金莲花中荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷的含量测定

目的：测定金莲花（Flos Trollii Chinensis）中荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷（-2″-O-β-L-galactopyranosylo rientin）的含量。方法：HPLC法。结果：荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷含量为0．95％-4．07％（n=6），其中阿尔山金莲花的含量最高达3．40％±0．67％（n=3）。结论：用HPLC法对金莲花中的荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷进行了含量测定，方法可靠。结论：荭草素-2＂-O-β-L半乳糖苷是金莲花黄酮碳苷类组分中含量最高的药效组分之一，为金莲花黄酮类药效组分的深入研究提供了科学数据。

荭草素-2″ -O-β-L-半乳糖苷对照品的制备

目的制备一种用于金莲花及金莲花制剂含量测定的对照品。方法通过柱层析、重结晶方法进行分离、纯化制备荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷对照品,采用薄层色谱法、HPLC归一化法测定其纯度;利用理化性质、波谱特征鉴定其结构。结果从金莲花的乙醇提取液中分离得到纯度>98%的荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷。结论荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷可以作为金莲花及金莲花制剂含量测定用对照品。

2-氯乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成

2-氯乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷是重要的药物合成中间体.以D-葡萄糖为原料,一锅法合成2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-1-溴代吡喃葡萄糖供体.该供体在促进剂碳酸银的作用下与2-氯乙醇偶联,立体专一性地得到了1,2-反式结构的2-氯乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷.目标化合物的结构经氢谱分析得到了确证,方法简便,实用.

阿尔泰金莲花总黄酮及其荭草素2″-O-β-L-半乳糖苷的提取工艺

目的研究阿尔泰金莲花总黄酮及其荭草素2″-O-β-L-半乳糖苷(OGA)的提取工艺。方法在含量测定基础上,以总黄酮和OGA含量以及DPPH自由基清除能力为评价指标,以乙醇浓度、料液比、提取时间和提取次数为因素,通过L_9(3~4)正交实验设计优选阿尔泰金莲花总黄酮及其OGA的提取工艺。结果阿尔泰金莲花总黄酮及其OGA的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数70%,料液比1∶30(g·m L^(-1)),提取时间1.5 h,提取2次;该工艺可以获得高含量的总黄酮[(170.53±3.30)mg·g^(-1)]和OGA[(29.02±0.46)mg·g^(-1)]。抗氧化活性随提取物中总黄酮和OGA含量的增大而增大。结论该提取工艺操作简便,可为阿尔泰金莲花的开发利用提供参考。

纤维素酶辅助超声提取荭草素2″-O-β-L半乳糖苷工艺研究

目的:优化阿尔泰金莲花荭草素2″-O-β-L半乳糖苷(OGA)的纤维素酶辅助超声提取工艺。方法:以OGA提取率为考察指标,通过单因素试验考察p H、酶添加量、料液比、提取时间和提取温度对OGA提取率的影响,进一步采用Box-Behnken中心组合试验及响应面分析优化阿尔泰金莲花OGA的纤维素酶辅助超声提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为p H=4、料液比1∶40、超声功率90W、酶添加量1.5%、乙醇浓度48.0%、超声时间38.0 min、超声温度40℃;在此条件下,OGA提取率达到了2.7%以上。结论:该工艺简单高效,可用于荭草素2″-O-β-L半乳糖苷的提取。

木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的作用及其机制。方法:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷预作用12 h后,采用H2O2诱导培养乳鼠心肌细胞氧化损伤模型,测定细胞存活率、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、细胞内活性氧(ROS)水平及细胞内钙(Ca2+)超载的变化。结果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷能明显提高H2O2损伤细胞存活率,提高细胞内SOD活性,降低胞内MDA和ROS生成量,同时使细胞内钙含量降低。结论:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对H2O2氧化损伤心肌细胞具有明显的保护作用,机制可能与其抑制脂质过氧化、抑制细胞内钙超载有关。

2D NMR对荠菜中的一个黄酮苷进行结构解析

对荠菜中分离得到的一个黄酮苷类化合物2″-O-α-L-阿拉伯糖异荭草苷进行了分离和结构解析,为荠菜进一步的开发利用提供依据.利用溶剂提取法和大孔树脂色谱、聚酰胺色谱、SephadexLH-20及高效液相半制备色谱手段进行提取分离,并通过理化性质和波谱分析鉴定了该化合物的结构,采用二维核磁共振(2DNMR)技术对其1H和13C化学位移信号进行了全归属.

