基因工程菌酶法合成抗癌新药6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷

6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)是一种新型抗癌药物,它作为药物前体应用于PNP自杀基因治疗系统可以选择性杀伤肿瘤细胞。本实验构建了一个高效表达大肠杆菌来源的嘌呤核苷磷酸化酶重组质粒,并利用基因工程菌以15mmol/L 6-甲基嘌呤和60mmol/L 2′-脱氧尿苷为底物合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷,在40mmol/L pH7.0的磷酸缓冲液中,2%菌体在55℃反应2h,转化率可达83.78%。用硅胶制备薄层提纯得到白色针状晶体,收率为76.4%。HPLC测定该产物纯度99.3%,核磁共振鉴定该产物为MePdR。

马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧核苷体外反应形成加合物的LC-MS/MS研究

目的 利用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)研究马兜铃酸Ⅳ_a(aristolochic acid Ⅳ_a,AA Ⅳ_a)与2′-脱氧核苷在溶液中的反应,检测可能的加合物,为进一步研究奠定基础。方法 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷在锌尘存在下37℃孵育,通过LC-MS/MS中性丢失模式筛选反应产物,再通过质谱碎裂方式和高分辨质谱进行验证。结果 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷的反应较为复杂,产生多种产物。根据预期的加合物分子量(分别为558和574)以及是否具有明显的[MH-116]+子离子,分别筛选到3种和4种可能的2′-脱氧腺嘌呤核苷和2′-脱氧鸟嘌呤核苷加合物。同时,还发现了非“常规”的加合物。在马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷反应混合物中,发现了1种分子量572的可能加合物,而在马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧鸟嘌呤核苷反应混合物中则发现了3种分子量590的可能加合物。结论 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷体外条件下能够发生反应形成可能的加合物,但加合物结构尚需通过核磁共振光谱确定。

6-甲基嘌呤-2'-脱氧核苷治疗猫传染性腹膜炎

猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)引起的以胸腔或腹腔积淡黄色渗出液、腹腔肿块、神经症状等为特征的一种高致死性疾病。为研究6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)对猫传染性腹膜炎病例的治疗效果及副作用,选取临床上确诊为猫传染性腹膜炎且主人放弃治疗病例5例,采用6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷按10 mg/kg体重颈部和背部皮下注射,配合抗菌消炎,连续治疗14~30 d,治疗期间注射部位溃烂、硬结病例3例,最终1例死亡,4例治愈,治疗有效率为80%。说明6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷治疗猫传染性腹膜炎具有较好的疗效,但药物易引起注射部位溃烂。

双脱氧尿苷的合成

以 2′ 脱氧尿苷为原料 ,先用甲磺酰氯将 3′ ,5′ 羟基保护制得化合物 (2 ) ,然后在氢氧化钠水溶液中形成 3′ ,5′ O 环状物 (3) ,再与叔丁醇钾 (t BuOK)作用生成 (4) ,最后通过Pd C加氢得到目标化合物 2′ ,3′ 二脱氧尿苷 (5 ) ,总收率为 2 1 2 % .

The prodrugs of L-guanosine analogs:design,synthesis and anti-HIV activity

To improve the stability and pharmacokinetic properties,prodrugs of L-ddG（L-2＇,3＇-dideoxy-guanosine）and L-D4G （L-2＇,3＇-dihydro-2＇,3＇-dideoxyguanosine）modified with a series of substituted amino groups at C-6 position of the purine base were designed and synthesized and their anti-HIV activities were evaluated.Compounds 7d and 8g exhibited moderate activity and showed EC_（50）of 42μmol/L and 55μmol/L,respectively.