FOXP3在BRCA1/2突变乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨BRCA1/2突变乳腺癌FOXP3表达情况及潜在意义。方法选取北京大学肿瘤医院48例BRCA突变者(BRCA116例,BRCA232例)和78例年龄匹配的非突变者,采用免疫组织化学检测乳腺癌组织FOXP3的表达情况。为验证免疫组织化学结果,分析TCGA-BRCA中39例BRCA1、36例BRCA2和948例非携带者乳腺癌的FOXP3 RNA表达水平及其与同源重组缺陷评分的关系。结果在BRCA1突变者中FOXP3阳性率43.8%(7/16),BRCA2突变者为59.4%(19/32),非携带者为9.0%(7/78)。BRCA1/2突变患者FOXP3阳性率均显著高于非突变者(P=0.002;P<0.001)。TCGA-BRCA结果显示,BRCA1/2突变乳腺癌的FOXP3 RNA水平也显著高于非携带者(P=0.02,P=0.004)。FOXP3 RNA水平与同源重组缺陷评分正相关(Spearman R=0.30,P<2.2e-16)。结论BRCA1/2突变乳腺癌较非突变者FOXP3表达更高,可能对免疫治疗更敏感。

BRCA2突变的转移性去势抵抗前列腺癌侵犯膀胱行奥拉帕利联合局灶手术治疗的1例多学科讨论

1参加人员讨论嘉宾:泌尿外科贺大林、陈兴发、李磊、吴开杰、郑新宇、蒋凡医师医学影像科王蓉、段小艺医师病理科梁华医师肿瘤内科姚煜医师肿瘤放疗科刘锐医师病例汇报人:泌尿外科蒋凡医师记录人:癌症中心田英医师2病例介绍患者男性,65岁,2017年4月因“进行性排尿困难6个月,加重2个月”于外院诊断为前列腺增生,总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen,t PSA)7.820(参考值0~4.1)ng/mL,超声提示前列腺增生,行经尿道前列腺电切术,术后病理结果提示前列腺腺癌(Gleason4+5=9分),遂行骨扫描提示全身多发骨转移瘤,诊断:前列腺癌(T2N0M1),后行规律内分泌治疗(比卡鲁胺+戈舍瑞林),期间t PSA逐渐降低至<0.003ng/mL并维持3年余(图1)。2020年11月复查t PSA0.28ng/mL,泌尿系超声及膀胱镜检查提示:后尿道肿瘤、膀胱肿瘤。

成人正常核型原发急性髓系白血病中TET2突变情况及临床意义

目的探讨成人正常核型原发急性髓系白血病(AML)患者中TET2突变情况及其临床意义。方法收集98例成人正常核型原发AML患者的骨髓标本,PCR扩增目的片段,然后进行直接测序检测TET2突变情况,并探讨TET2突变与AML患者临床特征、疗效及生存率的关系。结果 23例AML患者出现TET2突变,且突变的白血病类型多为M2、M5型;与TET2野生型AML患者相比,TET2突变患者骨髓原始细胞、白细胞计数高,血小板计数低(P均<0.05),且TET2突变型患者具有较短的总生存期;TET2突变型患者的年龄、性别、血红蛋白、化疗方案、化疗疗效、危险分层、FLT3-ITD和NPM1突变与TET2野生型患者相比差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论成人正常核型原发AML患者中TET2突变发生率较高,与其预后差有关。

成人急性淋巴细胞白血病CRLF2突变特点及其临床意义

目的:探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)中CRLF2突变特点及其与预后关系。方法:特异性扩增CRLF2外显子,其后DNA纯化、测序,分析突变类型、突变发生率及其临床特点。结果:本组共检测到6种基因改变类型,其中R186S提示预后较好,L86I、F232F、W255C可能与预后不良有关。结论:CRLF2突变在成人急性淋巴细胞白血病的发生发展中起着重要作用,其存在可能提示不良预后。

