UPLC-PDA-MS-ABTS阳离子自由基在线分析藤茶的抗氧化活性成分

采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-质谱-2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基在线法对藤茶中的抗氧化活性成分进行定性鉴别;以Trolox为对照品,采用标准曲线法,对藤茶中的主要成分二氢杨梅素的抗氧化活性进行定量分析。结果表明,从藤茶中共鉴定出4个化合物,其中主要抗氧化活性成分为二氢杨梅素;对市售12批藤茶样本进行抗氧化活性分析,其中产于湖北恩施和福建武夷山的样本抗氧化活性最高。所建定量分析方法快捷、稳定、可靠,可用于藤茶样本的在线抗氧化分析。

改良的DPPH与ABTS自由基法评价不同葡萄籽油抗氧化能力

本研究采用改良的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl,DPPH)法和2,2'-联氮双-(3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸)二胺盐[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]法测定不同方法提取葡萄籽油极性部分、非极性部分及全油的抗氧化能力,测定不同葡萄籽油多酚含量,研究多酚与葡萄籽油极性部分抗氧化能力的相关性。热榨毛油与溶剂法毛油在经过精炼后多酚含量和抗氧化能力显著降低;在溶剂法精炼油、热榨法精炼油、低温压榨油、超临界CO_2萃取葡萄籽油中,低温压榨油极性部分清除DPPH与ABTS自由基的能力最强,低温压榨油的多酚含量最高,超临界CO_2萃取葡萄籽油非极性部分与低温压榨油全油的DPPH与ABTS自由基清除能力最强;各不同葡萄籽油总酚含量与极性部分DPPH和ABTS自由基的清除能力具有显著的正相关性。

DPPH·和ABTS+·比较研究毛建草多酚、黄酮和多糖的抗氧化协同作用

[目的]毛建草是一种具有茶香的地方经济作物,含有丰富的抗氧化成分,本研究旨在为开发其食用产品提供充分的理论依据。[方法]分别采用水提醇沉、超声辅助提取和水醇浸提法等提取毛建草多酚、黄酮和多糖,测定3种组分对DPPH·和ABTS^(+)·的清除作用;Isobologram分析法通过比较混合组分对DPPH·和ABTS^(+)·的实际IC_(50mix)与理论IC_(50add)值的偏差、作用指数γ,识别其协同作用,并比较2种方法的异同。[结果]3种组分对2种自由基都有显著的清除作用,清除能力:多酚>黄酮>多糖,但ABTS^(+)·法反映出来的组分对自由基的清除能力明显优于DPPH·法。两两复配后,复配组分对DPPH·或ABTS^(+)·的清除都显示出协同作用,且均在组分比1∶1效果最佳。比较DPPH·和ABTS^(+)·的作用指数γ值,两者差异不显著。即在反映协同效应方面,ABTS^(+)·并不比DPPH·更具优势。[结论]DPPH·和ABTS^(+)·清除率的测定为研究单组分或组分协同抗氧化作用提供了参考,复配产品的协同效应为开发毛建草混配产品提供了试验依据。

近红外光谱结合偏最小二乘回归所建模型快速预测雪菊的抗氧化活性

将10批不同产地的雪菊样品自然干燥,粉碎,过筛,分取0.2 g,加入50 mL 35%(体积分数)甲醇溶液,静置过夜,超声处理30 min,抽滤,收集滤液,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法测定雪菊的抗氧化活性(参考值)。利用近红外光谱仪对100个雪菊粉末样品分别进行光谱扫描,采用近红外积分球漫反射模式进行光谱采集,分别采用标准正态变量(SNV)+连续小波变换(CWT)和CWT对原始近红外光谱数据进行预处理,结合偏最小二乘回归(PLSR),在4767~4960 cm^(-1)、5153~6966 cm^(-1)、7120~8813 cm^(-1)波段内建立DPPH抗氧化活性模型,在5153~7081 cm^(-1)、7660~8624 cm^(-1)波段内建立ABTS抗氧化活性模型。结果表明:DPPH抗氧化活性模型的交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.772,相关系数(R)为0.948,预测残差值(RPD)为3.17;ABTS抗氧化活性模型的RMSECV为0.365,R为0.884,RPD为2.52。利用模型预测雪菊样品的DPPH和ABTS抗氧化活性,预测值和参考值基本一致,并且DPPH抗氧化活性模型的预测均方根误差(RMSEP)为0.705,ABTS抗氧化活性模型的RMSEP为0.377。

