2型糖尿病模型db/db小鼠海马NOS阳性神经元变化

目的 观察人类 2型糖尿病模型———C5 7BL/KsJdb/db(db/db)小鼠海马NOS阳性神经元变化。方法 糖尿病组 :6周龄C5 7BL/KsJ(db +db +)小鼠 5只 ,尾静脉空腹血糖高于 11.1mmol/L且肥胖。对照组 :非糖尿病小鼠C5 7BL/KsJ(?+) 5只 ,尾静脉空腹血糖低于 6 .0mmol/L体重正常 ,于 30周龄 (成模第 6月末 )时 ,灌注固定取脑 ,以NADPH d组化法显示海马NOS阳性神经元。结果 与正常对照组相比 ,糖尿病组小鼠海马齿状回NOS阳性神经元密度显著减少 (P <0 0 1)。结论 糖尿病时NOS阳性神经元数量减少 。

自发性2型糖尿病模型db/db小鼠生物学特性研究

目的对db/db小鼠进行生物学特性研究,满足糖尿病研究的需要。方法在试验周期内,测定db/db小鼠的空腹血糖、体质量及摄食饮水量,并测定21周龄模型动物的糖耐量、血中胰岛素、胰高血糖素、三酰甘油、总胆固醇等指标的水平,进行胰腺的免疫组化双重染色及主要脏器的病理学检查,并与db/m小鼠进行比较。结果与对照组db/m小鼠比较,db/db小鼠过度肥胖,伴有高血糖、胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱,且肝脏和胰腺组织均出现明显病变,胰腺免疫组化双重染色结果与血液学测定结果一致,并可观察到胰岛中A细胞和B细胞的分布变化情况。结论对自发性2型糖尿病模型db/db小鼠所做的相关生物学特性检测,可供糖尿病研究参考。

诱发性2型糖尿病小鼠模型与自发性db/db小鼠特性的比较

目的建立诱发性2型糖尿病小鼠模型,并将其与自发性2型糖尿病小鼠db/db进行比较分析。客观评价两种2型糖尿病小鼠模型,为糖尿病研究中动物模型的选择与实际应用提供实验依据。方法高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠4周,腹腔连续3次注射STZ,建立诱发性2型糖尿病小鼠模型。感染后4周,大体肉眼观察小鼠的肝脏、肾脏,测定糖耐量,血清生化指标及血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-10表达量,将其与同龄的自发性2型糖尿病小鼠db/db进行比较分析。结果肉眼观察发现,两组模型小鼠的肝脏、肾脏与对照组均具有明显差异。糖耐量分析中,两组模型小鼠与对照组小鼠各时间点的血糖值均具有统计学差异(P<0.05),耐糖功能低下,两组模型小鼠间血糖值无统计学差异。血液生化指标中,与对照组小鼠相比,两组模型小鼠GLU、CHOL、LDLC明显升高(P<0.05);两组模型小鼠相互比较,诱发性2型糖尿病小鼠血脂水平较高(P<0.05)。免疫指标比较显示:除IL-2外,两组模型小鼠血清中细胞因子水平均较对照组小鼠明显升高(P<0.05),而db/db小鼠血清中细胞因子表达较诱发性糖尿病小鼠高,其中IL-6、IFN-γ、TNF-α具有显著性差异(P<0.05)。结论两组2型糖尿病模型小鼠均在一定程度上模拟了人类糖尿病患者症状,但由于糖尿病产生的原因不同而存在着一定的差异,研究者可根据实际需要参照相关数据进行选择。

db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌实时荧光定量PCR标准品制备方法的比较研究

目的比较研究db/db 2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)实时荧光定量PCR 2种标准品制备方法。方法收集2型糖尿病小鼠db/db模型组和db/m对照组肠道内容物,同时以多形拟杆菌ATCC29148为标准菌株,提取微生物DNA,用16SrRNA V6区多形拟杆菌引物,采用实时荧光定量PCR标准品制备中标准菌株法和正常组高阳性法2种标准品制备方式进行定量检测,比较2种方法的差异性。结果标准菌株法与正常组高阳性法测定db/m对照组和db/db模型组小鼠肠道多形拟杆菌的数量分别为(5.23×106±2.30×106)、(1.52×107±3.23×106)和(5.23×106±2.25×106)、(1.45×107±3.39×106),与db/m对照组相比,db/db模型组多形拟杆菌数量多,差异有统计学意义(P<0.05);标准菌株法与正常组高阳性法对检测多形拟杆菌的差异无统计学意义(P>0.05)。结论实时荧光定量PCR的标准品制备中标准菌株法与正常组高阳性法均可检测出较多的多形拟杆菌,并且2种检测方式都可以对肠道菌群进行检测。

