2，3，5-氯化三苯基四氮唑对N80^#钢缓蚀行为的研究

用稳态极化法和交流阻抗法研究了2,3,5-氯化三苯基四氮唑对N80#钢在含H2SO3酸性溶液中发生腐蚀时的缓蚀作用及其缓蚀机理.结果表明:2,3,5-氯化三苯基四氮唑是一种以抑制阳极过程为主的缓蚀剂.其还原产物在N80#钢表面的吸附阻止了腐蚀性的酸性溶液与钢表面的接触,从而起到缓蚀作用.

2,3,5-三苯基氯化四氮唑浓度对细菌菌落总数测定的影响

目的了解2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度对细菌菌落总数测定的影响,以规范该法在食品细菌菌落总数测定中的应用。方法采用细菌定量培养的方法,观察含不同浓度TTC营养琼脂培养基对不同细菌生长形成菌落数的影响。将不同稀释度的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌纯培养物各1mL,分别依次接种到TTC质量浓度分别为0.02、0.05、0.10g/L的平板计数琼脂中,同时设空白对照和盐水试剂对照,观察菌落生长状况。结果大肠埃希菌在不同TTC浓度培养基中均能正常生长,其形成菌落数不受影响。培养基中含TTC质量浓度≥0.05g/L对金黄色葡萄球菌菌落数形成有明显影响,≥0.02g/L对蜡样芽胞杆菌的菌落数形成有明显影响。结论培养基中含TTC浓度≤0.10g/L对大肠埃希菌生长基本无影响,>0.02g/L对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌生长均会产生影响。

肉制品检验中未被0.001%2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色菌落的研究

目的鉴定1批肉制品样品中不能被2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色菌落的菌落。方法依照GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物检验菌落总数测定》和GB 29921-2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》对样品前处理后进行分离纯化,采用VITEK 2以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行检测鉴定。结果经VITEK 2和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定,肉制品样品中不能够被0.001%TTC染色的菌落分别为鲁氏不动杆菌和奇异变形杆菌。结论在出现TTC无法染色的情况下,应该采用适当的菌种鉴定方法对样品的颗粒和菌落进行详细区分,进而防止漏检和误检。

2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用研究

为了分析细菌培养指示剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用,笔者将牛支原体、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体、鸡毒支原体、肺炎支原体分别接种于含有TTC的改良Thiaucourt’s液体培养基(TTC-MTB)和改良Thiaucourt’s固体培养基(TTC-MTA)中,同时以常规酚红指示剂培养基作为对照,观察支原体在2种培养基中的生长情况,并筛选TTC在培养基中的最适指示浓度。结果显示,与常规酚红指示剂相比较,TTC有更为灵敏的培养指示效果;在固体培养基中,TTC指示的支原体红色菌落更有利于菌落的计数及形态的观察;TTC的最佳使用浓度为0.2 mg/mL。本研究可为支原体培养和优化疫苗生产工艺提供参考。

新型氯化三苯基锡(1,4-二氢-2,3-二苯基四氮唑酮)配合物的合成及其性能

以三苯基氯化锡和二苯碳酰二肼为原料,在乙醇-钠中反应合成了一个新型的氯化三苯基锡(1,4-二氢-2,3-二苯基四氮唑酮)配合物(1),其结构经FT-IR,元素分析和X-射线单晶衍射表征。结果表明:1(CCDC:1 445377)属单斜晶系,P21/c空间群,晶胞参数a=1.393 2(6)nm,b=1.097 3(5)nm,c=1.933 7(8)nm,β=110.219(9)!,V=2.77 4(2)nm3,Z=4,Dc=1.498 g·cm-3,F(000)=1 264,R1=0.028 8,wR2=0.064 6。中心Sn为五配位三角双锥构型。研究了1的荧光性质、热稳定性、电化学性质和体外抗癌活性。结果表明:1在100℃下较稳定;1在400 nm(λex=320 nm)处有弱荧光峰;c(1)=5μg·m L-1时,对He La细胞株增殖的抑制率为93.70%。

