2'-5'寡聚腺苷酸合成酶的抗病毒作用及机制研究进展

2'-5'寡聚腺苷酸合成酶(OAS)是干扰素诱导产生的重要抗病毒蛋白,可利用细胞内游离的三磷腺苷合成2',5'-磷酸二酯键连接的寡聚腺苷酸(2-5As),后者活化核糖核酸酶L(RNase L),进而抑制DNA病毒和RNA病毒感染。OAS也是细胞内识别病毒双链核糖核酸(dsRNA)的模式识别受体,能够识别具有一定长度或基序特征的病毒dsRNA分子,避免自身免疫应答产生,维持细胞稳态。本文对活化OAS蛋白的dsRNA特征、活化机制、OAS的抗病毒作用以及病毒逃逸OAS-RNase L通路的作用机制进行总结,以期为后续研究提供参考。

抗粘病毒1和2′5′-寡腺苷酸合成酶1基因与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞中抗粘病毒1(MX1)基因和2′5′-寡腺苷酸合成酶(OAS)1基因的实时定量表达水平与SLE临床表现及病情活动度的相关性。方法收集50例SLE患者,20例非SLE其他自身免疫性疾病患者,25例健康对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并逆转录成cDNA,运用SYBR green dye I实时定量聚合酶链反应(QT-PCR)在ABI PRISM 7000基因测序仪上检测患者和对照组的MX1和OAS1定量表达水平(以ΔCt值表示)的差异,并与各临床指标及病情活动度进行相关性分析。结果①SLE患者总体的MX1 mRNAΔCt值(3.55±1.39)高于非SLE患者组(2.31±0.52,P=0.000)和正常人(2.23±1.05,P=0.000)。②SLE患者组的OAS1 mRNAΔCt值(4.45±1.56)高于非SLE患者组(3.03±0.76,P=0.000)和正常人(2.75±0.64,P=0.000)。③SLE患者组的OAS1 mRNAΔCT值与SLEDAI积分之间有相关性(r=0.338,P=0.019),与血浆IgA水平有相关性(r=0.475,P=0.001)④SLE患者组的MX1 mRNAΔCT值与SLEDAI积分之间无相关性(r=0.064,P=0.661),与甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)2、4 h尿蛋白均有相关性(r=0.428,P=0.003;r=0.383,P=0.009;r=0.394,P=0.007;r=0.316,P=0.025)。⑤在有关节炎的SLE患者中,其MX1和OAS1表达水平升高更明显(3.04±1.42,P=0.004;3.89±1.49,P=0.006)。结论MX1与OAS1在SLE患者中均有表达上调现象,OAS1 mRNA实时表达定量水平对SLE患者的病情活动度判断有意义。二者作为Ⅰ型干扰素诱导表达的基因在SLE发病中均有各自作用。

HBV感染患者2′,5′寡腺苷酸合成酶、IL-2和IL-12水平检测及意义

目的:选用2′,5′寡腺苷酸合成酶(2-5OAS)作为干扰素观察指标,IL-2、IL-12作为Th1应答观察指标,了解内源性干扰素系统和Th1应答在HBV感染发病机制中作用。方法:用放射同位素法测定单核细胞2-5OAS活性;ELISA法测定血清IL-2、IL-12。结果:无症状HBsAg携带组2-5OAS、IL-2、IL-12含量与正常对照组无显著差异(P>0.05),急性肝炎组均显著高于正常对照组(P<0.01),慢性乙型肝炎轻、中、重度组、慢性重型肝炎组、肝硬化组、肝癌组均显著低于正常对照组(P<0.05),并且随慢性肝炎病情加重以及肝硬化、肝癌发生而递减,其中肝硬化、肝癌组处于最低水平(与慢性肝炎各组比较P<0.05)。结论:在HBV感染发病过程的不同阶段和不同临床分型患者中,其内源性干扰素系统和Th1应答反应都是有显著差异的,细胞免疫对病毒感染的痊愈起主导作用。

