2β(3羟丙氧基)骨化三醇对人肝癌细胞周期阻滞及P^(27kip1)蛋白的诱导表达

目的探讨2β(3羟丙氧基)骨化三醇(ED-71)诱导人肝癌细胞HepG2生长抑制和细胞周期G1阻滞,及对抑癌基因P27kip1表达的影响。方法培养HepG2,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察ED-71对HepG2的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以Western-blot检测HepG2细胞中P27kip1蛋白的表达水平。结果ED-71处理后HepG2的生长缓慢,细胞生长受到明显抑制。细胞阻滞于G1期(80.6±2.6,48.7±3.0,P<0.05),P27kip1蛋白表达水平增强(0.11±0.06,0.67±0.08,P<0.05)。结论ED-71抑制人肝癌细胞株HepG2的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,可能与ED-71诱导人肝癌细胞中抑癌基因P27kip1蛋白的表达有关。

2β-(3-羟丙氧)-骨化三醇(ED-71)对卵巢切除小鼠骨生物力学与骨代谢的影响

目的 : 探讨合成的 2β-(3 -羟丙氧 ) -骨化三醇 (ED-71 )对卵巢切除 (OVX)小鼠骨密度、骨强度和骨代谢指标的影响。并与 1 7β雌二醇 (E2 )进行比较。方法 : 将 40只平均体重 3 5 g昆明雌性小鼠分为 4组 ,OVX组 ,假手术组 ,ED-71组 ,1 7β雌二醇 (E2 )组。后两组为 OVX小鼠 ,经 6w分别给予 ED-71 [0 .4μg/ (kg·w) ]及 E2 [3 0 μg/ (kg·d) ]后处死各组小鼠 ,测定其骨密度 (BMD)和骨矿含量 (BMC)、骨生物力学、骨形态计量学及生化指标。结果 : ED-71组和 E2 组分别与 OVX组比较 ,股骨 BMD和 BMC分别增加了 3 .8% ,5 .9%及 3 .2 % ,5 .7% ;股骨最大载荷分别增加 1 8.7%和 1 6% ;骨小梁体积分别增加 1 0 .6%和 1 6.1 % ,血清碱性磷酸酶 (ALP)分别减少 5 8%和 3 7%。结论 : ED-71可明显增加骨密度和骨矿含量及骨强度 ,降低骨转换 。

微量热法研究β-环糊精与3-烷氧基-2-羟丙基三甲基溴化铵的相互作用

在 2 98 .15K下用微量热法研究了 β 环糊精与 3 烷氧基 2 羟丙基三甲基溴化铵在水溶液中的包结作用 .实验表明 ,随着疏水链CnH2n + 1O中碳原子数目n的增加 (n =8,12 ,14 ) ,主 -客体包合物的化学计量比由 1∶1为主变为 2∶1为主 .各包合物都比较稳定 ,对应于n =8,12 ,14所得实验稳定常数分别为 :β1=1.0 8× 10 -3 dm3 ·mol-1,β1=2 8.66× 10 3 dm3 ·mol-1,β2 =14 1.9× 10 3 dm6·mol-2 .形成包合物的过程都是焓、熵共同驱动的过程 .包合物标准形成焓 (ΔH )和标准形成熵(ΔS )随着CnH2n+ 1O中碳原子数目n的增加而减小 .从主。

高分子和盐对3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基溴化铵泡沫性能的影响

测定了3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基溴化铵(C12TAB)在PVP、PEG和溴化钠存在下的泡沫性能。结果表明:含量相同时,C12TAB/NaBr混合体系的起泡性能高于C12TAB/高分子体系,而稳泡性能低于后者。含量相同的C12TAB/高分子体系,PVP对C12TAB的影响好于PEG。

3-十四烷氧基-2-羟丙基三乙基氯化铵在大庆油砂表面吸附性能

季铵盐由于其良好的性能,日益受到人们的重视,在油田、食品和日用化工等领域已得到广泛的应用。研究了地层温度下(45℃)3,-十四烷氧基-2-羟丙基三乙基氯化铵(TPAC)在大庆油砂表面的静态吸附性能,考察了液固比、吸附时间和浓度对静态吸附量的影响。结果表明,TPAC溶液在大庆油砂表面达到静态饱和吸附时:液固比为20∶1;浓度为1.84 mmol/L;吸附时间为6 h,吸附等温线为S型曲线。当TPAC的浓度达到1.10 mmol/L时,形成单分子层饱和吸附;当浓度增加至1.84 mmol/L达到双分子层饱和吸附,饱和吸附量为13.21×10-6 mol/g。研究季铵盐吸附性能为季铵盐在油田中的应用打下良好的基础。