真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者骨髓病理特点及JAK2突变

目的:探讨真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(IMF)患者的骨髓病理特点并且检测JAK2V617F突变的发生率,分析骨髓中纤维增生程度以及JAK2V617F突变对PV、ET患者白细胞数的影响。方法:69例初诊患者的骨髓切片经HGF染色以及Gomori染色后进行形态学研究,并利用real-timePCR法测38例患者的骨髓或者外周血的JAK2V617F突变;分析骨髓切片中纤维组织增生程度以及JAK2突变对患者白细胞数的影响。结果:15例PV和15例ET患者的骨髓切片中可以观察到不同程度的纤维组织增生,所有PV、ET、IMF患者骨髓中可见到巨核细胞增多、巨核细胞多形性改变以及巨核细胞定位于骨小梁旁;12例PV、4例ET、4例IMF中检测到JAK2V617F突变;有突变和无突变患者发病时白细胞数均值分别为20.4×109/L和11.4×109/L,不同纤维增生程度的PV、ET患者的白细胞数均值差异无显著性(P=0.367)。结论:69例PV、ET、IMF患者骨髓切片中均有巨核细胞的形态以及定位变化,PV、ET、IMF患者中JAK2V617F突变的发生率分别为80%、27%、50%;有突变患者的白细胞数均值高于无突变患者,初诊的PV、ET患者骨髓中不同纤维增生程度患者的白细胞均值无明显差异。

秋冬之交雪玉洞PCO2突变的高分辨率监测与分析

雪玉洞是国内著名的旅游洞穴,洞内4-10月的异常高PCO_2,影响了洞内景观的保护,也不利于旅游活动的开展。为解译洞穴微气候的变化特征,该文利用专利技术—高分辨率洞穴CO_2浓度与水中CO_2浓度同步自动监测技术,对雪玉洞洞穴CO_2浓度及地下河水中CO_2浓度进行长达2个月的高密度连续监测,捕捉到11月份雪玉洞洞穴CO_2快速变化过程,发现雪玉洞洞穴CO_2浓度与温度、降雨的气候变化密切相关,受旅游活动的影响较小;雪玉洞洞穴CO_2浓度与地下河脱气作用程度具有同步变化的特征,地下河脱气作用主导了雪玉洞洞穴CO_2浓度变化。文章建议建立适当的通风排气系统和全面的洞穴环境监测系统,提高游客舒适度,协调洞穴景观生长的关系;加强雪玉洞地下河上游流域碳汇来源的研究,针对性地提出控制碳汇输入的方案。

人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定

根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoRI和BamHⅠ对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切鉴定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.

拉帕替尼穿插化疗治疗HER-2突变阳性晚期非小细胞肺癌1例

人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor，HER-2）在乳腺癌中是一个重要的治疗靶点和预测指标，但作为一种肺癌生物标志很少被描述。

胚系基因BRCA1/2突变及其相关临床病理特征

目的探讨胚系基因BRCA1/2突变携带者突变类型、突变位点,及其与相关临床病理特征。方法回顾性分析2017年1月至2019年3月广东省妇幼保健院通过高通量测序确定携带胚系基因BRCA1/2突变的患者情况,并收集患者相关年龄、组织学分级、淋巴结状态以及ER、PR、HER-2状态等临床病理资料。结果在16例胚系基因BRCA1/2突变携带者中,检测到BRCA1突变位点9个,BRCA2突变位点8个。检测到BRCA1基因c.5335delC位点致病移码突变1个,BRCA2基因c.T5836C意义不明点突变1个,其余错义突变及点突变均为良性突变。16例BRCA1/2基因突变携带者平均年龄43.68岁,50%患者年龄<40岁。9例乳腺浸润性癌患者同时携带有BRCA1和BRCA2基因突变7例,单一携带BRCA2突变2例,其中1例BRCA2意义不明点突变者为双侧乳腺浸润癌,另1例BRCA1致病移码突变者为三阴乳腺癌。结论胚系基因BRCA1/2突变以良性突变为主,但非良性突变,可能与乳腺癌恶性程度高存在一定联系。

TNNI2突变转基因小鼠模型的建立

目的建立TNNI2突变转基因小鼠模型。方法构建pEGFP-tnni2转基因构件,TNNI2基因的第175个氨基酸缺失,通过原核显微注射法,把线性化、纯化后的外源基因pEGFP-tnni2注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠。用PCR和Southern方法检测子代鼠尾DNA鉴定基因型。通过RT-PCR方法检测tnni2基因表达。结果移植注射胚胎115枚给4只假孕小鼠共出生了23只后代鼠,经PCR和Southern方法检测得到4只阳性小鼠。对其子代进行RT-PCR检测,tnni2基因在肌肉、心脏内表达。结论通过显微注射法使外源基因pEGFP-tnni2(TNNI2基因的第175个氨基酸缺失)在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP-tnni2的转基因小鼠模型。