2′,5′-寡腺苷酸合成酶L和干扰素诱导蛋白2基因与系统性红斑狼疮相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞中干扰素诱导表达2′,5′-寡腺苷酸合成酶L(OASL)和干扰素诱导蛋白2(IFIT2)基因的实时定量表达水平与SLE疾病特异性和疾病活动的相关性。方法收集50例SLE患者,25例非SLE自身免疫性疾病患者,25例健康对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并逆转录成cDNA,运用SYBR green dyeI实时定量聚合酶链反应(PCR)在Bio-Rad 96孔基因测序仪上检测SLE患者组和非SLE患者组及健康对照组的OASL和IFIT2 mRNA定量表达水平(以ΔCT表示)的差异,并根据各病情不同进行分组比较,以及对其与SLEDAI和临床各相关指标相关性进行评价分析。结果SLE患者总体OASLmRNAΔCT值(4.83±0.41)与非SLE患者(3.26±0.47)差异有统计学意义(P=0.029),与健康对照者(3.07±0.54)差异有统计学意义(P=0.014)。SLE患者总体IFIT2 mRNAΔCT值(2.85±0.41)与非SLE患者(1.19±0.52)差异有统计学意义(P=0.019),与健康对照组(1.07±0.47)差异有统计学意义(P=0.011)。SLE患者总体OASLmRNAΔCT值与SLEDAI有相关性(r=0.324,P=0.022),与免疫球蛋白A(IgA)有相关性(r=0.357,P=0.012),IFIT2 mRNAΔCT值与SLEDAI有相关性(r=0.399,P=0.004),与血白细胞有相关性(r=0.393,P=0.005),与IgA有相关性(r=0.283,P=0.049)。结论OASL和IFIT2在SLE患者中均表达上调,对SLE患者的病情活动度判断有意义,两者在SLE发病中均有一定作用,抑制其过度表达可能成为治疗SLE的新方法。

腹透液的生物相容性对2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性的影响

目的 :观察使用商业腹透液时 2′ ,5′-寡腺苷酸合成酶活性的动态变化和腹膜病理改变 ,探讨长期腹膜透析腹透液生物相容性对机体免疫功能影响和腹膜间皮的病理改变。方法 :①使用 3种常用腹透液建立腹膜透析动物模型 ;②用纸层析法动态测定实施和停止腹膜透析时 ,2′ ,5′ -寡腺苷酸合成酶活性的消长 ;③在光镜下观察腹膜间皮病理变化。结果 :腹膜透析时 ,各腹膜透析组和生理盐水组 2′,5′ -寡腺苷酸合成酶活性均升高 ;停止腹膜透析 ,生理盐水组 2′ ,5′-寡腺苷酸合成酶活性恢复正常 ,各腹膜透析组则持续降低 ;在腹膜透析时 ,各腹膜透析组均发生程度不等的间皮细胞脱落、腹膜增厚和急、慢性炎症细胞浸润 ;而Baxter组无急性炎症发生。随着停止腹膜透析时间延长 ,腹膜透析组病理改变逐渐修复。结论 :长期腹膜透析时 ,腹膜透析液对机体免疫功能均有长时间抑制 ,并造成不同程度的腹膜病理改变。腹透液的非生物相容性是导致机体免疫功能降低 ,腹膜损伤的重要因素。

2',5'-寡腺苷酸合成酶基础活性对干扰素α治疗慢性丙型肝炎信号传导的影响机制研究

目的观察慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中2',5'-寡腺苷酸合成酶(2-5AS)基础活性对干扰素(IFN)信号分子改变的影响,探讨IFN-α治疗慢性丙型肝炎的作用机制。方法选择60例慢性丙型肝炎患者,抽取外周血分离出PBMC,每份标本进行2-5AS基础活性测定后分为实验组和对照组,对照组PBMC体外培养时不加IFN-α,实验组PBMC体外培养时加入IFN-α。培养24 h后,测定PBMC中2-5AS活性、IFN-α受体(IFN-αR)、信号传导及转录激活因子(Stat)1、Stat2、两面神激酶1(Jak1)和酪氨酸激酶2(Tyk2)等指标。结果实验组PBMC培养24 h后2-5AS活性、Jak1、Stat1、Stat2和Tyk2等表达明显增高(P<0.05),IFN-αR表达降低(P<0.05)。2-5AS基础活性与IFN-α刺激下PBMC中2-5AS、Tyk2和Stat1的表达呈负相关(P<0.05),而与IFN-αR、Jak1和Stat2的表达无相关性(P>0.05)。结论 2-5AS基础活性可下调PBMC对外源性IFN-α的敏感性,Stat1、Tyk2表达降低可能是下调机制发生的原因。