2型糖尿病模型db/db小鼠海马超微结构观察

目的 观察 2型糖尿病动物模型———C5 7BL/KsJ(db/db)小鼠海马超微结构变化。方法 糖尿病组 :6周龄C5 7BL/KsJ(db/db)小鼠 5只 ,尾静脉空腹血糖高于 11.1mmol/L且肥胖 ;对照组 :非糖尿病小鼠C5 7BL/KsJ 5只 ,尾静脉空腹血糖低于 6 .0mmol/L ,体重正常。于 30周龄 (成模第6个月末 )时 ,灌注固定取脑 ,透射电镜下观察海马CA1区。结果 糖尿病小鼠海马超微结构发生显著改变包括锥体细胞退变、髓鞘崩解、突触变性等。

壳寡糖延缓db/db小鼠自发性Ⅱ型糖尿病发生发展的作用

研究不同剂量壳寡糖延缓自发性Ⅱ型糖尿病db/db小鼠糖代谢异常发生、发展过程的效果。每日灌胃壳寡糖(COS),定期观测小鼠体重、摄食量、空腹血糖、餐后血糖等,利用口服糖耐量实验的血糖曲线下面积(AUC),评价各组小鼠自发性Ⅱ型糖尿病发展进程。各剂量COS均可有效维持db/db小鼠体重稳定、控制每日饮水量;可降低db/db小鼠空腹血糖、餐后血糖和AUC;延缓小鼠进入糖尿病前期和糖尿病阶段,其中各COS组糖尿病前期阶段可延长50%~100%。COS可减轻db/db小鼠的糖尿病早期症状,延缓其进入糖尿病前期和糖尿病阶段,延长病程前期发展过程,控制血糖水平从而在一定程度上阻滞Ⅱ型糖尿病的发展进程。

db／db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与GLP-1的相关性研究

目的：研究db／db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与胰高血糖素样肽l（GLP-1）相关性，探索多形拟杆菌、产甲烷短杆菌对糖尿病影响的可能机制。方法：用6周龄2型糖尿病模型组db／db（n=6）和对照组db／m（n=6）小鼠，观察第7周到第12周中两组小鼠的体重、空腹血糖水平；第12周之后，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的方法测定肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌的数量，其中以绝对与相对定量两种方式对多形拟杆菌进行检测，

基于高通量测序分析毛菊苣醇提物对db/db小鼠肠道菌群的影响

该文探究毛菊苣醇提物对糖尿病小鼠(db/db小鼠)肠道菌群的影响。该研究以m/m小鼠为正常对照组(CON组),db/db小鼠随机分为模型组(MOD组)、二甲双胍组(MET组)、毛菊苣醇提物低剂量组(CGL组)、毛菊苣醇提物高剂量组(CGH组)。灌胃给药8周,对小鼠体质量、空腹血糖、肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)进行分析,对小鼠粪便进行16S rRNA测序分析,探究毛菊苣醇提物对小鼠肠道菌群的影响。毛菊苣醇提物高剂量组可调节db/db小鼠体质量及血糖,显著降低db/db小鼠TC、TG水平(P<0.05);测序结果显示CON组、MOD组、CGH组三组小鼠肠道菌群情况存在差异,毛菊苣醇提物给药可改善db/db小鼠的肠道菌群失调,上调db/db小鼠肠道菌群中有益菌双歧杆菌属(Bifidobacterium)、Romboutsia、普雷沃氏菌属(Prevotella)菌群相对丰度。研究证明了毛菊苣醇提物给药能调节db/db小鼠肠道菌群,通过提高有益菌相对丰度调节糖脂代谢,可为新疆地产毛菊苣药材资源的开发利用提供全新的研究思路。

荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的影响

目的探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制。方法 9周龄♂db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H,0.1 g·kg^(-1))、低(EFBFL-L,0.05 g·kg^(-1))剂量组,二甲双胍对照组,模型对照组,每组10只。同时以10只db/m小鼠为正常对照组。各组均每天灌胃给药1次,连续8周。于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测小鼠随机血糖(RBG),8周后处死取血清检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和糖基化终末代谢产物(AGEs)含量;HE染色光镜下观察心肌组织形态学改变,电镜下观察心肌超微结构;免疫组化法和Western blot法检测心肌组织葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达。结果 EFBFL能有效抑制db/db小鼠心肌细胞损伤及心肌纤维化的病理进程,降低小鼠血糖及血清中CK、CK-MB、AGEs的含量,增加小鼠心肌组织Glut4蛋白表达水平。结论 EFBFL对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤具有抑制作用,其机制可能与降低小鼠血糖、抑制AGEs的产生及促进心肌细胞Glut4蛋白的表达有关。

