温阳益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶的影响

目的观察温阳益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶的影响,探讨其治疗心力衰竭的作用机制。方法采用皮下多点注射异丙肾上腺素制备慢性心力衰竭大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、西药组和温阳益气活血方低、中、高剂量组,每组14只,另设空白组15只,给药组分别予相应药物灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水,连续6周。超声检测大鼠心功能,ELISA检测血清脑钠肽(BNP)含量,计算心脏质量指数(HMI),HE染色观察心肌组织病理变化,酶活比色法、免疫组化及RT-PCR检测心肌组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性及表达。结果与空白组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)显著降低(P<0.01);血清BNP含量显著增加,HMI显著升高(P<0.01);心肌组织大量纤维水肿,胞质疏松,组织边缘心肌纤维溶解,伴有少量淋巴细胞浸润;心肌组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性显著减弱,蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,温阳益气活血方高剂量组大鼠LVEF、LVFS显著升高(P<0.01);血清BNP含量显著减少,HMI显著降低(P<0.05,P<0.01);心肌纤维水肿、胞质疏松、炎症浸润、细胞空泡变性及纤维溶解程度均有改善;心肌组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性显著增强,蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论温阳益气活血方能通过调节心肌Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性及表达改善心力衰竭大鼠心功能不全,发挥治疗慢性心力衰竭的作用。

定悸复脉汤及其拆方对快速型心律失常大鼠心电图及Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶的影响

目的 观察定悸复脉汤对快速型心律失常大鼠心电图及Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶的影响,并探讨其组方的合理性。方法 将健康雄性SD大鼠用定悸复脉汤及其拆方大鼠适应性喂养2周,2周后将大鼠随机分为空白、对照、维拉帕米、定悸复脉汤全方、拆方1号(去龙骨)、拆方2号(去合欢皮)6个组,每组8只。每日予以相应药物灌胃,共14 d,末次给药后,各组(除空白组)外大鼠予以氯化钙溶液尾静脉注射诱导快速型心律失常。氯化钙注射10 s后开始观察心电图变化,并记录室性心动过速(VT)、心室颤动(VF)、心脏骤停(CA)的开始时间等。大鼠心脏骤停后,取心脏组织用于Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶的检测。结果 心电图提示,各药物组造模成功率均为100%;定悸复脉汤全方及拆方组使大鼠心电图QT离散度、T波起点至T波终点的距离(To-Tp)、T波起点至波峰的距离(Tp-Te)明显缩短(P<0.05);定悸复脉汤全方及拆方组使大鼠心脏组织中Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性明显升高(P<0.05)。结论 定悸复脉汤及拆方1号、拆方2号均有抗快速型心律失常的作用,其机制可能与稳定心肌细胞电活动、增加心脏组织中Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性有关,其中龙骨、合欢皮两味药物在抗快速型心律失常机制中作用不明显。

温灸家兔穴位后循经皮肤温度及组织Ca^(2+)-、Mg^(2+)-ATP酶活性的变化

目的:研究循经温度形成的现象与Ca2+、Mg2+-ATP酶活性变化的关系,探讨循经高温线形成的能量代谢机制。方法:选用健康成年家兔7只,用红外热像仪观察温灸左后肢外侧"后三里"、右后肢内侧"阴陵泉"穴诱发胃经和脾经出现的温度变化。选取温灸后循经出现温度较高部位(高温区)的组织,用酶学方法测定Ca2+、Mg2+-ATP酶活性,并与非高温区(对照区)组织比较。结果:温灸家兔"后三里""阴陵泉"穴循经组织温度明显升高。右后肢内侧(足太阴脾经)高温区组织Mg2+-ATP酶活性明显高于对照区组织(P<0.05);左后肢外侧(足阳明胃经)高温区组织Mg2+-ATP酶活性亦有增高趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。温灸后,双后肢循经高温区组织Ca2+-ATP酶活性较对照区有升高趋势,但差异无显著性统计学意义(均P>0.05)。结论:1)家兔足太阴脾经循经出现温度较高组织的Mg2+-ATP酶活性较非高温区增强,可能导致外周ATP释放能量的功能活动加强,从而促使组织能量代谢旺盛。2)家兔循经温度较高组织的Ca2+-ATP酶活性未见明显改变,提示Ca2+-ATP酶活性在循经高温区的形成过程中可能不起主要作用。