重组KGF-2突变体对TNBS诱导的复发性大鼠炎性肠病模型治疗作用的研究

目的制备复发性大鼠炎性肠病模型,评价重组KGF-2突变体(STEA)给药对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的复发性大鼠炎性肠病模型的治疗效果。方法利用2%的TNBS(100mg/kg)对雄性Wistar大鼠进行灌肠,3周后,再次利用TNBS(10毫克/只)处理这些大鼠。于再次灌肠当天,治疗组的大鼠腹腔注射3mg/kg STEA,模型对照组和正常组注射等量的PB缓冲液,每天1次,连续7天。对各组大鼠的生存状态、血清中IL-6和IL-1β的表达水平、以及结肠组织病理变化等情况进行观察和分析。结果利用TNBS二次致敏的方法,成功制备了复发性大鼠炎性肠病模型。STEA给药能显著降低模型大鼠血清中IL-6和IL-1β的表达水平,提高大鼠的存活率,促进受损结肠黏膜的修复。结论 STEA对TNBS诱导的复发性大鼠的结肠损伤具有治疗作用。

European Urology:具有ERBB2突变的浸润性膀胱癌对新辅助化疗更敏感

以顺铂为基础的新辅助化疗联合根治性膀胱切除术是目前针对高危基层浸润性膀胱癌的一线治疗方案，但是只有大约30％～40％的患者对新辅助化疗敏感。而目前尚无可靠的临床或者病理指标能够预测化疗敏感性。近日，GROENENDIJK 等在 Eu-ropean Urology杂志发表了他们在对比新辅助化疗敏感组和不敏感组浸润性膀胱癌组织DNA 改变时的新发现：具有ERBB2（erb-b2 receptor tyrosine ki-nase 2；即 HER2，epidermal grow th factor receptor 2）突变的浸润性膀胱癌对新辅助化疗更敏感。

毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素——2突变体发酵条件的优化

巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala;18leu→Met;19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM71/pPIC9K-IL-2的生长及产物表达规律,通过3因素(即:发酵液起始pH值、甲醇诱导浓度、诱导时间)从3个不同水平上进行正交试验,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得出摇瓶发酵表达MvhIL-2的最佳条件:发酵液初始pH 6.0,甲醇诱导浓度为0.5%,诱导72 h,最终使目的产物达到菌体总蛋白的30%以上,表达的MvhIL-2考马斯亮蓝染色条带最明显,为其进一步上发酵罐,大量生产重组人白细胞介素-2奠定了基础.

AtIQM2突变影响病菌侵染引起的荧光参数变化

拟南芥IQM2由AT3G13600编码,含有1个IQ基序,是一个钙调素结合蛋白.IQM2的突变体iqm2-2及其野生型Landsberg erecta(Ler)在丁香假单胞菌番茄致病变种(Pst DC3000)的侵染下,均出现病斑,且程度未呈现明显差异.光合作用对植物的生长发育和对环境的反应至关重要,荧光参数是衡量光合作用的重要指标.为此,本研究测定了Pst DC3000侵染下iqm2-2与Ler的光系统II叶绿素荧光参数.结果表明,喷菌7 d后Ler和iqm2-2的光量子产量均明显下降,不过Ler的下降更快且差异显著;光化学猝灭系数和相对电子传递速率也呈不同程度下降,最大量子产率变化不大.由此推断IQM2参与了植物对病菌的反应,且可能与其对光合作用的影响有关,但其机制有待研究.

PARP抑制剂治疗BRCA1/2突变转移性乳腺癌的研究进展

近些年PARP抑制剂成为治疗乳腺癌临床研究新热点,大量研究证实其在BRCA1/2突变转移性乳腺癌患者中获益。本文就PARP抑制剂的作用机制和几种PARP抑制剂治疗BRCA1/2突变转移性乳腺癌患者的研究进展进行综述。

IDH1/2突变诱导脑胶质瘤基因组高甲基化及肿瘤细胞分化阻滞

目前异柠檬酸脱氢酶1/2(isocitrate dehydrogenase1/2,IDH1/2)基因突变在脑胶质瘤的致瘤机制还未彻底阐明,但一系列研究提示突变IDH1/2能诱导脑胶质瘤基因组和组蛋白高甲基化,这些表观遗传改变会影响分化相关基因的表达,导致肿瘤细胞分化程度降低,出现恶性表型。同时以突变IDH1/2为抑制靶点的小分子药物能促进肿瘤细胞分化,表现出一定的治疗作用。本文对该方向上的研究进展作一系统综述,期望能为脑胶质瘤的治疗提供一条新思路。