2型糖尿病db/db小鼠的生物学特性

目的观察db/db小鼠的生物学特性,为该品系动物的实验研究应用提供基础。方法采用自发性2型糖尿病BKS.Cg-Dock7^(m+/+)Lepr^(db)/JNju小鼠和野生型小鼠,于8、12、16、20和24周龄时测定空腹血糖值,10、12、16、20和24周龄时测定体质量,并于24周龄时测定血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平,检测脏器质量和肝脏系数,并进行组织病理学观察。结果 db/db小鼠的空腹血糖值和体质量始终维持着较高的水平;血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平,以及肝脏和肾脏质量均明显高于野生型小鼠;24周龄db/db小鼠的胰腺和肝脏组织可见明显病理改变。结论 db/db小鼠具有明显的高血糖、高血脂、高胰岛素血症等2型糖尿病特征,是进行2型糖尿病实验研究的理想的动物模型。

自发性Ⅱ型糖尿病模型db／db小鼠生物学特性研究

目的以C57BL／KsJ—db／＋表型正常小鼠为对照组，研究自发性Ⅱ型糖尿病动物C57BL／KsJ—db／db小鼠的体生长曲线、糖代谢曲线、血清胰岛素水平变化、主要脏器重量、脏器系数等部分生物学特性，并探讨其肝脏、肾脏和胰腺等组织病理学变化。方法实验为期20周，从第4周开始，每周测定db／db以及db／＋小鼠体重、血糖，每2周测定血清胰岛素水平，20周龄处死，脏器、脂肪称重，部分组织用10％中性甲醛固定，制作病理切片。结果①db／db小鼠体重、血糖和血清胰岛素水平比同龄对照组高（P〈0．01）；②db／db小鼠各脂肪系数明显大于db／＋小鼠（P〈0．01），而脾脏、胰腺以及肾脏则相对萎缩，特别是脾脏和雌性小鼠的胰腺与对照组相比差异极显著（P〈0．01）；③db／db小鼠肝细胞大片坏死、脂肪变性、炎细胞浸润、纤维组织增生；肾问质组织充血、水肿，肾小管内见蛋白管型、上皮细胞脂肪变性；胰岛数量明显减少、体积缩小，岛内细胞数量也相对减少。结论db／db小鼠是一种肥胖的，伴有高血糖、高度胰岛素抵抗，肝脏、肾脏病变和胰岛功能不足的适用性Ⅱ型糖尿病动物模型。

麦冬寡糖对自发性2型糖尿病db/db小鼠降血糖的作用

为观察麦冬寡糖对自发性2型糖尿病db/db小鼠的降血糖作用,将40只db/db小鼠随机分为5组:模型对照组,阳性对照盐酸二甲双胍组,麦冬寡糖低、中、高剂量组,另设野生型db/m小鼠为正常对照组,分别灌胃给予相应药物或溶媒,连续8周。8周给药结束后,称量小鼠体质量,测定24 h尿蛋白量、24 h尿白蛋白量;给药4周、8周后,分别检测小鼠空腹血糖值(FBG),并于给药8周后进行口服糖耐量实验;最后,取小鼠血清,检测糖化血清蛋白(GSP)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)含量。结果显示,麦冬寡糖能显著减轻自发性2型糖尿病db/db小鼠的体质量,降低空腹血糖值,减少口服葡萄糖耐量实验的曲线下面积并降低GSP含量;麦冬寡糖也能抑制24 h尿蛋白量、24 h尿白蛋白量、BUN和Scr含量的增加,显著降低血清TG、TC、HDL-C和LDL-C含量。综上所述,麦冬寡糖对自发性2型糖尿病db/db小鼠表现的肥胖、高血糖症、血脂异常、肾损伤均有较好的改善作用。