3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基氯化铵水溶液与烷烃的动态界面张力

用旋转滴法测定了3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基氯化铵(R12TAC)水溶液与系列烷烃的动态界面张力(DIFT),考察了浓度、温度和烷烃链长对DIFT的影响,并详细表征了DIFT随时间的变化过程。根据修正的Word-Tordai方程计算了DIFT的有关参数。结果表明:R12TAC浓度越大,DIFT曲线越低,DIFT下降越快,达平衡值的时间越短;随R12TAC浓度的增大,表观扩散系数Da从2.02×10-10m-2.s-1减小到0.14×10-10m-2.s-1,吸附势垒Ea从2.60 kJ.mol-1增大到9.32 kJ.mol-1;温度升高,DIFT降低,表观扩散系数Da升高,而吸附势垒降低;固定一种表面活性剂溶液,测定R12TAC/系列烷烃溶液的动态界面张力,发现R12TAC/正己烷体系的DIFT最低,这与表面活性剂在水和油中的溶解度有关。

β-环糊精与3-十二烷氧-2-羟丙基三甲基氯化铵的包结作用

用表面张力法和电导法测定了不同温度下β-环糊精 (β-CD)与阳离子表面活性剂 3 -十二烷氧基 -2 -羟丙基三甲基氯化铵 ( R1 2 TAC)的包结作用 .结果表明 ,β-CD使 R1 2 TAC溶液的表面张力升高 ,最大可接近水的表面张力值 .β-CD与 R1 2 TAC主要形成 1∶ 1的包结物 .实验体系的表观临界胶束浓度 ( cmc* )与 β-CD呈线性关系 .2 98、3 0 3和 3 0 8K时的包结常数分别为 2 3 60、2 780和 3 0 5 0 L/mol.根据 Van' t Hoff方程计算的包结过程的热力学参数证明 。

HPLC-MS法测定大鼠血浆中白藜芦醇衍生物(E)-3，5，4′-三甲氧基二苯乙烯的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中白藜芦醇衍生物(E)-3,5,4′-三甲氧基-1,2-二苯乙烯的液相色谱-质谱法(HPLC-MS)定量分析方法。方法:血浆样品0.1 mL,经乙腈沉淀蛋白后,以 ODS Hypersil C_(18)(5 μm,250 mm×4.6 mm)为固定相,甲醇-10 mmol·L^(-1)醋酸铵(0.2%甲酸)(80:20,v/v)为流动相,流速为0.85 mL·min^(-1);采用 HPLC-MS,选择离子监测(SIM)法检测(E)-3,5,4′-三甲氧基-1,2-二苯乙烯([M+H]^+,m/z 271.3),卡马西甲([内标,M+H]^+,m/z 237.5),保留时间分别为8.9,4.0 min。结果:(E)-3,5,4′-三甲氧基-1,2-二苯乙烯的线性范围为0.01～5.0 μg·mL^(-1),r>0.999;日内、日间精密度 RSD 小于12.9%;相对回收率在94.8%～104.7%之间,最低检出限为0.005 μg·mL^(-1)结论:经方法学确证和稳定性评价,该方法成功用于大鼠血浆中(E)-3,5,4′-三甲氧基-1,2-二苯乙烯的定量测定。

4-氨基-5-(3,4,5-三甲氧基苄基)嘧啶-2-醇的合成

以化合物3-苯基氨基-2-(3,4,5-三甲氧基苄基)丙烯腈为主要原料,以甲醇钠为缩合剂,与尿素反应得目标化合物4-氨基-5-(3,4,5-三甲氧基苄基)嘧啶-2-醇,反应收率达到76.3%。经HPLC检测,纯度达98.6%。用FT-IR、1HNMR和元素分析对目标化合物的结构进行了表征。