相对荧光定量法检测人体2',5'-寡聚腺苷酸合成酶相对表达水平

目的:建立相对荧光实时定量法(RT-QPCR 2_(-ΔΔCt)),考察聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液临床Ⅰ期试验中给药后外周全血中2',5'-寡聚腺苷酸合成酶(2',5'-OAS)相对药前点的相对表达水平变化。方法:根据Gen Bank中查询的2',5'-OAS的序列构建质粒,并纯化定量作为方法标准品,制作标准曲线及验证样品,考察该方法的准确度及精密度;采用RT-QPCR 2_(-ΔΔCt)方法,以个体药前样品为对照,GAPDH为内参,比较考察给予聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液(受试品160μg/人)与阳性对照药派罗欣(180μg/人)后外周血中2',5'-OAS mRNA表达变化倍数;同时,基于ELISA方法对2',5'-OAS蛋白浓度表达进行分析。结果:2',5'-OAS标准曲线有相对较好的线性(R2=0.99),cDNA 2',5'-OAS与2',5'-OAS标准品的PCR产物熔解曲线温度一致,说明引物特异性好。2个剂量组中m RNA表达水平均在20 h左右达到峰值,其中160μg剂量组中峰浓度较高。ELISA检测血清中2',5'-OAS浓度无明显变化。结论:与传统蛋白水平检测的ELISA方法相比,RT-QPCR 2_(-ΔΔCt)灵敏度较高,可以作为一种检测外周全血中生物标志物的替代方法,以给予药效学研究的临床支持。

HCV基因型与2′-5′寡腺苷酸合成酶活性的相关性研究

目的 了解丙型肝炎病毒基因型在不同人群中的分布规律与流行优势型及其与 2′ 5′寡腺苷酸合成酶 (2 5AS)的相关性。方法 分别对门诊体检、住院病人和血液透析患者抗 HCVIgG阳性标本 ,采用RT nested PCR方法检测HCVRNA ;用 5′端非编码区 (5′ NCR) 1、2、3、1b型特异性引物进行扩增和基因分型 ;用PEI cellulose薄板层析法检测外周血单个核细胞的 2 5AS。结果 三组人群HCVRNA感染率分别为 1 .2 1 %、2 .6 6 %、38.84 % ;HCV基因型以 1b亚型为主 ,1b及 1b的相关型占 91 .6 7%。以ATP转化率表示 2 5AS活性水平 ,1b型和 1b相关的混合感染 2 5AS活性显著升高。而其他基因型与健康对照组无明显差别。结论 2 5AS活性的基础水平显著升高可能是HCV

中药复方对肝纤维化小鼠2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性影响和超微结构研究

目的:研究中药复方(二参泽术汤和丹参桃芎汤)防治肝纤维化时,对机体免疫功能的影响和肝细胞超微结构的改变。方法:制备小鼠肝纤维化模型;观察其病理组织学和超微结构,并测定2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性。结果:模型组肝细胞广泛脂肪样变性,汇管区大量胶原纤维增生。2′,5′-寡腺苷酸合成酶水平低下。二参泽术汤预防组肝组织超微结构基本正常,未见有胶原纤维增生;治疗组肝细胞间有少量胶原纤维增生。该药预防组和治疗组2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性显著高于模型组(P 均<0.01)。丹参桃芎汤预防组和治疗组有严重的细胞变性坏死,胶原纤维大量增生,2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性与对照组比较,有明显降低(P<0.01)。结论:在肝纤维化治疗时,机体免疫功能的高低与疗效有密切关系;二参泽术汤对提高肝纤维化小鼠机体的免疫功能和防治肝纤维化的效果均优于用丹参桃芎汤。2′,5′-寡腺苷酸合成酶的测定能反映肝纤维化的转归和预后。

小鼠2-5A合成酶cDNA克隆及全序列测定

通过饲喂放线菌酮 ,提取小鼠肝脏的总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,利用RT PCR扩增出 110 0bp大小的片段 ,将其克隆入载体pBluescript,采取双链质粒直接测序 ,获得的序列与国外报道小鼠 2 5A合成酶基因序列具 99.8%的同源性。氨基酸序列分析表明 ,小鼠 2 5A合成酶与人2 5A合成酶具 6 8%同源性 ,并在其C端发现亲水基团和糖基化位点。