卵磷脂对花尾胡椒鲷幼鱼Ca^(2+)-ATP酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

为探索卵磷脂影响幼鱼生长存活的作用机制 ,采用不同卵磷脂添加量的配合饲料投喂花尾胡椒鲷(Plectorhynchuscinctus)幼鱼 ,采用孔雀绿比色法同步测定幼鱼的Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性。结果表明 ,饲料中添加适量卵磷脂可显著提高花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性 ,且卵磷脂含量为3 %的配合饲料投喂的花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶活性最高 ,而卵磷脂含量为2 %的Na+,K+

镉诱导鲫肝细胞内Ca^(2+)-ATP酶与金属硫蛋白的表达

研究了镉诱发鲫肝细胞相关的胞内游离钙离子变化,以及Ca2+-ATP酶及金属硫蛋白表达量的变化。试验分为对照组、5、10、15、20μmol/L CdCl25个组。Ca2+用Fura-2/AM方法检测,试验后24 h用荧光倒置显微镜观察细胞内游离钙离子变化;分光光度法检测Ca2+-ATP酶;石墨炉—原子分光光度法检测了细胞内镉离子浓度;免疫酶联法(ELISA)检测了金属硫蛋白(MT)含量。结果显示,镉可导致细胞存活率下降,具有一定的毒性。镉离子引起胞内Ca2+荧光强度和Ca2+-ATP酶活性增加(P<0.01)。随镉浓度升高,处理组Ca2+-ATP酶浓度活性分别是对照组的4.52、6.73、6.68、7.19、6.18倍;暴露24 h后各组细胞内镉离子均有上升,其中5μmol/L组最高,达(2.045±0.322)μmol/L;各处理组金属硫蛋白(MT)含量增高(P<0.01),且5μmol/L低浓度组MT增幅最大,达17.15%。结果提示,镉诱导下细胞内Ca2+升高,MT表达量上升,且MT可螯合进入细胞内的镉离子,这种螯合可能是降低镉毒理作用的机制之一。

参附注射液和生脉注射液对心肌细胞Ca^(2+)-ATP酶影响的对比研究

[目的]探讨参附注射液和生脉注射液对心肌细胞Ca2+-ATP酶的影响机制,旨在为参附注射液和生脉注射液的临床应用提供实验依据。[方法]采用胰酶消化法体外培养大鼠乳鼠心肌细胞,通过差速贴壁的方法纯化细胞后,分别把参附注射液和生脉注射液选取3个浓度梯度直接作用于对数生长期的心肌细胞,药物作用2h后检测其对心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力的影响。[结果]参附注射液的低、中、高剂量均能使心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力增强,以中剂量最为明显(P<0.05);生脉注射液低、中剂量对心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力的影响较小,高剂量有增强心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力的趋势,但没有统计学意义。[结论]提示参附注射液对心脏的作用机制可能与其能提高心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力有关;生脉注射液对心肌细胞内Ca2+-ATP酶活力有一定影响,但其可能主要是通过其他机制作用于心肌细胞。