2型糖尿病db/db小鼠肾脏动态病理特点

目的:探讨2型糖尿病db/db小鼠肾脏动态病理特点,阐明其糖尿病肾病的发生发展机制,为糖尿病肾脏并发症的研究提供实验依据。方法:选取SPF级7~8周龄雄性db/db小鼠(模型组)和同龄雄性db/m小鼠(正常组)各16只,分别于8、16和32周龄时检测2组小鼠体质量和空腹血糖(FBG)水平,每组各处死小鼠8只,取肾组织行HE和Masson染色观察其病理形态表现,电镜下观察其超微结构。结果:与正常组比较,模型组小鼠8、16和32周龄时体质量增大(P<0.01),FBG水平明显升高(P<0.01),双肾指数明显降低(P<0.01);32周时模型组小鼠双肾指数明显低于16周时(P<0.05)。HE和Masson染色,16周龄时模型组小鼠肾组织可见明显病理改变,主要是肾小球体积增大和肾小管上皮细胞明显水肿;32周龄时病变明显加重,肾组织中可见大量蓝染胶原物质。电镜观察,16周龄时模型组小鼠肾组织以肾小球基底增厚、足突融合、肾小管上皮细胞线粒体数目减少及形态肿胀为主;32周龄时病变明显加重,可见大量胶原纤维。结论:16周龄糖尿病db/db小鼠肾脏有明显病理改变,主要是肾小球基底增厚、足突融合,32周龄时小鼠肾组织呈明显纤维化。

Ⅱ型糖尿病模型C57BL／KsJ-db／db小鼠的生物学特性研究

目的对C57BL／KsJ—db／db小鼠进行生物学特性研究，满足国内糖尿病研究者的需要。方法随机选取实验鼠进行繁殖性状数据及生长数据测试；并测定其空腹、随机血糖，以及进行糖耐量试验。结果C57BL／KsJ—db／db小鼠从3周龄开始体重迅速增加，显示过度肥胖和糖尿病症兆，并且随年龄增加血糖逐步升高。结论对C57BL／KsJ—db／db小鼠所做的相关生物学特性检测，可供糖尿病研究参考。

荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠肾损伤的影响

目的:探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用,从肾脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平阐明其可能的机制。方法:选择8周龄雄性db/db小鼠,以同窝db/m小鼠为正常对照组,db/db小鼠随机分为模型组、低剂量EFBFL组和高剂量EFBFL组,每组10只。低和高剂量EFBFL组小鼠分别为给予50和100mg·kg-1 EFBFL灌胃,正常对照组和模型组小鼠给予等量蒸馏水灌胃,每天1次,连续8周。于给药前后检测各组小鼠空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血清中血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,计算肾脏指数,通过HE和Masson染色观察小鼠肾组织形态表现,免疫组织化学法和Western blotting法检测小鼠肾组织PPARγ和NF-κB蛋白表达水平。结果:与模型组比较,EFBFL组小鼠FBG及血清中SCr、BUN水平明显降低(P<0.05或P<0.01),肾脏指数增加(P<0.01)。与正常对照组比较,模型组小鼠肾组织中肾小球萎缩,肾小球基底膜弥漫性增厚,足突融合甚至消失,肾组织纤维化程度严重;与模型组比较,EFBFL组小鼠上述表现不同程度改善,以高剂量EFBFL组尤为明显。与模型组比较,EFBFL组小鼠肾组织PPARγ蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:EFBFL可改善自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾损伤,其机制可能与降低小鼠血糖、促进肾PPARγ蛋白的表达及下调NF-κB的蛋白表达有关。

2型糖尿病肾病db/db小鼠的中医证候演变分析

目的:分析2型糖尿病肾病(T2DN)db/db小鼠的中医证候演变规律,为db/db小鼠在中医药干预T2DN研究中的应用提供依据。方法:建立中医证候表征体系,采集并分析8~20周龄db/db小鼠及同窝野生型小鼠的中医证候表征信息,包括形体、活动、二便、舌色、进食、体质量、空腹血糖(FBG)、血脂、24 h尿量、尿微量白蛋白排泄等。结果:8~14周龄db/db小鼠形体肥胖,大便秘结,活动少,力量小,进食量、体质量、FBG、24 h尿量及尿微量白蛋白排泄逐渐增加,舌质红,符合消渴病早期阳明热盛的证候特点,兼有痰湿、气虚证表现;14~16周龄db/db小鼠纳食减少,体质量、尿微量白蛋白排泄增加,符合脾气亏虚、痰湿蕴阻的证候特点;16~20周龄db/db小鼠进食量、体质量、24 h尿量下降,FBG及尿微量白蛋白排泄持续增加,血脂水平高,部分小鼠出现精神萎靡、蜷缩喜卧等表现,符合消渴病中后期脾肾亏虚、气阴两虚的证候特点,兼有肾阳虚、痰湿证表现。结论:本实验中,8~20周龄db/db小鼠T2DN的中医证候演变符合“实则阳明,虚则太阴,久病及肾”的病机转变特点。其中,8~14周龄db/db小鼠以阳明热盛证为主,兼有痰湿、气虚证;14~16周龄db/db小鼠以脾气亏虚、痰湿阻滞证为主;16~20周龄db/db小鼠以气阴两虚、脾肾亏虚证为主,兼有肾阳虚、痰湿证。