不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色方式对心肌梗死面积检测的对比

目的比较应用不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色方式对心肌梗死面积的检测结果。方法实验在中国医科大学完成,采用Langendorff离体心脏灌注装置建立全心缺血模型。将20只健康SD大鼠（雌雄不拘、2周龄,体重250~300 g）按随机数字表法分为两组,每组10只。A组：TTC经主动脉根部直接灌注,B组：心脏切片后染色。两组鼠心均平衡10 min,阻断灌注30 min,复灌30 min。染色后观察心肌切片改变,计算心肌梗死面积。结果 A组和B组均能很好地对梗死心肌进行标记,且两组心肌梗死面积差异无统计学意义（45.80%±6.07%vs.47.40%±6.80%,P〉0.05）;A组心肌组织切片平整,颜色对比更明显,计算面积较准确,形态美观;而B组心肌组织切片凸凹不平,较难进行后续处理,计算面积不准确,形态不美观。结论 TTC染色是一种较为经济、快捷检测心肌梗死范围的染色方法,且经主动脉根部直接灌注染色法较心脏切片后染色法更简单、易操作,节省费用,染色效果好,染色后标本更平整、美观,有利于拍照和计算心肌的梗死面积。

利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)测定细胞活力的方法与应用

目的：利用细胞内脱氢酶对2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）的催化作用建立比目前常用的3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2，5-二苯基溴化四氮唑（噻唑蓝，MTT）法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力，并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上，通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较，分析该方法的可行性。结果0．5％～1．0％浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力，测定值与细胞数量之间存在线性关系，与MTT法得到的结果基本一致，可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力，可替代常规的MTT法，具有操作简便，费用经济，结果可靠等优点。

2,3,5-三苯基氯化四氮唑在增菌液中的应用研究

目的确立2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)在增菌液中,对不同的细菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。方法用金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌配制不同的菌液浓度,分别加到含1.0 mg/ml琼脂粉的普通营养肉汤增菌液中(副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水代替普通营养肉汤),再加入不同量的10.0 mg/ml TTC储备液,记录TTC对各菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。结果在菌量30～300 cfu/ml时,金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌开始被抑制和被完全抑制时的TTC浓度分别为0.02、0.1、0.2、0.6、0.6、0.1 mg/ml和0.1、0.7、0.5、>2.0、>2.0、0.2 mg/ml。结论检测样品时,在增菌液中加入1.0 mg/ml的琼脂粉和适量的TTC可提高致病菌的检出率,可直观样品中细菌数量。选择含不同TTC浓度的增菌液,可选择性地进行筛选增菌,进一步提高检出率。

^(131)I标记番泻苷A在正常小鼠体内分布和评价心肌活性研究

采用Iodogen法标记番泻苷A得到131I标记番泻苷A溶液,并研究131I标记番泻苷A在小鼠体内分布和用于检测坏死心肌细胞的可行性。将标记物静脉注射到正常小鼠体内,分别在给药4、24、48h后处死,测定标记物在主要脏器的分布。采用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌梗死模型,考察131I标记番泻苷A给药24h后,在主要脏器、梗死心肌上分布,并采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和磷屏自显影对心脏切片进行组织学分析。结果显示:131I标记番泻苷A在小鼠血中清除较快,肾脏的放射性摄取高。131I标记番泻苷A主要分布在大鼠的梗死心肌区域,梗死心肌与正常心肌放射性摄取比为11.9。TTC染色和磷屏自显影对比证明,131I标记番泻苷A对坏死心肌具有较强靶向性。结果表明,131I标记番泻苷A能选择性的在大鼠坏死心肌区域聚集,在心肌梗死诊断方面具有较好的开发前景。