2-氯腺苷的合成研究

以价格低廉的商品化2',3',5'-三-O-乙酰基鸟苷为原料,和POCl3反应,将6位羰基转化为Cl,继而用亚硝酸叔丁酯和Sb Cl3体系,将2-NH2转化为Cl,最后在饱和的NH3/CH3OH溶液中选择性地将6-Cl氨解为-NH2,同时脱除乙酰基,以3步和72%的总收率得到2-氯腺苷。该方法不需要重金属催化剂,原料价格低廉,产物成本低,易于扩大生产。

2’-氯乙基-β—D-葡萄糖苷的合成

2’-氯乙基-2，3，4，6-四-0-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）和2’-氯乙基-β—D-吡喃葡萄糖苷（6）是潜在的糖类药物合成的中间体。以D-葡萄糖（1）为原料，通过乙酰化、C1位选择性脱乙酰基、与三氯乙腈反应，转变成相应的2,3，4，6-四-0-乙酰基-D-吡喃葡萄糖基三氯乙酰亚胺酯（4）。以该酯为供体，在三氟化硼乙醚催化下与2-氯乙醇偶联，得到了1,2-反式结构的2’-氯乙基-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β—D-吡喃葡萄糖苷（5）。后者脱去乙酰基保护，获得了2’～氯乙基-β—D-吡喃葡萄糖苷（6）。该合成路线合理、实用。

RP-HPLC法同时测定金莲花中3种碳苷黄酮的含量

目的建立金莲花药材中3种碳苷黄酮含量同时测定的方法,以比较不同产地金莲花药材及不同部位中3种成分的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱:Shim-pack C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈体积分数为0.35%的磷酸溶液(体积比为16∶84),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:345 nm,柱温:25℃。结果荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷能够达到基线分离;荭草苷在9.94～99.40 mg·L-1、牡荆苷在2.49～24.90 mg·L-1、荭草素2″OβL半乳糖苷在10.64～106.40 mg·L-1内线性关系良好。结论本方法为金莲花药材的综合利用和资源开发提供了参考,有利于控制金莲花药材的质量。

金莲花多苷片中四种黄酮类化合物的含量测定

目的测定金莲花多苷片中四种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,在360nm波长处,同时测定金莲花中四种黄酮类成分的含量。结果荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷及槲皮素进样量分别在0.1976~1.9760μg、0.1010~1.0100μg、0.0604~0.6040μg、0.0608~0.6080μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.17%、98.09%、99.15%、98.54%,RSD分别为1.05%、0.90%、0.54%。0.73%。结论本方法简单准确,重复性良好,适用于金莲花多苷片的含量测定。

金莲花70％乙醇提取液中黄酮碳苷类成分的研究(Ⅰ)

目的:对金莲花70％乙醇提取物中的黄酮碳苷类成分进行分离和鉴定,为制定金莲花的品质评价标准提供科学数据。方法:用聚酰胺、硅胶、SephadexLH-20色谱柱连续分离和纯化,利用波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果:分离得到3个黄酮碳普类化合物,经鉴定分别为荭草素-2″O-β-L-半乳糖苷(2″O-β-L- Galactopyranosyl orientin)、荭草苷(Orientin)和牡荆苷(Vitexin)。结论:首次证明了金莲花中含有荭草素-2″O-β-L -半乳糖苷,并采用聚酰胺-硅胶-SephadexLH-20连续色谱法对该化合物进行了富集。本研究所采用的分离、纯化黄酮碳苷类成分的方法简便、经济、分离效果好。从金莲花中提取黄酮碳苷类成分用70％乙醇为溶剂效果较佳。佥莲花中的抗菌、抗病毒成分主要是黄酮碳苷类化合物,所以,本研究对科学阐释金莲花药效物质基础和有效组分具有重要意义。