慢性乙型肝炎2',5'—寡腺苷酸合成酶活性与干扰素疗效的关系

探讨慢性乙型病毒性肝炎患者血液中单个核细胞的 2 ',5 '—寡腺苷酸合成酶 (2 ',5 '-OAS)活性与干扰素疗效的关系 ,为临床预测干扰素疗效 ,避免盲目使用干扰素提供依据。将 17例HBeAg、HBV -DNA双阳性的慢乙肝患者干扰素治前、治疗一周及治疗三月后进行 2 ',5 '-OAS检测。结果示 11例治前 2 ',5 '-OAS活性较低 ,治疗一周有明显升高。其中 8例HBeAg、HBV -DNA双项转阴。 3例HBeAg单项转阴。其余 6例治疗前 2 ',5 '-OAS活性较高 ,治后 1周升高幅度不大 ,双项均无转阴。提示 2 ',5 '-OAS的水平可能是临床预测干扰素疗效的指标之一。

脑5-HT_(1A/1B)、α_2受体及腺苷酸环化酶参与了胍丁胺的抗抑郁作用

为了在单胺受体及受体后腺苷酸环化酶（adenylate cyclase,AC）水平探讨胍丁胺（agmatine,AGM）抗抑郁作用的精细机制,采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验观察AGM抗抑郁行为改变。采用放射免疫方法测定大鼠前额皮层突触膜蛋白AC活性。结果表明,AGM（5~40 mg.kg-1,ig）在小鼠悬尾实验和强迫游泳实验模型上均有显著抗抑郁活性。同时伍用β受体/5-HT1A/1B受体阻断剂吲哚洛尔（pindolol,PIN,20 mg.kg-1,ip）、α2肾上腺素受体拮抗剂育亨宾（yohimbine,YOH,5~10 mg.kg-1,ip）或咪唑克生（idazoxan,IDA,4 mg.kg-1,ip）对AGM（40mg.kg-1,ig）的抗抑郁活性具有显著拮抗效应;而β受体阻断剂普萘洛尔（propranolol,PRO,5~20 mg.kg-1,ip）或5-HT3受体拮抗剂曲匹西隆（tropisetron,TRO,5~40 mg.kg-1,ip）对AGM（40 mg.kg-1,ig）的抗抑郁活性无显著影响。AGM（0.1~6.4μmol.L-1）与大鼠前额皮层提取的突触膜共孵可剂量依赖地激活AC活性,而PIN（1μmol.L-1）或YOH（0.25~1μmol.L-1）均显著拮抗AGM（6.4μmol.L-1）对AC的激活作用;慢性给予大鼠AGM（10 mg.kg-1,ig,bid）或氟西汀（fluoxetine,FLU,10 mg.kg-1,ig,bid）2 w也显著增强大鼠前额皮层基础及Gpp（NH）p预激活的AC活性。本研究表明,调节脑内5-HT1A/1B和α2等受体功能,并激活前额皮层AC可能是AGM抗抑郁活性的重要机制之一。

人淋巴细胞中发现2′-5′-三腺苷酸受体

通过合成的 3H-PPPA2′ P5′ A2′ P5′ A( 2′-5′ P3A3)与人淋巴细胞进行结合反应 ,结果表明 :人淋巴细胞质膜存在着 2′-5′ P3A3受体 .又通过用 ATP、UTP与 3H-2′-5′ P3A3竞争抑制实验表明 ,3H-2′-5′ P3A3与淋巴细胞膜受体的结合为特异性结合 ,结合率受 3H-2′-5′ P3A3浓度、p H等因素影响 .