UV-B预处理对拟南芥uvr8-2突变体响应干旱胁迫的影响

以拟南芥uvr8-2突变体植株为材料,研究UV-B预处理对植株响应干旱胁迫的影响以及植物激素在此过程中的作用.实验结果表明:从形态观察到生理指标,UV-B预处理显著提高了拟南芥uvr8-2突变体的干旱适应性,与野生型Ler的结果一致;UV-B预处理显著提高了拟南芥uvr8-2突变体抗氧化酶SOD、POD、CAT活性,抗氧化酶基因POD和CAT的表达量,以及植物激素ABA、JA、SA的质量分数,降低了细胞膜受损程度.由此推测:UV-B预处理诱导uvr8-2植株的干旱适应性中存在一条不依赖于UVR8的信号转导途径,即通过增加植物逆境响应激素ABA、JA和SA的质量分数,调控抗氧化酶基因CAT和POD表达和增强抗氧化酶活性,从而缓解干旱胁迫下拟南芥的叶片萎焉、相对含水量下降等现象.

特发性血小板增多症JAK2突变患者血象与骨髓象改变

目的探讨特发性血小板增多症（ET）JAK2突变患者血象与骨髓象特征。方法分析18例JAK2突变阳性和25例阴性ET患者血象与骨髓象。结果JAK2突变阳性组血小板计数、白细胞计数和中性粒细胞绝对值和血红蛋白量与红细胞计数，明显高于阴性组（P〈0．01）：骨髓象中，阳性组有核细胞增生明显活跃高于而增生减低低于阴性组（P〈0．05）、阳性组幼粒细胞高于阴性组（P〈0．05），而阴性组成熟阶段粒细胞高于阳性组（P〈0．05），阳性组巨核细胞数、胞体增大和高核叶明显高于阴性组（P〈0．01）。结论JAK2突变阳性和阴性ET血象与骨髓象不同，有助于深入了解形态学与基因突变的关系和诊断。

BRCA1/2突变的中国健康女性乳腺预防性切除及Ⅰ期重建的临床实践

目的:探讨对携带BRCA1/2突变的中国健康女性实施乳腺预防性切除及I期重建的可行性。方法:选择2018年1月至2019年2月3例于北京大学国际医院就诊的携带BRCA1/2突变的中国健康女性,其中2例携带BRCA1突变、1例携带BRCA2突变,均有乳腺癌家族史,年龄为34~36岁,实施预防性保留乳头-乳晕的双侧乳腺切除和Ⅰ期假体重建术。结果:3例患者术后无并发症发生,术后中位随访时间为18个月,均无乳腺癌发生,对重建乳房外形满意,且焦虑和恐惧情绪显著下降,取得良好的疗效。结论:对携带BRCA1/2突变且有乳腺癌家族史的中国健康女性,在严格筛选的基础上,可慎重开展乳腺预防性切除及Ⅰ期重建术。

吡咯替尼对携带HER-2突变的HER-2阴性晚期乳腺癌患者的疗效观察

目的:评估吡咯替尼对携带HER-2突变的HER-2阴性晚期乳腺癌患者的治疗疗效和安全性。方法:回顾性分析2018年1月至2019年6月于北京市朝阳区桓兴肿瘤医院收治的13例携带HER-2突变的HER-2阴性晚期乳腺癌患者的临床资料,均使用吡咯替尼单药行抗HER-2治疗,对患者的治疗疗效和不良反应进行综合评估。结果:13例患者中3例因不良反应难以耐受出组,未行疗效评价,其余10例患者中获得完全缓解(complete response,CR)1例、部分缓解(partial response,PR)3例、疾病稳定(stable disease,SD)3例、疾病进展(progressive disease,PD)3例。客观缓解(CR+PR)率为40%(4/10),临床获益(CR+PR+SD≥6.0个月)率为60%(6/10),疾病控制(CR+PR+SD)率为70%(7/10)。无进展生存时间最长者达15.5个月,中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)为4.9个月(95%CI:3.8~6.0)。吡咯替尼最常见的不良反应为腹泻、占84.6%(11/13),3级及以上的不良反应包括腹泻为15.4%(2/13)、恶心为7.7%(1/13)、呕吐为7.7%(1/13)。结论:携带HER-2突变的HER-2阴性晚期乳腺癌患者,可能从吡咯替尼的抗HER-2治疗中获益。