建立24h快速病原菌检测系统的研究

目的建立24h快速病原菌鉴定及快速药敏常规检测系统，为临床及时诊疗与控制医院感染提供病原菌学依据。方法采用旋转恒温箱替代普通恒温箱；在增菌培养瓶和药敏平板中加入氯化-2，3，5-三苯基四氮唑（TTC）、琥珀酸盐；加大病原菌生化鉴定管反应底物浓度的同时，增加病原菌接种量。结果阳性培养显示时间比在普通恒温箱及常规培养液中显著缩短（x^2=74．92，P〈0．01）；加大菌液浓度，4～5h可获得明显菌落，12h内获得病原菌鉴定结果，2～5h得出可靠药敏结果。结论通过方法学的改进，经过4年的实验室证实，大部分标本均能获得可靠的培养结果，说明在24h之内，快速病原菌鉴定及药敏检测系统可以为临床诊疗和控制医院感染及时提供科学的实验室依据。

MCAO模型大鼠不同缺血时相、不同脑区Thrombin与LC3Ⅱ/Ⅰ表达的相关性研究

目的研究缺血性中风瘀毒互结模型(简称“IS-YD”)大鼠在不同缺血时相、不同脑区凝血酶(Thrombin)与微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)的动态性变化及二者的相关性。方法将128只SD雄性大鼠随机分为假手术组、IS-YD(2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、72 h)组,每组16只。分别于术后2、4、8、12、24、48、72 h取材前进行神经功能缺损评分,随即处死大鼠取出脑组织并分出大脑皮质与海马,2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色观察并计算每组大鼠的脑梗死体积,Western blot法检测大脑皮质与海马的Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ比值的表达。结果与假手术组相比,IS-YD 12 h、24 h、48 h组神经功能缺损评分升高(P<0.05)。与假手术组及IS-YD 2 h、4 h组相比,IS-YD 8 h、12 h、24 h、48 h、72 h组脑梗死体积显著增大(P<0.01);与IS-YD 8 h组相比,IS-YD 12 h、24 h、48 h、72 h组脑梗死体积显著增大(P<0.01);与IS-YD 12 h组相比,IS-YD 48 h、72 h组脑梗死体积显著增大(P<0.01);与IS-YD24 h组相比,IS-YD 48 h、72 h组脑梗死体积显著增大(P<0.01);与IS-YD 48 h组相比,IS-YD 72 h组脑梗死体积显著增大(P<0.01)。与假手术组相比,IS-YD 12 h、24 h组皮质和海马Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增强(P<0.05);与IS-YD 2 h、4 h组相比,ISYD 12 h、24 h组皮质和海马Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增强(P<0.05);与IS-YD 8 h组相比,IS-YD 12 h、24 h组皮质LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增强(P<0.01);与IS-YD 12 h组相比,IS-YD 48 h、72 h组皮质Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低(P<0.05),海马LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低(P<0.05);与IS-YD 24 h组相比,IS-YD 48 h、72 h组皮质和海马Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低(P<0.05)。两种蛋白呈现直线相关性,且皮质Thrombin与LC3Ⅱ/Ⅰ的密切程度为56.7%,海马Thrombin、LC3Ⅱ/Ⅰ的密切程度为53.3%。结论脑损伤后Thrombin与自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ在7个不同缺血时间点动态表达规律相似,并且具有高度相关性,同时明确了自噬变化最明显的两个时间点,也为进一步研究治疗脑梗死筛选了最佳药物反应时间点。

H_2受体介导组胺对大鼠海马缺氧缺糖诱导细胞水肿及活性降低的保护作用

目的探讨组胺对海马脑片缺血诱导细胞水肿及活性降低的作用，以及与受体亚型的关系。方法大鼠海马脑片以缺氧缺糖（OGD）诱导缺血损伤后，实时检测CA1区透光度变化评价细胞水肿；并测定2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）产物甲腊，评价脑片活性。观察不同浓度组胺的作用，以及组胺受体拮抗剂对组胺作用的影响。结果组胺（0．01—10μmol·L^-1）明显抑制OGD诱导的海马脑片透光度增加，并提高脑片活性。H1受体拮抗剂苯海拉明（0．1—10μLmol·L^-1）不影响组胺的作用，H2受体拈抗剂西咪替丁（0．1～10μLmol·L^-1）则部分拮抗组胺的保护作用。结论组胺对大鼠海马脑片缺血诱导细胞水肿及活性降低有保护作用，该作用与H2受体有关。