3种检测方法比较忍冬药用和非药用部位的抗氧化活性

目的:分析和比较忍冬药用部位(金银花和忍冬藤)和非药用部位(忍冬叶)的体外抗氧化活性,为忍冬非药用部位——忍冬叶的综合利用和产品开发提供科学依据。方法:分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法和铁离子还原能力(FRAP)微量法测定45份金银花、忍冬叶和忍冬藤样品的抗氧化活性,并分别采用描述性统计、直观分析、系统聚类分析(HCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等统计学方法进行数据处理和挖掘。结果:3种方法测定的抗氧化活性结果基本相似,测定结果具有较高的可信度。不同产地的金银花、忍冬叶和忍冬藤抗氧化活性大小:连云港≥河南>山东(金银花);连云港>河南>山东(忍冬叶);河南≥山东≥连云港(忍冬藤)。忍冬藤的抗氧化活性较弱,金银花和忍冬叶的抗氧化活性较强。金银花和忍冬叶的抗氧化活性大小因其产地不同而存在差异:忍冬叶≈金银花(河南),忍冬叶>金银花(连云港),忍冬叶<金银花(山东)。HCA和PLS-DA分析将45份样品分为2个组别,其中忍冬藤为一组,金银花和忍冬叶为另一组。忍冬藤的抗氧化活性明显不同于金银花和忍冬叶,而金银花和忍冬叶的抗氧化活性则较为相近。结论:忍冬植物的非药用部位——忍冬叶资源丰富,其抗氧化活性比忍冬藤强,与金银花相当,极具综合利用价值和产品开发潜能。

玫瑰花苞抗自由基能力的检测

对玫瑰花苞抗多种自由基能力进行检测。通过正交试验分析溶剂浓度、料液比、处理时间以及提取温度等对玫瑰花苞提取物清除自由基能力的影响。结果表明玫瑰花苞浸出液对DPPH·(2,2-二苯代苦味酰基苯肼)、ABTS+·(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)的清除率可达90%以上,对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率随处理条件变化明显,对羟基自由基(·OH)的清除率低于10%。对4种自由基的清除能力从大到小依次为:ABTS+·、DPPH·、O2-·、·OH。玫瑰花苞提取物对各种自由基具有清除能力。

生姜抗自由基能力的检测

对生姜抗多种自由基能力进行检测。通过单因素试验和正交试验分析不同辅助处理方式(微波、超声、普通浸提)、溶剂种类、溶剂浓度、料液比、处理时间以及提取温度等对生姜提取物清除自由基能力的影响。结果表明:不同处理的生姜提取物均对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)有明显的清除作用,对羟基自由基(HO·)的清除作用较小,对超氧阴离子自由基(O2-·)几乎没有清除作用。并且有机浸提溶剂对羟基自由基及超氧自由基具有清除作用。生姜提取物对各种自由基清除能力的大小依次为:ABTS+·﹥DPPH·﹥HO·。

金银花抗自由基能力的检测

对金银花抗多种自由基能力进行检测。通过正交试验分析溶剂浓度、料液比、处理时间以及提取温度等对金银花提取物清除自由基能力的影响。不同处理的金银花提取物均对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)有明显的清除作用,对羟基自由基(HO·)的清除作用较小。金银花提取物对各种自由基具有清除能力。

二氧化硫抗氧化能力及其在干果中的含量分析

在前期干果品质分析时,发现部分干果的抗氧化能力异常,推测可能与二氧化硫有关。因此,该文采用了二苯代苦味酰基自由基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、2,2-联氮-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基[2,2-diamine-(3-ethyl benzothiazolin-6-sulfonic acid)diammonate,ABTS]、铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power,FRAP)和氧自由基清除能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)4种方法分析二氧化硫的抗氧化能力,同时测定8种新疆常见干果的二氧化硫含量。试验结果:在试验浓度范围内,二氧化硫具有一定抗氧化能力,1 mg二氧化硫相当于1μmol～2μmol 6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸(6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid,Trolox)的抗氧化能力。此外,二氧化硫浓度与抗氧化能力呈线性相关,其中ORAC法的抗氧化能力最好(R^2=0.998 4);在8种干果中,黄提、枸杞、吊干杏、大无花果和小无花果中检出二氧化硫,其中,黄提(1.45 g/kg DW)和枸杞(0.18 g/kg)二氧化硫超过国家限量标准。这说明二氧化硫可能是导致部分干果抗氧化能力异常高的主要原因,因此在样品分析时,应考虑二氧化硫对样品指标的影响。