竹节草的化学成分研究

以乙醇提取,硅胶柱层析分离和波谱方法鉴定结构,从竹节草地上部分分离鉴定出5个化合物:3β-羟基-5,α8α-桥二氧麦角甾-6,22-二烯(Ⅰ)、槲皮素(Ⅱ)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖(6→1)-α-L-鼠李糖槲皮素(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、po insettifo lin A 3-O-[3′″″-乙酰基-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1′″″→6″″)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅴ).其中化合物Ⅴ为新化合物,化合物Ⅰ和Ⅲ系首次从该属植物中分离得到.

炮制前后王不留行中3种黄酮苷在大鼠体内药动学的变化

目的考察炮制前后王不留行中3种黄酮苷在大鼠体内药动学的变化。方法大鼠分别灌胃给予生品、炮制品提取液(0.01 mL/g),于5、10、20、30、45 min及1、2、4、8、12、24 h采血,UPLC-MS/MS法测定王不留行黄酮苷、肥皂草苷、异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷血药浓度,计算主要药动学参数。结果炮制后,王不留行黄酮苷MRT_(0~24 h)、t_(1/2)缩短(P<0.05);异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷C_(max)、AUC_(0~24 h)升高(P<0.05),MRT_(0~24 h)、t_(1/2)缩短(P<0.05);肥皂草苷MRT_(0~24 h)缩短(P<0.05)。结论炮制后,王不留行中异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷含量增加。在服用相同剂量提取物时,异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷暴露量增加,并且该成分及王不留行黄酮苷、肥皂草苷的消除加快。

白花鬼针草化学成分研究

目的:研究白花鬼针草醇提物的化学成分。方法:以硅胶色谱、Sephadex LH-20色谱及C18反相硅色谱分离纯化白花鬼针草醇提物的化学成分,以1H-NMR、13C-NMR以及质谱鉴定化学结构。结果:从白花鬼针草醇提物中分离、纯化、鉴定了6个化合物,分别为:槲皮素-3,3′-二甲醚-7-O-β-D-吡喃酮葡萄糖苷(1)、奥卡宁4′-O-β-D-(2″,4″,6″-三乙酰基)-吡喃酮葡萄糖苷(2)、4-O-(6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(3)、4-O-(2″-O-乙酰基-6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(4)、邻苯二甲酸异丙酯(5)、原儿茶酸(6)。结论:6个化合物均首次从白花鬼针草中分离得到,其中,槲皮素-3,3′-二甲醚-7-O-β-D-吡喃酮葡萄糖苷(1)、4-O-(6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(3)、4-O-(2″-O-乙酰基-6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(4)、邻苯二甲酸异丙酯(5)4个化合物属于首次从鬼针草数药用植物植物中分离鉴定。

基于UHPLC-Q-TOF-MS分析荭草花提取物在H9c2心肌细胞中效应物质

目的:利用H9c2心肌细胞和UHPLC-Q-TOF-MS技术筛选荭草花抗心肌缺血作用的活性成分。方法:用心肌细胞选择性地结合荭草花提取液中的活性成分,洗去未结合的其他成分后,使细胞靶点失活,被结合的活性成分从心肌细胞中释放出来,采用Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~2 min,95%~79%A;2~5 min,79%A;5~6.5 min,79%~60%A;6.5~7.5 min,60%~55%A;7.5~9.5 min,55%~0%A;9.5~10 min,0%~95%A),电喷雾离子源(ESI)正、负离子模式下扫描采集数据,通过采用对照品比对及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:检测出荭草花提取物中可与心肌细胞结合的17个成分,采用对照品比对后,确定8个色谱峰所表征的化学成分,依次为原儿茶酸,儿茶素,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷,槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷,山柰素-3-O-α-L-鼠李糖苷,N-p-香豆酰酪胺,槲皮素和山柰酚。结论:通过分析心肌细胞破碎液中与活性细胞相结合的成分,筛选出了荭草花提取物中能与心肌细胞有相互作用的成分,为明确荭草花的药效物质基础提供了科学依据。