用TTC与INT-电子传递体系活性表征重金属对污泥活性的影响

研究了不同浓度的Cu2 + 、Zn2 + 、Cd2 + 、Hg2 + 、Ni2 + 、Pb2 + 和Ag+ 对污泥TTC和INT 电子传递体系活性产生的影响 ,比较了这 2个参数在表征污泥活性受重金属抑制时的灵敏性 .结果表明 ,各种重金属抑制污泥TTC 电子传递体系活性的IC50 小于抑制INT 电子传递体系活性的IC50 ,TTC 电子传递体系活性反映重金属毒性作用的灵敏性大于INT 电子传递体系活性 .实验的重金属离子呈现出不同的毒性作用 ,以TTC 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Cd2 + >Cu2 + >Ag+ >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + ,以INT 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Ag+ >Cu2 + >Cd2 + >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + .

芹菜素对大鼠脑缺血再灌注后的转化生长因子-β_1表达的影响

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠脑缺血再灌注后不同时间的表达变化及芹菜素对其表达的影响。方法采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注后不同时间损伤模型。随机分为假手术组、模型组、芹菜素组和地塞米松组,各手术组按再灌注时间不同又分为再灌注6 h组、24 h组、72 h组、7 d组4个亚组。各组麻醉清醒后均给予神经行为学评分,每组1只,大鼠予2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色观察脑梗死灶,6只免疫组化法测定转化生长因子-β1的表达。结果在芹菜素72 h组神经行为学评分低于模型72 h组(P<0.05);各手术组均出现白色梗死灶;缺血再灌注后TGF-β1表达增加,于24、72 h达高峰,芹菜素组能显著提高TGF-β1的表达,与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论芹菜素可增加脑缺血再灌注后TGF-β1的表达,提示芹菜素可能通过TGF-β1促进脑组织损伤的修复,达到神经损伤的保护作用。

人参细胞TTC-脱氢酶活力测定条件的优化

以人参愈伤组织为试材,采用单因子试验和L16(45)正交试验,对2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride,TTC)-脱氢酶还原法测定人参细胞活力的条件进行优化。选取TTC浓度、p H值、反应温度、反应时间作为试验中的4个因子,以吸光光度值和酶活力值为考察指标,探讨TTC-脱氢酶还原法测定人参细胞活力的最佳条件。结果表明,反应温度对人参细胞活力影响达到极显著水平(P<0.01),反应时间对人参细胞活力影响达到显著水平(P<0.1),得出人参细胞活力测定的最佳条件为TTC溶液浓度0.4%、p H 7.5、反应温度25℃、反应时间18h。

通心络对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨通心络对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法将31只雄性Wistar大鼠,根据不同给药方案随机分为24h对照组(7只)、24h通心络组(7只)、5d对照组(7只)、5d通心络组(7只)以及假手术组(3只)。各组在造模前用等渗盐水或通心络灌胃预处理7d。依据线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞90min脑缺血再灌注模型。观察不同时间点的神经功能缺失评分,计算2,3,5氯化三苯基四氮唑染色下的梗死体积。结果脑缺血再灌注24h后的梗死体积对照组为(94.4±19.9)mm3,通心络组为(72.1±13.4)mm3;神经功能缺失评分对照组为(3.3±0.6)分,通心络组为(2.6±0.6)分。再灌注5d后的梗死体积对照组为(123.9±18.6)mm3,通心络组为(100.2±12.8)mm3;神经功能缺失评分,对照组为(2.1±0.4)分,通心络组为(1.2±0.4)分,两组比较,差异均有显著意义(P<0.01～0.05)。结论通心络对大鼠大脑中动脉阻塞后的脑缺血再灌注损伤可能具有保护作用。