ARK5和MMP-2在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶5(ARK5)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人脑胶质瘤中的表达,并探讨两者的相关性及其临床意义。方法收集具有明确病理分级的67例新鲜人脑胶质瘤标本(实验组,A组),其中低级别级胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)28例(A1组,n=28),高级别胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)39例(A2,n=39),并收集32例脑外伤行内减压去除的脑组织标本作为对照组(B,n=32)。分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与Westernblot测定标本中ARK5和MMP-2的mRNA及蛋白表达水平,研究ARK5和MMP-2在胶质瘤中的表达水平及与病理分级的关系。结果 (1)胶质瘤组ARK5和MMP-2 mRNA及蛋白表达水平较对照组显著上调(P<0.05)。(2)A2组ARK5和MMP-2 mRNA及蛋白表达水平较A1组显著上调(P<0.05)。(3)MMP-2在胶质瘤中的表达与ARK5呈显著正相关(r=0.782,P<0.01)。结论 ARK5和MMP-2在人脑胶质瘤中呈高表达,且它们的表达与胶质瘤的病理分级相关,可能与人脑胶质瘤的增殖及侵袭有关。

OAS2-751C/A位点基因多态性与儿童EV71感染的关联性研究

目的探讨2’-5’寡聚腺苷酸合成酶2基因5’端调控区751C/A(OAS2-751C/A)位点单核苷酸多态性与肠道病毒71型(EV71)易感性及其病情严重程度的关系。方法选取2014年6月至2015年9月青岛大学附属医院及青岛市妇女儿童医院收治的EV71检测为阳性的患儿215例,参照《手足口病诊疗指南(第2010版)》的标准,根据病情轻重分为轻症组127例,重症组88例。同期收集无感染症状的健康体检儿童174例,提取外周血DNA,利用多重高温连接酶检测反应(i MLDR)技术检测OAS2-751C/A位点基因多态性。利用SPSS16.0对结果进行统计学分析。结果 OAS2-751C/A位点基因型分布及等位基因频率在EV71感染组及对照组之间差异具有显著统计学意义(P<0.05),EV71感染组A等位基因频率明显高于对照组(P<0.05);轻症组与重症组之间基因型分布及等位基因分布频率无明显差异(P>0.05)。结论 OAS2-751C/A位点A等位基因可能与人体对EV71易感性相关,与病情严重程度无关。A等位基因可能是EV71感染的危险因素。

干扰素抗病毒蛋白MxA和2',5'-OAS在肝胚瘤细胞株中的差异表达

目的了解α干扰素(interferon-α,IFN-α)诱导的抗病毒蛋白MxA和2',5'-寡腺苷酸合成酶(2',5'-OAS)在人肝胚瘤细胞株HepG2和HBV稳定转染的HepG2.2.15细胞中的表达情况。方法将培养的HepG2和HepG2.2.15细胞用IFN-α刺激6h,分离细胞总RNA,经逆转录、32P标记后与尼龙膜上的探针微矩阵(macroarray法)进行分子杂交;并以此来分析HepG2和HepG2.2.15细胞IFN抗病毒基因表达谱。用免疫印迹分析IFN抗病毒蛋白;如,MxA、2',5'-OAS等在肝胚瘤细胞中的表达。结果分析发现在HepG2和HepG2.2.15细胞仅有部分IFN诱导基因表达,多数IFN诱导基因呈低表达或不表达。比较HepG2和HepG2.2.15细胞,发现两者表达IFN诱导基因有差异,即对IFN应答有差异。研究中发现,MxA蛋白在HepG2.2.15细胞中不表达,而在HepG2细胞中却能正常表达。另一种重要的IFN抗病毒蛋白2',5'-OAS,在HepG2.2.15和HepG2细胞中均能表达;在拉米夫啶处理下,HepG2.2.15细胞甚至比HepG2细胞能更好地表达。结论IFN抗病毒蛋白MxA和2',5'-OAS在人肝胚瘤细胞株HepG2和HBV稳定转染的HepG2.2.15细胞中表现出差异的表达模式;HBV及其抗原成分影响人肝胚瘤细胞株的IFN抗病毒基因表达。

