点饱和突变提高腈水解酶不对称合成L-2-氨基丁酸的酶活

为了提高腈水解酶催化外消旋2-氨基丁腈不对称合成L-2-氨基丁酸的能力,首先从实验室的腈水解重组大肠杆菌中筛选获得了一株立体选择性较高的菌株E.coli BL21(DE3)/p ET-28bbll6402。通过对其腈水解酶Nitbll6402进行三维结构同源模建和"热点"氨基酸分析,选择了6个位于"疏水口袋"附近的氨基酸残基(Y198、P239、P272、K251、E240和M234)进行点饱和突变,得到酶活力明显提高的突变型腈水解酶E240G和K251C。在60 mmol/L底物下,生成的L-2-氨基丁酸的e.e值均为100%,浓度分别为5.43 g/L和5.29 g/L,比原始酶分别提高了63%和59%。此结果表明,E240G或K251C的单点突变均能在不影响立体选择性的前提下不同程度的提高腈水解酶Nitbll6402合成L-2-氨基丁酸的能力,这将为利用腈水解酶催化合成L-2-氨基丁酸的进一步研究奠定重要的理论基础。

2-苯基-1-丁醇与2-二甲氨基-2-苯基丁腈的合成

目的为马来酸曲美布汀的重要中间体2-二甲氨基-2-苯基-1-丁醇的合成奠定基础。方法苯乙腈与溴乙烷进行烃化反应得2-苯基-1-丁腈,所得产物经水解得2-苯基-1-丁酸,然后通过硼氢化钠-碘体系还原得2-苯基-1-丁醇;苯乙腈与N-溴代丁二酰亚胺进行卤代反应得溴代苯乙腈,所得产物与二甲胺进行烃化反应得2-二甲氨基苯乙腈,然后与溴乙烷进行烃化反应得2-二甲氨基-2-苯基丁腈。结果合成了2-苯基-1-丁醇和2-二甲氨基-2-苯基丁腈,总收率为分别为51%和59.4%。目标产物的结构经核磁共振氢谱、质谱确证。结论本合成方法原料易得,操作简单,收率较高,适合于工业化生产。

酸催化法合成2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺

对咪唑啉酮类除草剂通用中间体 2 -氨基 - 2 ,3-二甲基丁酰胺的合成方法进行了研究 ,并对影响反应收率的主要因素进行了讨论 ,收率达到 95 % ,产品质量纯度为 96 %。

2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的合成研究

采用酸催化法合成2—氨基—2,3—二甲基丁酰胺,并对影响反应收率的主要因素进行了探讨,收率为93％,产品纯度为96％。

气相色谱法分析2-氨基-2,3-二甲基丁腈和2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺

采用DB-1701毛细管柱,以邻二甲苯为内标物,用氢火焰离子化检测器对2-氨基-2,3-二甲基丁腈和2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺进行定量分析。结果表明:2-氨基-2,3-二甲基丁腈和2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺线性相关系数为分别0.9997和1.000,标准偏差为0.19和0.22,变异系数为0.20%和0.24%。该方法具有简便、快速、精密度和准确度高、线性关系好的优点,是较理想的分析方法。

(R)-2-氨基-2-,3-二甲基丁腈的制备

(R)-2-氨基-2,3-二甲基丁腈是制备高效杀菌剂和除草剂(US 4,798,619和US 5,334,576)的中间体,如高效除草剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等.专利EP1050529报道了它的制备方法和稳定贮存方法.