小鼠脑片Formazan定量测量方法评价缺血性损伤及神经保护作用

目的 建立一种定量测量 2 ,3,5 三苯基四氮唑(TTC)红色还原产物formazan的方法 ,用于评估离体脑片缺血性损伤以及依达拉奉和ONO 10 78的神经保护作用。方法 以TTC为底物在小鼠脑片生物合成formazan标准品 ,并进行分离、纯化和鉴定。小鼠脑片以缺氧缺糖 (OGD)方法诱导损伤 ,用分光光度法在 4 90nm处测量皮质和纹状体formazan合成量。依达拉奉和ONO 10 78加入培养液 ,观察其神经保护作用。结果 合成并纯化了formazan标准品 ,其纯度为 0 993,线性测量范围在 0 0 5～ 1g·L-1。OGD减少formazan合成 ,与处理时间有依赖性。依达拉奉 (0 0 1～ 1μmol·L-1)抑制OGD诱导的formazan合成减少 ,而ONO 10 78无作用。结论 定量测量formazan是一种评价离体脑片损伤及药物神经保护作用的有用方法。

降纤酶对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的作用

目的探讨降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法用线栓法将易卒中型肾血管性高血压大鼠(108只)复制成一侧大脑中动脉闭塞模型,将模型分为降纤酶组和对照组,每组各54只大鼠。给降纤酶组大鼠静脉注射降纤酶,对照组注射等渗盐水,分别在缺血3h再灌注3、6、24h,缺血6h再灌注3、6、24h进行神经功能评分并处死大鼠,每个时间点为9只大鼠,假手术组8只大鼠。用2,3,5氯化三苯基四氮唑染色,计算脑梗死范围,HE染色观察梗死灶边缘区的病理形态,同时以免疫组织化学方法检测尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)1蛋白的表达。结果降纤酶组与对照组比较,神经功能评分和梗死灶体积均降低,uPA蛋白表达均增加,在缺血3h再灌注3、6、24h和缺血6h再灌注3、6、24h,降纤酶组的灰度值分别为1.240±0.027、1.9±1.1、12±5、2.3±1.2、6.4±2.2和20±7,而对照组分别为1.320±0.043、2.2±1.0、16±7、3.8±1.6、8.3±3.7和24±10,PAI1蛋白表达均减少,并且脑出血发生率低。结论降纤酶有减轻脑缺血再灌注损伤的作用,其可能的机制是减少uPA对梗死灶边缘区微血管基底膜及细胞外间质的降解。

脱氢酶活性检测方法及应用

介绍了分别用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)以及碘硝基四唑紫(INT)等作为人工受氢体进行脱氢酶活性(DHA)检测的几种常见方法,以及它们自身在反映微生物活性等方面的优缺点。论述了TTC在DHA检测中的发展,重点讨论了TTC作为受氢体进行DHA测定过程中其标准曲线制作方法的改进,并对测定中诸多影响因素如温度、pH及萃取剂等进行了比较分析,确定了最佳实验条件。简要概括了目前DHA测定方法在废水生化处理、评价化学毒物和金属毒物的毒性、土壤污染等方面的应用。

镇江地区市售纯牛奶和生鲜牛奶中抗生素残留情况的调查

对镇江地区市售纯牛奶和奶源户生鲜牛奶中抗生素残留情况进行调查,为加强乳制品质量控制提供依据。采用TTC法(GB4789.27-2003)对鲜乳中抗生素残留进行检验,以农业部2001年9月发布的《无公害食品生鲜牛奶》行业标准中不得检出抗生素为判定标准。结果显示奶源户生鲜牛奶抗生素残留阳性率为5.86%,市售包装纯牛奶阳性率4.67%,袋装纯牛奶阳性率为4.41%,盒装纯牛奶阳性率为4.79%。镇江市售生鲜牛奶还存在一定程度的抗生素残留,建议有关卫生管理部门需加大对乳制品质量的监测力度,加强生产鲜牛奶的抗生素残留检测工作。