利用CRISPR/Cas9技术构建OAS2敲除的PK-15细胞系及敲除OAS2对CSFV复制的影响

为研究猪源2’-5’寡腺苷酸合成酶2(OAS2)对CSFV复制的影响,本研究利用CRISPR/Cas9系统构建敲除OAS2的PK-15细胞系(PK-OAS2-KO)。在构建PK-OAS2-KO细胞系时,设计2条分别靶向OAS2基因第1和第2外显子的特异性sg RNAs,将sg RNA插入LentiCRISPRv2载体获得重组质粒plentiCRISPRv2-sgRNA;将重组质粒与辅助质粒共转染HEK293T细胞,包装获得携带sg RNA的慢病毒后以MOI 1转导PK-15细胞,通过嘌呤霉素药物筛选及有限稀释法获得单克隆细胞株,经基因测序和western blot鉴定OAS2敲除效果。利用MOI 0.01r CSFV-Rluc株(报告病毒)或CSFV Shimen株分别感染PK15细胞获得的PK-OAS2-KO细胞系,经荧光素酶活性检测和q RT-PCR证实敲除OAS2基因能够促进CSFV复制。综上,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了OAS2基因敲除的PK-15细胞系,并发现OAS2具有抑制CSFV复制的作用,本研究为进一步研究OAS2抗CSFV作用的分子机制提供了依据。

慢性丙型病毒性肝炎患者PBMC中2-5AS的表达及其与Stat1和Stat2水平相关性分析

目的研究慢性丙型病毒性肝炎患者外周血单核细胞(PBMC)中2’,5’寡腺苷酸合成酶(2’,5’-Oligoadenylate synthetase,2-5AS)的表达及其传导与转录激活因子(Signal transducer and activator of transcription,Stat)Stat1和Stat2等的水平相关性分析。方法选择60例慢性丙肝患者,抽取外周血分离PBMC。首先测定每份标本的2-5AS活性。然后将所有丙肝患者的PBMC标本按按编号单双数分为对照组和实验组,进行体外培养。其中,对照组PBMC不添加干扰素α(interferon alpha,IFN-α),而实验组PBMC添加1000IU/ml IFN-α。体外培养大约24小时后,测定PBMC中2-5AS活性、Stat1和Stat2等的表达量。结果和对照组相比,实验组PBMC的2-5AS活性明显升高(P<0.05)。实验组PBMC中,在2-5AS活性增高的同时,Stat1和Stat2等表达量也呈现明显增多的趋势(P<0.05)。结论基础的2-5AS活性与加入IFNα刺激培养后Stat1的改变幅度呈负相关(P<0.05);2-5AS基础水平和IFNα刺激后的Stat2表达的变化没有相关性(P>0.05)。

2',5'-寡聚腺苷酸合成酶作为抗病毒药物乐复能的临床药效评价指标的研究

目的：考察抗病毒蛋白I期临床试验受试者的2＇,5＇-寡聚腺苷酸合成酶水平,初步评价抗病毒蛋白乐复能的药效学特性。方法：采用2＇,5＇-寡腺苷酸（2-5A）放免检测试剂盒对I期临床试验血样进行分析,观察2＇,5＇-OAS水平。结果：10μg单次给药后2＇,5＇-OAS活性24-48 h达峰,至给药后120 h,除3#受试者外基本恢复至本底水平。10μg每日连续给药后血清2＇,5＇-OAS活性迅速升高,药后d 5变化趋势接近平台期,至第1次给药后25 d仍能维持在较高水平,至药后39 d,患者血清2＇,5＇-OAS活性值明显降低。10μg隔日连续给药组血清2＇,5＇-OAS活性变化趋势与每日连续给药组近似,但药后39 d尚能维持在较高水平。20μg隔日连续给药组连续7 d给予10μg乐复能后,血清2＇,5＇-OAS活性已升高至平台期,随后的20μg隔日连续给药将血清2＇,5＇-OAS活性值一直维持在较高的水平至连续给药结束。结论：2＇-5＇寡聚腺苷酸合成酶可以作为乐复能的临床疗效评价指标。

RT-PCR法评价干扰素α-2b干粉吸入剂的药效学

目的对重组人干扰素α-2b(IFNα-2b)干粉吸入剂的药效学进行评价。方法以IFNα-2b诱导的2′,5′-寡腺苷酸合成酶(OAS)为替代指标,建立了一种灵敏的、半定量的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定OAS两种亚型OAS1和OAS2在外周血单个核细胞中的mRNA水平。结果与市售注射剂相比较,自制IFNα-2b干粉吸入剂诱导的OAS1的mRNA水平相当,但OAS2的mRNA水平更高。结论重组人干扰素α-2b干粉吸入剂有望成为一种非侵害性的、依从性良好的、发挥全身性疗效的给药途径。