质膜Ca^(2+)-ATP酶异构体2基因多态性与噪声性听力损失易感性的关系

目的 探讨质膜Ca2 + - ATP酶异构体 2 (PMCA2 )基因多态性与噪声性听力损失的关系。方法 采用横断面流行病学研究方法 ,对 194名噪声暴露作业工人进行调查和听力测试 ,按听力学评价的结果将其分为听力损失组和听力正常组 ;用多聚酶链反应 限制性片断长度多态性 (PCR -RFLP)方法和等位基因特异扩增法 (ASA)检测其PMCA2基因上rs2 2 892 74和rs6790 64 0两个单核苷酸位点的多态性。结果 在 93名噪声性听力损失的工人中 ,rs2 2 892 74位点AA、AG和GG基因型的频率分别为16. 1%、40. 9%和 43. 0 % ,等位基因A和G的频率为 3 6 6%和 63 . 4% ;在 10 1名听力正常的工人中 ,其基因型频率分别为 15 8%(AA)、3 2 7% (AG)和 5 .1 5 % (GG) ,等位基因频率为 3 2. 2 % (A)和 67. 8% (G)。rs6790 64 0位点在噪声性听力损失组CC、CT和TT基因型的频率分别为 0、 82 8%和 17. 2 % ,等位基因C和T的频率为 41. 4%和 5 8 .6% ;在听力正常组的基因型频率分别为 1 0 %(CC)、 76. 2 % (CT)和 2 2 . 8% (TT) ;等位基因频率为 3 9. 1% (C)和 60. 9% (T)。两位点的基因型分布及其等位基因频率在噪声性听力损失组与听力正常组之间差异均无显著性 (P >0 . 0 5 )。采用多元Logistic回归对两组间年龄、性别、吸烟状况。

扩心方对扩张型心肌病大鼠肌浆网Ca^(2+)-ATP酶及受磷蛋白的影响

目的:研究扩心方对阿霉素诱导扩张型心肌病模型大鼠心功能、心肌损伤的保护作用,探讨扩心方作用机制。方法:50只Wistar大鼠腹腔注射阿霉素6周建立DCM模型,开始造模4周后随机分为模型组,扩心方高、中、低剂量组,卡托普利组(每组各10只),连续灌胃给药四周,另设10只正常对照。正常组和模型组以生理盐水灌胃。治疗结束后,对各组大鼠进行心脏超声检查,病理形态学检测,以及用反转录-聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法分别检测心肌组织中SERCA2α、PLB的m RNA和蛋白含量。结果:与正常对照组相比,模型组心功能减弱,出现心肌病理损害,SERCA2α与PLB表达异常;与模型组相比,扩心方组可以改善DCM大鼠的心功能、心肌病理学形态,同时,提高SERCA2αm RNA和蛋白表达、抑制PLB m RNA和蛋白表达。结论:扩心方能提高DCM大鼠的左心室射血分数和缩短率,减轻心肌损伤,改善心功能,同时调控DCM大鼠SERCA2α、PLB的表达。提示扩心方改善DCM大鼠心功能的作用机制,可能与纠正心肌肌浆网钙调控相关蛋白-SERCA2α、PLB的异常表达相关。

华蟾素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

应用小鼠H22肝癌细胞悬液制作H22荷瘤小鼠腹水瘤模型,分别腹腔注射华蟾素、氟脲嘧啶(5-Fu)、生理盐水,计算肿瘤抑制率,观察肝癌细胞酶活性的变化。结果华蟾素组和5-Fu组的肿瘤抑制率分别是35.8%和40.7%,细胞质膜标志酶Mg2+-ATP酶(Mg2+-AT Pase)、内质网标志酶葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)反应颗粒变小,数量减少,密度变低,酶活性明显下降。表明华蟾素可降低H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg2+-AT Pase及G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞生长。

补肾、健脾、活血方法对骨质疏松症小鼠骨及骨骼肌中Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量影响

目的:观察补肾、健脾、活血方法对骨质疏松症小鼠骨骼及骨骼肌中Ca2+-Mg2+-ATP酶含量的影响,探讨中医药防治骨质疏松症的作用机制。方法:实验药物灌胃8周后,ELISA法测定股骨及骨骼肌中Ca2+-Mg2+-ATP酶的含量。结果:补肾组、福善美组小鼠骨骼及骨骼肌的Ca2+-Mg2+-ATP酶较模型组明显升高。结论:骨质疏松症的形成可能与骨及骨骼肌Ca2+-Mg2+-ATP酶含量异常有关;补肾、健脾方法通过调控骨质疏松症小鼠的骨及骨骼肌Ca2+-Mg2+-ATP酶含量,起到防治骨质疏松症的作用。

有氧运动对大鼠骨骼肌线粒体Na^+,K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶及线粒体肿胀的影响