运用多维在线高效液相色谱-生物化学检测方法筛选银杏叶提取物治疗老年痴呆疾病的药效成分

目的建立高效液相色谱-生物化学检测(HPLC-BCD)多维在线联用分析方法,筛选银杏叶提取物治疗老年痴呆疾病(Alzheimer disease,AD)的药效成分。方法运用HPLC-UV(紫外)-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼/2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(DPPH/ABTS)、HPLC-UV-乙酰胆碱酯酶(Ach E)方法快速筛选银杏叶提取物中的自由基清除剂和Ach E抑制剂。以加兰他敏为阳性对照,考察在线HPLC-UV-Ach E方法的稳定性和重现性。运用超高效液相色谱(UPLC)-LTQ/线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱(orbitrap MS)(UPLC-LTQ/orbitrap MS)方法鉴定主要活性成分。结果 HPLC-UV-DPPH/ABTS方法检测到银杏叶提取物中的14个强抗氧化成分,而运用HPLC-UV-Ach E方法发现了3个Ach E抑制剂,通过UPLCLTQ/orbitrap MS方法鉴定了3个酶抑制剂分别为4-O-beta-glucopyranosyl-cis-coumaric acid、ginkgolide A和3-O-[2-O-(β-D-glucosyl)-α-L-rhamnosyl]quercetin。结论实验建立的在线HPLC-BCD方法具有良好的灵敏度、重现性和稳定性,能够快速筛选银杏叶提取物中的抗氧化剂和Ach E抑制剂。为快速发现中药治疗相关疾病的有效成分提供一种有效、快速、便捷的分析手段。

3种不同类型黄酒抗氧化作用比较研究

目的比较3种不同类型黄酒的抗氧化作用。方法测定了3种不同类型黄酒中总酚含量,采用二苯苦味酰肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法、2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]法、邻苯三酚自氧化法及羟自由基抑制法对3种不同类型黄酒的清除自由基活性进行比较。结果传统型、清爽型和特型黄酒中总酚含量分别为254、185、205mg/L。传统型黄酒对DPPH自由基、ABTS·^+自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为63.2%、63.8%和58.6%,清爽型对上述3种自由基的清除率分别为28.9%、25.8%和22.7%,特型黄酒对这3种自由基的清除率分别为45.9%、35.9%和34.7%。传统型、清爽型和特型黄酒对羟自由基的抑制率分别是38.6%、18.2%和24.1%。结论 3种不同类型黄酒对DPPH自由基、ABTS·^+自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基均具有较强的清除作用,其中,传统型黄酒抗氧化能力最强。

响应面法优化超声提取益母草中多酚工艺及其抗氧化作用研究

目的:优选出益母草中多酚提取工艺,并对其进行抗氧化活性研究。方法:在单因素实验基础上,以没食子酸标准品为对照,以乙醇浓度、料液比、超声时间为自变量,以益母草多酚得率为响应值,运用响应面法优化超声辅助提取工艺参数;并通过DPPH、ABTS自由基法研究益母草多酚体外抗氧化作用。结果:益母草中多酚最优工艺为:乙醇浓度42%,料液比1∶8(g/mL),超声时间15 min,此时得率为3.78%,与理论得率3.82%,相差0.04%,工艺稳定、可行,可用于益母草中多酚提取。抗氧化实验可知,益母草多酚和维生素C对DPPH、ABTS的清除率均随二者在测试浓度(4~14 mg/mL)范围内正相关;当浓度为14 mg/mL时,维生素C和益母草多酚对DPPH的平均清除率分别是89.34%和75.96%,差异不明显;对ABTS的平均清除率分别是79.52%和61.81%,差异在高浓度时较为显著。结论:益母草多酚具有一定的抗氧化作用。该研究为益母草资源广泛开发提供参考。

川黄连黄酮类成分抗氧化活性研究

文章探究川黄连中黄酮类成分的抗氧化性能,采用正交实验设计法优化川黄连中黄酮类成分的提取工艺,并考查总黄酮提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS+·)的清除率;提取川黄连中总黄酮的最佳工艺条件为:75%乙醇、料液比1∶15(g/mL)、回流提取时间1.5 h。在该工艺下,川黄连中黄酮的总含量为0.6768%。质量浓度分别为0.0036~0.02875 mg/m L、0.02875~0.2300 mg/mL,川黄连总黄酮对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力明显强于VC。川黄连总黄酮对两者均有较好的清除能力,且在一定浓度内体外抗氧化活性明显强于VC。从而得出川黄连黄酮类成分具有一定抗氧化能力的结论,说明生物碱之外的其他化学成分有较好的开发价值,本文为川黄连抗氧化活性的深入研究及开发利用提供了一定的参考。

广林9号桉叶多酚抗氧化活性研究

采用不同极性有机溶剂对广林9号桉叶提取物进行系统萃取分离,用福林-酚法测定各组分的总酚含量,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、还原能力3种体外抗氧化活性方法测定了桉叶各组分的抗氧化活性。结果表明,不同萃取组分中,乙酸乙酯组分总酚含量最高,达到502.67mg/g;其对DPPH自由基和ABTS+.的清除能力和还原能力也最强,优于阳性对照物茶多酚,其清除两种自由基的IC50分别为0.097mg/mL和0.034mg/mL;通过总酚含量与抗氧化活性比较发现,其抗氧化活性与总酚含量成正相关,由此判断桉叶提取物的抗氧化活性成分主要为多酚类物质;桉叶粗提物中多酚含量达到30%以上,与茶叶粗提物中多酚含量相当,具有开发意义。