赶黄草化学成分的研究

目的 :研究扯根菜的水溶性化学成分。方法 :吸附色谱柱、大孔吸附树脂等手段分离 ,理化常数、波谱数据和化学方法鉴定。结果 :从水提取物的醇溶部分得到 3个化合物 ,分别为乔松素 7 O β D 葡萄糖苷 (Ⅰ ) ,2 ,4 ,6 三羟基苯甲酸 (Ⅱ ) ,槲皮素 (Ⅲ )。结论 :化合物Ⅰ 。

金莲花口服液高效液相色谱指纹图谱建立及指标成分含量测定

目的 建立金莲花口服液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱和多成分定量方法。方法 以荭草苷峰为参照,建立18批金莲花口服液的HPLC指纹图谱,确定共有峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)评价相似度。采用HPLC法,测定荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素的含量。结果 18批样品有22个共有峰,相似度均不低于0.988;指认2号峰为荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷,4号峰为荭草苷,8号峰为牡荆苷,17号峰为槲皮素。18批样品中,荭草素-2’’-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、槲皮素的含量分别为(2.54±0.22)mg/mL、(3.12±0.37)mg/mL、(0.79±0.06)mg/mL、(0.28±0.04)mg/mL。结论 所建立的HPLC指纹图谱和多成分定量方法快速简便,可用于金莲花口服液的质量控制。

基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中6种成分含量

目的建立基于多种内参物的一测多评法测定金莲清热颗粒中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷6个成分的含量。方法以Agilent Eclipse Plus C_(18)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相(梯度洗脱),流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm。分别以荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷为内参物,采用一测多评法建立另外5个待测成分与内参物的相对校正因子,然后计算21批金莲清热颗粒样品中6个成分的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果一测多评法测得21批金莲清热颗粒样品中芒果苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、藜芦酸、牡荆苷和哈巴俄苷的含量范围分别为0.234~0.516、1.804~2.270、2.143~2.606、0.190~0.223、0.594~0.782、0.080~0.152 mg/g,外标法测定结果分别为0.235~0.523、1.798~2.265、2.137~2.599、0.190~0.224、0.597~0.786、0.077~0.151 mg/g,2种方法所测结果的差异百分比不大于4.00%。结论建立了基于多种内参物同时测定金莲清热颗粒中6种成分含量的一测多评法,该方法与外标法所得结果无明显差异,可用于金莲清热颗粒的质量控制。

基于谱效关系的金莲花抗肠道病毒71型物质基础研究

目的:对金莲花抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)物质基础进行研究。方法:通过建立超高效液相色谱-串联二极管阵列检测器-飞行时间质谱(UPLC-DAD-TOF/MS)指纹图谱对金莲花物质基础进行表征,通过噻唑蓝(MTT)法对金莲花抗EV71病毒抑制率进行检测,通过正交偏最小二乘法(OPLS)和灰色关联分析法(GRA)对金莲花物质基础和病毒抑制率进行谱效相关关联分析。结果:建立了20批次金莲花样品的指纹图谱,标定了31个共有峰,并进行了质谱解析;建立了金莲花对EV71抑制率检测方法,20批次金莲花的病毒抑制率为49.64%~73.69%;OPLS和GRA分析结果表明,共有峰12、13、14、18可能为金莲花抗EV71物质基础。结论:共有峰12(番石榴酸)、13(未鉴定的生物碱成分)、14(对羟基苯甲苹果酸)和18(2″-O-乙酰基荭草苷)可能为金莲花抗EV71物质基础,此可为金莲花质量标准的建立和金莲花抗病毒研究提供借鉴和数据支持。