背景:研究表明有氧运动可提高线粒体功能,但在不同时期的作用特点还不明确。目的:观察不同周期有氧运动对大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组,有氧运动2,4和6周组。正常对照组不进行有氧运动,其余3组则参照BedfordTG标准,采用跑台运动方式,建立有氧运动模型进行相应的运动周期锻炼。测定各组大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性以及线粒体肿胀程度。结果与结论:有氧运动2周组各指标与对照组比较无差异。有氧运动4和6周组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性均增高(P<0.05),线粒体肿胀程度降低(P<0.05)。实验结果表明,有氧运动可保护线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性,提高线粒体功能,但需要一定的时间积累。

加减木防己汤对缺血性心力衰竭大鼠心肌肌浆网Ca^(2+)-ATP酶及心肌重构的影响

目的:探讨加减木防己汤对缺血性心力衰竭(ischemic heart failure IHF)大鼠心室重构的影响及其作用机制。方法:60只雄性SD大鼠,冠脉结扎法制备IHF模型,选取6只为假手术组(只穿线不结扎),将造模成功大鼠随机分为模型组(6只)、西药组(6只)、中药高剂量组(6只)、中药中剂量组(6只)及中药低剂量组(6只)5组。假手术组和模型组给予1.0 m L/(100 g·d)纯净水灌胃;中药高、中、低剂量组(8、4、2g/m L)分别予等体积加减木防己汤灌胃;西药组予5 mg/(100 g·d)卡托普利灌胃,持续4周。心脏超声、血浆TNF-α、AngⅡ、IL-6、ET-1浓度测定及免疫组化测SERCA2a含量。结果:与假手术组比较,模型组的射血分数(EF)、实际面积和IOD阳性指数明显降低(P<0.05),左室收缩末期内径(LVS)、左室后壁厚度(LVPWD)明显升高(P<0.05);与模型组比较,西药对照组、中药低、中、药高剂量组EF明显升高(P<0.05),中药低、中、高剂量组LVS明显下降(P<0.05);中药3组室间隔厚度(IVSD)、LVPWD无明显改变(P>0.05),中药高剂量组实际面积明显升高(P<0.05),中药中剂量组IOD阳性指数明显升高(P<0.05);与西药对照组比较,中药高剂量组EF明显升高(P<0.05),中药中、高剂量组LVS明显下降(P<0.05),中药3个剂量组实际面积和IOD阳性指数无明显改变(P>0.05)。结论:西药和中药均能改善大鼠心功能,主要表现为对收缩功能改善;中高剂量中药在改善收缩功能方面优于西药;中高剂量中药能显著增加心肌SERCA2a含量,但中药未能改善心肌重构。

颈椎病兔颈肌Ca^(2+)-ATP酶活性的变化及颈康灵对其的影响

目的:研究因长期低头位和风寒湿刺激所致的颈椎病颈肌Ca2+-ATP酶的活性变化,并观察颈康灵对该酶活性的影响。方法:将60只日本大耳兔随机分为空白组、模型组、颈康灵低、中、高剂量3组和颈复康对照组。参照施氏造模法,对空白组以外的各组家兔进行造模,建立颈椎病模型。然后按各组要求给以相应的蒸馏水或药物进行灌胃治疗,疗程结束后检测各组家兔颈部肌肉Ca2+-ATP酶活性。结果:(1)模型组家兔颈部肌肉Ca2+-ATP酶活性较空白组有所降低,有显著性差异(P<0.01);(2)颈康灵各剂量组对Ca2+-ATP酶活性均有提高趋势,但以中、高剂量组较为显著(P<0.01);且中、高剂量组的Ca2+-ATP酶活性与空白组、颈复康组比较,均无显著性差异(P>0.05)。结论:长期低头位和风寒湿邪导致的颈椎病家兔颈部肌肉Ca2+-ATP酶活性下降,颈康灵对颈椎病兔颈部肌肉Ca2+-ATP酶活性有保护作用。

水稻幼苗根细胞质膜和液泡膜微囊Ca^(2+)-ATP酶的特性

水稻幼苗根质膜和液泡膜Ca2+-ATP酶对ATP的Km值分别为7.1和4.5μmol.L-1;反应的最适pH分别为8.0和7.0。两者活性均受Na3VO4和曙红B(EB)抑制;CPZ抑制质膜Ca2+-ATP酶活性,但促进液泡膜Ca2+-ATP酶活性。30mmol.L-1CaCl2浸种和CaCl2浸种结合低温锻炼预处理,均可提高此酶的活性和冷稳定性。

