含脂食品辐照标志物2-烷基环丁酮检测技术研究进展

对比分析欧盟标准EN1785:2003方法,综述了近年来2-烷基环丁酮(2-Alkylcyclobutanones,2-ACBs)在提取、净化与检测等方面的研究进展。采用乙腈溶剂直接萃取含脂辐照样品中的2-ACBs→商品化固相萃取小柱净化→GC-MS检测是目前替代EN1785的潜力方法。固相微萃取、柱前衍生化及间接酶联免疫等方法具有快速、节约溶剂、低检出限等优点,但需要对操作条件进一步优化。

固相萃取-气相色谱-质谱法测定辐照鱼油中2-烷基环丁酮

提出了固相萃取-气相色谱-质谱法测定辐照鱼油中2-烷基环丁酮（2-十二烷基环丁酮和2-十四烷基环丁酮）含量的方法。0.300g辐照鱼油样品用正己烷溶解,ProElut Silica固相萃取柱净化。在气相色谱分离中用HP-5MS色谱柱为固定相,在质谱分析中采用选择离子监测模式。2种2-烷基环丁酮的质量浓度均在0.01~1.0mg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,方法的测定下限（10S/N）为10μg·kg-1。加标回收率在91.2%~96.0%之间,测定值的相对标准偏差（n=6）在3.7%~5.9%之间。

固相萃取-气相色谱串联质谱法测定预包装面皮中2-十二烷基环丁酮

建立预包装面皮中2-十二烷基环丁酮的固相萃取-气相色谱串联质谱检测方法。有机溶剂正己烷提取预包装面皮中的油脂,经液液萃取,Silica固相萃取净化后,采用气相色谱-串联质谱法检测2-十二烷基环丁酮。结果表明,本方法在0.01~1.00 mg·L^(-1),线性相关系数为0.9993,精密度在2.2%~5.1%,回收率在85.0%~98.4%,检出限为0.5μg·kg^(-1)。

加速溶剂萃取/GC-MS法对辐照肉类食品中2-十二烷基环丁酮的检测

应用加速溶剂萃取(ASE)/气相色谱-质谱(GC-MS)技术建立了辐照肉类食品中2-十二烷基环丁酮(2-DCB)的检测方法。采用加速溶剂萃取法从辐照过的肉类样品中提脂,萃取液加入乙腈后冰箱冷冻去除脂肪,LC-Si固相萃取小柱净化,氮气吹干后加入内标定容,于GC-MS仪上测定,在0.1～0.4μg/g(以脂肪计)范围内的回收率为78%～92%,RSD小于11%,定量下限为0.1μg/g(以脂肪计)。同时采用该方法对辐照剂量为1～8kGy的猪肉、鸡肉和鱼肉进行检测,再次证明了辐照剂量与脂肪中2-DCB含量存在线性相关关系。

直接溶剂萃取/气相色谱-质谱检测辐照牛肉中的2-十二烷基环丁酮

应用直接溶剂萃取/气相色谱-质谱技术,建立了辐照牛肉中2-十二烷基环丁酮(2-Dodecylcyclobu-tanone,2-DCB)的快速检测方法。5 g牛肉糜与7 g无水Na2SO4混合均匀后,加入150 mL乙腈,搅拌提取2 min,提取液过滤转移至500 mL圆底烧瓶中,提取重复2次,将提取液旋转蒸干,用正己烷清洗烧瓶并收集,定容至50 mL,取10 mL氮吹浓缩至1 mL,用硅胶固相萃取小柱(1 g,6 mL)净化,淋洗液经氮气吹干后用正己烷定容至1 mL,取1μL供气相色谱-质谱测定。本方法检出限为0.004 mg/kg,定量限为0.01 mg/kg;牛肉糜中2-DCB添加浓度在0.01～0.50 mg/kg范围内的回收率为87.9%～91.6%,相对标准偏差小于7%,样品前处理仅需60～90 min。采用本方法对辐照剂量为0.5～7.0 kGy的牛肉进行检测,表明辐照剂量与牛肉中2-DCB含量存在线性相关关系(y=0.0608x-0.0004,相关系数R2=0.9899)。

