“调理脾胃针刺法”对2型糖尿病肾病大鼠足细胞中PCX、CD2AP、nephrin、desmin表达的影响

目的 研究“调理脾胃针刺法”对2型糖尿病肾病大鼠足细胞中足细胞标记蛋白(PCX)、CD2相关蛋白(CD2AP)、肾病蛋白(nephrin)、结蛋白(desmin)基因表达的影响,并阐明其可能的作用机制。方法 将70只健康雄性SD大鼠,随机分为模型组52只,空白组18只,将模型组大鼠喂养8周高脂高糖饲料之后,腹腔低剂量(30 mg·kg-1)注射链脲佐菌素,建立2型糖尿病肾病大鼠模型。将造模成功的36只大鼠按照血糖值,以及尿蛋白定性结果构成比,采用分层随机的方法分为针刺组4周(n=6),模型组4周(n=6);针刺组8周(n=6),模型组8周(n=6);针刺组12周(n=6),模型组12周(n=6)。空白组随机分为空白组4周(n=6)、空白组8周(n=6)、空白组12周(n=6)。将针刺组穿着针刺罩衣固定,采用“调理脾胃针刺法”干预,分别针刺4周、8周及12周。模型组和空白组予相同抓取固定。观测各组干预不同周期后,测定24h尿蛋白;采用HE染色光镜下观察大鼠肾脏病理变化情况;采用荧光定量PCR法检测PCX、CD2AP、nephrin和desmin mRNA表达水平。结果 4周、8周及12周后各组组间比较,针刺组24h尿蛋白含量低于模型组(P <0.05);肾脏HE染色,模型组肾小球增生,散在炎性细胞浸润,部分肾小管管腔变窄,系膜基质增生,基底膜轻度增厚,而针刺组上述病理变化均小于模型组(P <0.05);4周、8周及12周后各组组间比较,针刺组PCX、CD2AP和nephrin mRNA表达显著高于模型组(P <0.01);8周、12周后各组组间比较,针刺组desmin基因表达显著低于模型组(P <0.01)。结论 “调理脾胃针刺法”可降低2型糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白含量,通过其肾脏足细胞PCX、CD2AP、nephrin蛋白及基因表达的水平,降低desmin蛋白及基因表达的水平,以改善2型糖尿病肾病大鼠足细胞损伤,减轻肾小球基底膜增厚,从而延缓DN的进展,其降低尿蛋白含量的作用机制可能与此相关。

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白(FN)和胶原Ⅳ蛋白(Ⅳ-CP)表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/(kg·d),治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高(P<0.05);免疫组化、RT-PCR和Western Blot与模型组相比治疗组大鼠肾脏组织FN和Ⅳ-CP表达明显降低(P<0.05)。结论苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织细胞间纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达,改善肾功能。