骨化三醇对脂肪变性肝细胞三酰甘油代谢及细胞因子信号转导抑制因子-3基因表达的影响

目的研究骨化三醇对脂肪变肝细胞三酰甘油代谢及细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)基因表达的影响。方法以油酸(OA)诱导正常人肝细胞LO2脂肪变为模型,按加入骨化三醇浓度的不同(10-8、10-7、10-6 mol/L)分为三个干预组,设空白对照组。干预组先加入不同浓度骨化三醇干预24 h,之后加0.2 mmol/L的OA 24 h。检测细胞内三酰甘油(TG)、上清液谷草转氨酶(AST)含量,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞SOCS-3 mRNA的表达,多组间比较采用单因素方差分析进行数据分析。结果模型组TG[(362.43±22.20)mg/dL]、AST[(5.55±0.46)U/L]、SOCS-3 mRNA表达(4.61±0.39)均较对照组[(175.78±7.69)mg/dL、(0.63±0.33)U/L、(1.00±0.00)]明显增高(P<0.01);干预组TG分别为(286.87±16.01)、(257.16±11.73)、(209.43±27.79)mg/dL,AST分别为(4.98±0.50)、(4.23±0.36)、(3.50±0.48)U/L,SOCS-3 mRNA表达分别为(3.71±0.69)、(2.67±0.70)、(1.31±0.42),较模型组均有所下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论骨化三醇可抑制肝细胞脂肪变,其作用机制可能与骨化三醇抑制SOCS-3的表达有关。

(3-脱氢枞酰氧基-2-羟基)丙基三甲基氯化铵的合成及其表面活性

通过脱氢枞酸钠(DHANa)和3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CTA)反应,以制备(3-脱氢枞酰氧基-2-羟基)丙基三甲基氯化铵(DHAHPTMC),考察了溶剂类型、反应温度和时间及物料比对产物收率的影响,用FTIR和~1H NMR表征了产物结构,表面张力法研究了产物的表面活性。实验结果表明,当CTA与DHANa物质的量比为3.0,异戊醇为反应溶剂,在回流条件下反应12.0h,DHAHPTMC的收率可达82%;研究结果还表明,DHAHPTMC的临界胶束浓度(cmc)为4.25×10^(-3)mol/L,cmc时对应的表面张力(γ_(cmc))为38.62 mN/m,能够实现的最低表面张力(γ_(min))在36.6mN/m左右。

十二烷氧基羟丙基三甲基氯化铵及复配体系泡沫性能的测定

测定了3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基氯化铵(C12TAC)在高聚物存在和不同温度下的泡沫性能.结果表明PVP使C12TAC的泡沫性能增强.起泡和稳泡的效率及效能提高近一倍.C12TAC在30℃时的起泡性和稳泡性最好.

1,25(OH)_(2)D_(3)通过Bcl-2/Bax/cleaved caspase-3凋亡机制抑制小鼠气道平滑肌细胞的增殖

目的探讨1,25(OH)_(2)D_(3)对过氧化氢(H_(2)O_(2))刺激的小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)的抗增殖及促凋亡作用,并分析其在Bcl-2/Bax/cleaved caspase-3凋亡机制发挥的调控作用。方法体外培养小鼠气道平滑肌细胞,再用不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的H_(2)O_(2)刺激细胞增殖,作用不同时间(12、24、48、72 h),探索H_(2)O_(2)最佳作用浓度和时间。接着将ASMCs分为对照组、H_(2)O_(2)组、1,25(OH)_(2)D_(3)、H_(2)O_(2)+1,25(OH)_(2)D_(3)4组进行培养,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组ASMCs增殖活性的变化,并用流式细胞仪检测其凋亡情况。并用蛋白印迹法检测各组Bax、Bcl-2及cleaved caspase-3蛋白的表达情况。结果H_(2)O_(2)刺激小鼠气道平滑肌细胞增殖的最佳作用浓度和时间分别为25μmol/L和24 h。1,25(OH)_(2)D_(3)干预能明显降低ASMCs增殖能力,并增加其凋亡率。H_(2)O_(2)+1,25(OH)_(2)D_(3)组细胞凋亡率为21.9%(对照组细胞凋亡率为7.1%,H_(2)O_(2)组细胞凋亡率为4.8%),差异具有统计学意义(P<0.01)。1,25(OH)_(2)D_(3)干预后,蛋白印迹法结果显示ASMCs的Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高,Bcl-2表达水平下降。结论1,25(OH)_(2)D_(3)能抑制H_(2)O_(2)刺激ASMCs的增殖,并促进其凋亡,其机制与Bax/Bcl-2/ccleaved caspase-3凋亡通路有关。

1,25(OH)_2D_3在牙乳头干细胞成骨分化中的作用

目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养儿童牙乳头干细胞,培养基中添加1,25(OH)2D3,使其终浓度分别为1、10和100 nmol/L,另设对照组加入等体积生理盐水。采用噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,Western blot法检测维生素D受体(VDR)、核因子-κB受体活化剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)蛋白表达水平。采用siRNA技术沉默VDR表达后(siR-VDR组),检测其对RANKL和OPG蛋白表达的影响。结果对照组及1、10、100 nmol/L 1,25(OH)2D3组增殖指数(PIx)分别为49.78±2.03、50.14±1.55、48.81±1.91和48.56±2.15,不同浓度1,25(OH)2D3对牙乳头干细胞的增殖无明显作用(F=3.174,P>0.05)。对照组牙乳头干细胞中可见一定水平VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达;加入1,25(OH)2D3后,VDR、RANKL和OPG蛋白表达水平均有不同程度升高,其中以VDR上升趋势最为显著;转染siR-VDR后,VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达水平下降。结论 1,25(OH)2D3通过调节VDR水平影响牙乳头干细胞向成骨细胞方向的分化过程。