自发性2型糖尿病db/db小鼠肝病理损伤特点

目的动态观察自发性2型糖尿病db/db小鼠肝产生的病理变化及特点,为将db/db小鼠肝作为2型糖尿病肝损伤模型的实验研究提供基础理论和实验依据。方法 7～8周龄,雄性,SPF级db/m小鼠作为对照组,糖尿病db/db小鼠作为模型组,各16只。动态观察其体重、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性,计算肝指数,光镜与电镜下观察肝的病理学改变。结果 db/db小鼠空腹血糖、血清ALT、AST活性均明显高于db/m小鼠,组织学检查发现db/db小鼠肝在16周龄时就出现严重损害,主要表现为肝细胞脂肪变性、炎细胞浸润等;到32周龄时病变加剧,镜下可见肝组织内有大量的胶原纤维;电镜下可见线粒体、内质网等结构被破坏甚至消失,出现明显的脂滴、炎细胞,组织内含有大量的胶原纤维。结论 db/db小鼠16周龄时肝出现明显的脂肪变性以及炎细胞浸润等,32周龄时表现为明显的纤维化,因此db/db小鼠的肝可作为实验研究时良好的2型糖尿病肝损伤模型。

中西药治疗糖尿病视网膜病变db/db小鼠的研究进展

糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)是糖尿病导致的神经血管单元病变,发病率随着糖尿病患者人口增多而显著上升,是成年人低视力和致盲的主要病因,然而其发病机制十分复杂且治疗手段有限,故利用合理的动物模型去探寻DR的发病机制与治疗靶点至关重要。db/db小鼠是目前比较成熟的一种自发性2型糖尿病(T2DM)动物模型,广泛应用于2型DR的早期防治研究中。本文就db/db小鼠模型在DR发病机制探索和中西医药理研究等方面的进展予以阐述,以期为DR的相关机制研究及药物研发提供一定的参考依据。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病KKAy动物模型的探索与评价

目的探索2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病KKAy动物模型的年龄节点和稳定性。方法12周龄C57BL/6J小鼠18只作为对照组,普通饲料喂养;KKAy小鼠18只作为模型组,高脂饲料喂养。对照组和模型组分别于14、18、22周龄各随机处死6只小鼠,检测血糖、体重、肝功、血脂等指标,观察病理学形态改变情况。结果与对照组相比,自14周龄起,模型组小鼠体重、肝重、肝重指数、血糖水平显著增加(P<0.05),模型组血糖水平符合糖尿病改变。血清学结果显示,与对照组相比,模型组小鼠的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.05),2组小鼠甘油三酯(TG)水平未形成显著性差异(P>0.05)。病理染色显示,14周龄模型组小鼠存在肝细胞脂肪变性,22周龄出现炎性细胞浸润。结论14周龄KKAy小鼠经高脂饮食诱导可作为研究2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病稳定的动物模型。

食源性肥胖大鼠2型糖尿病模型的建立

背景:高脂饮食加小剂量链脲佐菌素是目前国内最常用的2型糖尿病大鼠造模方式,但高脂饮食仅能诱导50%大鼠发生胰岛素抵抗,因此还需寻找更理想的2型糖尿病大鼠建模方法。目的:选择食源性肥胖大鼠进行小剂量链脲佐菌素腹腔注射,建立更理想的2型糖尿病动物模型。方法:将SD大鼠随机分成对照组和高脂饮食组。4周后,据大鼠体质量将高脂饮食组分为食源性肥胖组和食源性肥胖抵抗组。8周后,所有大鼠均给予小剂量链脲佐菌素(30mg/kg)腹腔注射,将注射10d后空腹血糖>7.8mmol/L且稳定2周以上者纳为2型糖尿病大鼠模型。检测各组大鼠的空腹血糖、血脂、胰岛素;评价各组大鼠的胰岛素抵抗程度;比较各组大鼠的2型糖尿病成模率。结果与结论:与对照组及食源性肥胖抵抗组相比,食源性肥胖组大鼠出现明显的体质量增加、高血脂、高胰岛素血症及胰岛素抵抗(P<0.01)。注射链脲佐菌素后食源性肥胖组2型糖尿病成模率高达100%,食源性肥胖抵抗组成模率仅为12.5%。由结果可知选择食源性肥胖组大鼠作为2型糖尿病造模对象,是2型糖尿病造模方法的成功改良。