吸收剂量、贮藏时间及贮藏温度对辐照牛肉中2-十二烷基环丁酮的影响

分析了辐照牛肉中辐解产物2-十二烷基环丁酮在不同的吸收剂量（0.5~10.0kGy）、贮藏时间（0-40d）及贮藏温度（-20℃~4℃）下的变化规律。采用硅胶层析柱-气相色谱/质谱联用技术萃取分离并检测。结果表明,2-十二烷基环丁酮的浓度与吸收剂量呈线性正相关,随着贮藏时间延长其含量减少,贮藏温度对其没有显著影响。利用2-十二烷基环丁酮可鉴定牛肉是否经过辐照,在已知贮藏温度和时间的条件下,可评估辐照牛肉的大约吸收剂量范围。

GC-QqQ-MS/MS法检测油脂类功能食品中辐照标志物2-十二烷基环丁酮和2-十四烷基环丁酮

建立了气相色谱-三重四极杆串联质谱（GC-QqQ-MS/MS）同时检测油脂类功能食品中辐照标志物2-烷基环丁酮（2-ACBs）类化合物中2-十二烷基环丁酮（2-DCB）和2-十四烷基环丁酮（2-TCB）的方法。样品用正己烷溶解,过ProElut Silica固相萃取柱净化。结果表明,2-DCB和2-TCB与基质干扰峰得到较好的分离,在0.005~1.0mg/L浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性相关系数（R2）大于0.999。在油脂类功能食品中添加0.01、0.05、0.10mg/kg水平的2-DCB和2-TCB,平均加标回收率为85.6%~97.1%,相对标准偏差（RSD）小于7.0%（n=6）,方法定量限（LOQ）为5μg/kg。该方法操作简便、耗时短、灵敏度高、稳定性好,能为油脂类功能食品中辐照标志物的检测提供理论依据。

辐照猪肉产生的2-十二烷基环丁酮剂量检测及其微波加热影响

以2-十二烷基环丁酮(2-DCB)为检测目标物,使用60Coγ射线在1-10kGy辐照剂量下对猪肉进行辐照,用气质联用仪(GC-MS)进行定量分析,显示2-DCB浓度与辐照剂量呈线性关系,从而计算出辐照加工猪肉盲样的辐照剂量～1.19kGy。对辐照后的猪肉进行微波加热,发现微波加热方式对2-DCB基本没有影响。

辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮气相色谱-质谱测定方法研究

通过对辐照含脂食品分析方法研究,分析了辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮气相色谱-质谱(GC-MS)测定法的原理和方法步骤。并对该方法的仪器条件的选择、标样稳定性、方法检出限、精密度、回收率及不同辐照剂量和辐照含脂食品存储期对测定结果的影响等方面均做了研究。结果表明,该法精密度变异系数小于2.6,绝对差值小于14%,加标回收率为84.0%～113.0%,线性范围为0.01～0.5μg/ml,回归系数为0.9996,方法检出限为10μg/kg。

辐解产物2-十二烷基环丁酮的测定方法

【目的】建立1种含脂辐照食品中特异性辐解产物2-十二烷基环丁酮的萃取分离以及定量分析的新方法。【方法】采用硅胶层析柱萃取分离、气相色谱-质谱联用检测,对淋洗剂浓度、硅胶活化程度、收集时间及气相色谱-质谱条件等技术参数进行优化。【结果】该方法对2-十二烷基环丁酮标准品的最低检出限为0.005mg·L-1,0.1～2.0mg·L-1的添加回收率为75.9%～103.9%,相对标准偏差(RSD)均小于5.7%。【结论】与欧盟标准方法EN1785进行比较,硅胶柱分离法具有成本低、提取效率高、重现性好、检出限低、承载样品量大等优点。

包装形式和自由基清除剂对辐照特异性产物2-十二烷基环丁酮的影响规律研究

研究分析了不同的包装形式、添加自由基清除剂以及在贮藏过程中对辐照棕榈酸及牛肉中辐解产物2-十二烷基环丁酮变化规律的影响。采用硅胶层析柱-气相色谱/质谱联用技术萃取分离和检测2-十二烷基环丁酮。结果表明,隔光包装会显著降低辐照样品中2-十二烷基环丁酮的产生,减少包装内氧气含量并不能导致2-十二烷基环丁酮的含量减少,随着贮藏时间延长,不同包装形式内2-十二烷基环丁酮的变化趋势基本一致。添加自由基清除剂可以明显降低样品中2-十二烷基环丁酮浓度,随着贮藏时间延长这种作用逐渐减弱。