维生素D受体在1,25(OH)_2D_3调节人骨肉瘤细胞系HOS-8603增殖中的作用

目的 :研究维生素D3受体 (VDR)在 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用RT -PCR和免疫组织化学技术分别在mRNA和蛋白水平上明确HOS - 860 3细胞中是否有VDR表达 ;瞬时转染VDR报告基因技术观察HOS - 860 3细胞中VDR的功能活性 ;并进一步利用稳定表达VDR反义mRNA的细胞株VDRas3细胞研究VDR被阻断后细胞增殖以及基因转录的变化。结果 :HOS - 860 3细胞有VDR表达 ,此内源性VDR具有激素依赖性的转录激活活性。在内源性VDR被阻断后 ,1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对细胞增殖的抑制作用以及对VDR的靶基因p2 1mRNA表达的诱导作用均明显减弱。结论 :1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对HOS -860 3细胞增殖抑制作用是由VDR介导的。

活性维生素D3干预保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用机制

背景:活性维生素D3在2型糖尿病及其并发症发生发展中发挥着重要的调节作用。目的:探讨活性维生素D3干预保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用及其机制。方法:将35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和维生素D3干预组,后2组高脂高糖饮食并腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。维生素D3干预组予以0.03μg/(kg·d)的骨化三醇灌胃(溶于花生油),正常对照组和糖尿病模型组以花生油灌胃。8周后麻醉处死,分离血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油,计算稳态模型胰岛素抵抗指数;留取肝组织,行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR。结果与结论:1与糖尿病模型组相比,维生素D3干预组仅有三酰甘油、稳态模型胰岛素抵抗指数下降(P<0.05)。2与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠肝细胞肿胀、脂肪变性伴炎细胞浸润,JNK和C-Jun及其磷酸化形式的蛋白表达、JNK和C-Jun及其下游的肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的m RNA表达均升高(P<0.05);维生素D3干预组肝细胞肿胀及脂肪变性减轻,炎细胞浸润减少,同时上述全部因子的表达亦低于糖尿病模型组(P<0.05)。3结果证实,维生素D3保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用机制可能与其下调JNK/C-Jun信号通路有关。

C_8TAB/正丁醇/水三元体系的相行为研究

在25℃下,绘制了3-辛烷氧基-2-羟丙基三甲基溴化铵(C8TAB)正丁醇/水体系的三元相图。用电导法测定了微乳液区域内的变化过程。在液晶区域内选取一系列样品点,用偏光显微镜拍摄了相应的照片,研究了该体系的液晶结构特点。结果表明:随着含水量增加,该体系从层状→层状与六角状液晶共存→六角状→层状、六角状和立方状液晶共存→立方状液晶→层状向微乳液过渡。

阳离子表面活性剂/醇/水三元体系液晶的研究

在25℃时绘制了阳离子表面活性剂3辛烷氧基2羟丙基三甲基溴化铵(R8TAB)/正丁醇/水的三元体系的相图,在偏光显微镜下发现该体系中的某些区域呈现出彩色液晶。一些绚丽的彩色照片清楚地显示了不同的液晶纹理。用2HNMR和小角X衍射与纹理照片对照,确定了该体系的液晶结构类型,用差示扫描量热法证实了液晶结构的转化。研究分析了液晶层厚度、温度和时间对液晶颜色变化的影响,结果表明,液晶膜厚度是产生颜色的关键因素。

R_(12)TAB/苯甲醇/水体系混合胶束的微观结构研究

绘制了3-十二烷氧基-2-羟丙基三甲基溴化铵(R12TAB)/苯甲醇/水体系的三元相图,采用1HNMR方法研究了该体系胶束的微观结构,与电导法对照确定了W/O型胶束、O/W型胶束和油水双连续结构存在的区域,通过1HNMR谱图分析了苯甲醇在各胶束中的增溶位置。结果发现:苯甲醇主要增溶在胶束的栅栏层中,极性头靠近胶束界面,但由于不同胶束所处的微环境不同,苯甲醇沿烃链的分布也不相同。