PPN抑制HBV-DNA表达及复制的体外实验

目的 体外观察PPN对HBV DNA表达、复制的抑制效果及其细胞毒性作用。方法 取 10 μg/ml、2 0 μg/ml、 4 0 μg/ml、 80 μg/ml、 16 0 μg/mlPPN水溶液分别加入 2 2 15细胞株培养悬液中 ,8天后用放射免疫法检测上清液中HBeAg的含量 ,并计算HBeAg抑制率、细胞存活率、HBeAg抑制率为 5 0 %时的药物浓度 (ID50 )、实验组存活细胞为对照组的 5 0 %时的药物浓度 (CD50 )和治疗指数 (TI)。PCR技术检测HBV DNA阳性血清中加入 16 0 μg/mlPPN水溶液后对HBV DNA复制的抑制作用。 结果 当加入的PPN浓度为 16 0 μg/ml和 80 μg/ml时 ,HBeAg抑制率分别为 89 8%和 82 4 % ,细胞存活率分别为 98 7%和 99 2 % ;HBV DNA阳性血清中加入PPN后可有效抑制其复制。结论 PPN可有效抑制HBV DNA的表达和复制 ,且对靶细胞 (肝细胞 )无细胞毒作用 。

蒙药乙肝1号对HBV转染细胞表达功能的影响

目的:探讨蒙药乙肝1号抗HBV药理作用。方法:采用HBV的2.2.15细胞系作为模型,观察药物对2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制效果。结果:蒙药乙肝1号30mg/ml浓度对细胞有毒,最大耐受药物浓度20mg/ml时对HBsAg抑制率为57.81％,半数有效剂量(IC_(50)为5.54±3.44mg/ml,治疗指数TI为5.42±3.42;对HBeAg的抑制率为71.64％,半数有效剂量(IC_(50))为3.69±0.01mg/ml,治疗指数(TI)为6.41±0.03mg/ml。结论:提示蒙药乙肝1号煎剂在体外有一定的抗HBV作用。

秋水仙碱体外抗乙型肝炎病毒的作用

目的:探讨秋水仙碱在体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:以秋水仙碱作用于HBV全基因组转染的人肝癌细胞株(Hep G22.2.15),用罗氏电化学发光免疫分析仪检测HBsAg和HBeAg,用ABI7000荧光定量PCR扩增仪检测细胞内、外HBV-DNA、HBV-共价闭环DNA(HBV-cccDNA)(copies/cell)。数据表示为l g(x珚±s)。结果:(1)秋水仙碱6.25×10-6～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBsAg(P<0.05,P<0.01),IC50=1.473×10-7 mol·L-1,其3.125×10-6和2.5×10-5～1×10-4 mol·L-1能显著抑制Hep G22.2.15产生/分泌HBeAg(P<0.05,P<0.01),IC50=2.387×10-7 mol·L-1,拉米夫定(lamivudine)IC50分别为3.52×10-4 mol·L-1和3.184×10-3 mol·L-1。(2)秋水仙碱和拉米夫定有类似的降低Hep G22.2.15细胞内HBV-DNA的作用(P<0.05),IC50分别为9.747×10-9 mol·L-1和2.649×10-6 mol·L-1。(3)秋水仙碱3.125×10-6和6.25×10-6 mol·L-1能明显减少Hep G22.2.15细胞内和上清液中HBV-cccDNA(P<0.05)。(4)秋水仙碱1.6×10-6～1×10-3 mol·L-1和拉米夫定2×10-4,1×10-3 mol·L-1皆能显著抑制Hep G22.2.15细胞增殖(P<0.05,P<0.01),IC50分别为7.933×10-6 mol·L-1和2.60×10-4 mol·L-1。结论:秋水仙碱在体外具有抗HBV的作用,包括降低HBsAg和HBeAg的产生/分泌,减低Hep G22.2.15细胞内、外HBV-cccDNA水平,减少细胞内HBV-DNA,且主要是由于直接抑制HBV-DNA和HBV-cccDNA的产生。