安氟醚麻醉大鼠不同时期脑Ca^(2+)-ATP酶活性变化

目的 动态观察安氟醚吸入麻醉大鼠不同时期各脑区Ca2+ ATP酶活性变化和行为学 变化,探讨安氟醚的麻醉作用机制。方法 40只SD雌性大鼠随机均分为五组:诱导期组、麻醉期组、 恢复期组、清醒期组和对照组。分光光度法测定不同时期大脑皮层、脑干、海马Ca2+ ATP酶活性。结 果 在诱导期各脑区Ca2+ ATP酶活性即开始下降(P<0.05);麻醉期降至最低(P<0.01);恢复期又 开始升高,但仍低于对照组水平。其中,仅脑干Ca2+ ATP酶活性降低有显著性差异(P<0.05);清醒 期基本恢复至对照组水平(P>0.05)。且行为学变化与脑Ca2+ ATP酶活性变化有关。结论 安氟醚 的麻醉效应可能与其抑制脑Ca2+ ATP酶活性相关,麻醉深浅与抑制的程度一致。

中药防治硫酸镍对Ca^(2+)-ATP酶及钙调素活性抑制的实验研究

目的 扶正解毒汤 (FJD)防治硫酸镍 (NiSO4 )对大鼠肝线粒体Ca2 + ATP酶及钙调素 (CaM)活性的抑制作用。方法 Wistar大鼠NiSO4 腹腔染毒 ,FJD灌胃防治 ,14d后测定线粒体Ca2 + ATP酶及CaM的活性进行评价。结果 NiSO4 致肝脏Ca2 + ATP酶及CaM活性降低 ,FJD各防治组均有明显恢复。结论 FJD具防治NiSO4 致大鼠肝Ca2 +

锌对大鼠成骨细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活性的调节

为了研究锌对大鼠成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶和Na+ 、K+ -ATP酶活性的影响及其机制,实验设对照组和3个补锌组。采用孔雀绿比色法同步测定膜Ca2+ -ATP酶和Na+ ,K+ -ATP酶活性,以研究Zn2+ 对酶活性的影响以及蛋白激酶C或钙调素特异性抑制剂对Zn2+ 诱导的成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶活性的影响。结果表明,Zn2+ 可以显著提高成骨细胞膜Ca2+ -ATP酶活性,但对Na+ ,K+ -ATPase活性无影响;钙调素特异性抑制剂R24571对Zn2+ 诱导的Ca2+ -ATPase活性无影响,钙调素对膜Ca2+ -ATP酶基础活性也无激活作用;蛋白激酶C特异性抑制剂三氟拉嗪可使Zn2+ 诱导的Ca2+ -ATP酶的活性显著降低。因此,锌可能通过蛋白激酶C介导调节成骨细胞膜Ca2+

高等植物细胞的Ca^(2+)-ATP酶

本文对高等植物细胞的Ca2+ATP酶的分布、功能、生化特性和分子生物学等方面的研究进展作了较为系统的综述。

三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性及Ca^2＋-ATP酶活性的影响

目的观察三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-ATP酶活性的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组（空白组）、模型组、三化汤组、西药对照组（尼莫地平）、中成药对照组（血栓心脉宁）。采用双侧颈总动脉结扎方法制备脑缺血模型，脑缺血1 h后，再灌注30 min。取出各组大鼠胃组织和小肠组织各5-20 mg制成匀浆，测定ATP酶（Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶）活性。结果与空白组比，模型组胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-ATP酶活性明显降低（P〈0.01）；与模型组比，用药各组胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-ATP酶活性均明显升高（P〈0.05）；其中三化汤组胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性明显高于尼莫地平组（P〈0.05），Ca^2＋-ATP酶活性明显高于血栓心脉宁组（P〈0.05）。结论三化汤能明显升高脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-ATP酶活性，对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠损伤有一定保护作用。