出二氧化硫,其中,黄提(1.45 g/kg DW)和枸杞(0.18 g/kg)二氧化硫超过国家限量标准。这说明二氧化硫可能是导致部分干果抗氧化能力异常高的主要原因,因此在样品分析时,应考虑二氧化硫对样品指标的影响。

黑小麦麸皮抗氧化活性成分提取及其抗氧化能力评价

黑小麦麸皮是黑小麦加工过程中的副产物,其富含多种生理活性物质,包括花青素、酚酸类物质、膳食纤维等。以黑小麦麸皮为原料,利用不同溶剂对其抗氧化活性成分进行提取并对其抗氧化能力评价研究。结果表明,75%乙醇提取物干物质得率最高,为10.72%;50%乙醇提取总酚含量最高,为2.9 mg/100 mL;50%乙醇提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除力最强,75%乙醇提取物对DPPH抗氧化物提取能力最强;75%丙酮提取物对2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)清除力最强,75%甲醇提取物对ABTS抗氧化物提取能力最强。综合比较得出,50%乙醇更适于黑小麦麸皮抗氧化活性成分提取。

蛋清源活性肽抗氧化及抗炎活性

食源性抗氧化肽安全性高,抗氧化能力较好,近年来成为多肽研究领域的热点。本实验以蛋清源抗氧化肽WNWAD(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp),及其拆分肽WNW(Trp-Asn-Trp)、WAD(Trp-Ala-Asp)、WN(Trp-Asn)、AD(Ala-Asp)为研究对象,首先采用2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)体外抗氧化评价方法,对5条肽的抗氧化活性进行了评价,建立H2O2诱导的人胚肾细胞(HEK293)氧化损伤模型,利用HEK293细胞模型评价5条肽的抗氧化活性,然后检测抗氧化肽WNWAD对细胞氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量的影响,最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒检测了炎症因子人白细胞介素-8及人肿瘤坏死因子的含量。结果表明:活性肽浓度为40μmol/L时,WNWAD清除ABTS^+·能力最强,Trolox抗氧化当量(Trolox equivalent antioxidant capacity,TEAC)为(98.411±0.020)μmol TE/L,其次为WN、WNW、WAD,其TEAC分别为(96.629±0.008)、(94.978±0.003)、(88.807±0.003)μmol TE/L,AD没有ABTS^+·清除能力。在H2O2浓度为400μmol/L时,细胞相对存活率为(50.240±0.505)%,有高度显著性差异(P<0.001),不同浓度的蛋清源活性肽对H_2O_2诱导的HEK293细胞氧化损伤均有保护作用,且随着各条肽浓度升高保护作用呈增强趋势,其中WNWAD的保护作用最强,浓度为30μmol/L时,细胞存活率已高达99.12%。并且WNWAD可明显降低细胞中GSSG含量,降低炎症因子人白细胞介素-8和人肿瘤坏死因子的含量。以上研究结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平、提高细胞抗氧化能力、抗炎能力等有重要作用。

不同溶剂对鸡骨草的提取和体外抗氧化活性研究

研究了鸡骨草提取物的抗氧化活性。以质量分数为95%乙醇、丙酮和乙酸乙酯为溶剂分别对鸡骨草进行浸泡提取,采用紫外分光光度法测定所得提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率、2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除率和铁离子还原能力。