4种蜂花粉油脂抗氧化活性研究

采用ABTS.+清除、DPPH自由基清除、磷钼络合物法3种体外抗氧化方法,以天然抗氧化剂VE(α-生育酚)作为对照,评价并比较五味子、芝麻、玉米和蚕豆蜂花粉油脂的抗氧化活性。结果表明:4种蜂花粉油脂对ABTS.+和DPPH自由基均具有清除能力,但清除能力存在极显著性差异(P<0.01),IC50值分别在0.029～0.708mg/mL和0.059～2.203mg/mL之间;在磷钼络合物法中,抗氧化活性为五味子>玉米、蚕豆>芝麻。在3种抗氧化方法中五味子蜂花粉油脂的抗氧化能力最强,与天然抗氧化剂VE相当。

联用技术在自由基清除物筛选中的应用

越来越多的研究表明自由基与人类的生命活动和疾病发生有着密切的联系,自由基清除物筛选技术逐渐成为了医药领域中研究的热点问题之一,尤其是基于在线联用筛选技术的研究得到了迅速发展。采用联用技术筛选自由基清除物,主要是指将具有分离功能的色谱技术同各种自由基的直接或间接检测技术相结合,形成各种集化学分离与自由基清除活性检测为一体的快速分析方法,从而克服了传统研究方法先分离化学物质再进行活性评价的费时、费力的缺点。相对于离线检测方法,在线检测技术操作简便、检测速度快、自动化程度高、方法稳定规范、易于推广。主要对化学发光体系、HPLC-DPPH体系、HPLC-ABTS体系等常用于联用技术的自由基清除体系进行原理及应用的综述,并对联用技术在自由基清除物筛选中的应用进行了展望。

酪醇酯类衍生物的合成及生物活性

以酪醇为原料,对其醇羟基进行了结构修饰,合成了25种酪醇衍生物.化合物的结构经核磁共振波谱和高分辨质谱分析确证.体外抗氧化实验结果表明,在实验浓度下大部分化合物表现出一定的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除活性,化合物3k和3y具有良好的DPPH清除活性,其中化合物3y的清除活性高于对照药奎诺二甲基丙烯酸酯(Trolox);在实验浓度下大部分化合物表现出一定的2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)清除活性,化合物3k,3x和3y具有良好的ABTS清除活性,其中化合物3y的清除活性高于Trolox;在实验浓度下大部分化合物对铁离子-2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪(Fe3+-TPTZ)复合物表现出一定的铁离子还原抗氧化能力(FRAP),化合物3k,3w和3y具有良好的Fe3+-TPTZ复合物还原能力,其中化合物3y的还原能力高于Trolox.

五峰绿茶的体外抗氧化活性研究

对湖北五峰生产的绿茶总提物的抗氧化活性进行研究。通过测定五峰绿茶总提物的还原能力、对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS+]自由基以及超氧阴离子的清除能力、对酪氨酸酶活性的抑制能力,探讨绿茶的体外抗氧化活性。绿茶提取物对DPPH自由基的最大清除率为92.479%,IC50为50.561μg/mL;对ABTS+自由基的最大清除率为99.971%,IC50为8.811μg/mL;最大还原力为96.303%,IC50为87.548μg/mL;对超氧阴离子的最大清除率为57.343%,IC50为196.095μg/mL;对酪氨酸酶的相对抑制率为36.259%。表明五峰绿茶具有良好的体外抗氧化和一定的酪氨酸酶活性抑制能力。

黑小麦麸皮抗氧化活性成分提取及其抗氧化能力评价

黑小麦麸皮是黑小麦加工过程中的副产物,其富含多种生理活性物质,包括花青素、酚酸类物质、膳食纤维等。以黑小麦麸皮为原料,利用不同溶剂对其抗氧化活性成分进行提取并对其抗氧化能力评价研究。结果表明,75%乙醇提取物干物质得率最高,为10.72%;50%乙醇提取总酚含量最高,为2.9 mg/100 mL;50%乙醇提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除力最强,75%乙醇提取物对DPPH抗氧化物提取能力最强;75%丙酮提取物对2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)清除力最强,75%甲醇提取物对ABTS抗氧化物提取能力最强。综合比较得出,50%乙醇更适于黑小麦麸皮抗氧化活性成分提取。

不同溶剂对鸡骨草的提取和体外抗氧化活性研究

研究了鸡骨草提取物的抗氧化活性。以质量分数为95%乙醇、丙酮和乙酸乙酯为溶剂分别对鸡骨草进行浸泡提取,采用紫外分光光度法测定所得提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率、2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除率和铁离子还原能力。