液相色谱串联质谱法测定辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮的研究

以辐照含脂食品为实验材料,首次建立了液相色谱串联质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)测定辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮(2-DCB)的含量。样品经正己烷提取浓缩得到脂肪,再经中性氧化铝柱净化后,采用液相色谱串联质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)分析,多反应监测模式下(MRM)外标法定量。结果表明:方法在5～100μg/L范围内线性良好,线性相关系数为r=0.9996,定量下限为0.08 mg/kg(以脂肪计),回收率在75%～95%之间,相对标准偏差(RSD)小于10%。该方法前处理过程简便快捷,回收率高,可满足实验室大量、快速分析的需求。

辐照肉制品中2-十二烷基环丁酮的测定

采用GB／T21926—2008《辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮测定气相色谱／质谱法》对辐照肉制品中的2-十二烷基环丁酮进行测定，鉴别辐照肉制品。样品用索氏抽提，经冷冻离心和弗罗里硅土层析净化，用气相色谱质谱联用法测定。2-十二烷基环丁酮的浓度在0．01～0．5mg／L与色谱峰面积呈良好的线性关系，r=0．9996。对未经辐照的样品进行加标回收试验，加标回收率为83．1％～94．0％，测定结果的相对标准偏差小于6％（n=6）。

含脂食品辐解产物2–烷基环丁酮的研究进展

含脂食品被辐照时,食品中的脂肪酸和酰基甘油会分解形成相应的同碳原子数2–烷基环丁酮(2-alkylcyclobutanones,2-ACBs)。自发现以来,2-ACBs一直是含脂辐照食品研究的热点。作为含脂食品辐照的标志性化合物,2-ACBs可用来检测含脂辐照食品。2-ACBs的产生及其稳定性受很多因素影响,如辐照剂量、辐照温度与贮藏条件等。同时,2-ACBs的毒理性也一直是含脂辐照食品研究的热点。本文阐述了利用2-ACBs检测含脂辐照食品方法的研究现状;影响2-ACBs的产生和稳定性的因素;以及2-ACBs的毒理性研究进展。

辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮测定方法研究

辐照含脂食品中2-十二烷基环丁酮测定方法研究结果表明：随着离心转速提高,目标物回收率呈下降趋势,但下降趋势不大;随着温度的降低,去脂率逐渐升高,回收率逐渐降低。层析柱的条件确定为：佛罗里硅去活化水为10%,弗罗里硅土用量为3 g,淋洗液为45 mL,柱直径为1.5 cm。方法的检出下限为：7μg/kg。不同样品、不同添加量,回收率在84.26%~112.30%,回收率总体情况满意。不同样品,在辐照剂量均为10 kGy的情况下,2-十二烷基环丁酮的含量不同,在所选择的7种样品中,花生、饼干、沙琪玛中2-十二烷基环丁酮的含量较高,而以鱼肉中2-十二烷基环丁酮的含量最低。

凝胶渗透色谱-气相色谱/串联质谱法分析辐照肉松与乳粉中2-十二烷基环丁酮含量

目的利用凝胶渗透色谱-气相色谱/串联质谱法分析不同辐照剂量处理的肉松与乳粉中2-十二烷基环丁酮含量。方法样品中目标组分经正己烷超声提取,使用凝胶渗透色谱净化去除大分子成分并结合在线浓缩处理后,利用气相色谱-串联质谱进行分析检测,其中质谱扫描采用多反应监测模式(multireaction monitoring mode,MRM),所监测离子对为(m/z)98.1>83.1、(m/z)98.1>70.1、(m/z)98.1>55.0、(m/z)112.2>97.1。结果在10~1000μg/L范围内2-十二烷基环丁酮标准曲线方程具有良好的线性关系,方法的检出限和定量限分别为2.3、7.7μg/kg,在20、100、500μg/kg3个水平下的平均加标回收率在73.5%~98.2%之间,相对标准偏差小于6.2%。结论该方法灵敏度高、准确性好、操作简单,可用于辐照肉松与乳粉中2-十二烷基环丁酮检测。

凝胶渗透色谱净化-气相色谱-串联质谱法测定辐照肉制品中2-十二烷基环丁酮

基于凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)净化处理,建立辐照肉制品中2-十二烷基环丁酮(2-dodecylcyclobutanone,2-DCB)的气相色谱-串联质谱(gas chromatography-tandem mass spectrometry,GC-MS/MS)检测方法。样品经正己烷超声提取、GPC净化及氮吹浓缩等步骤处理后,利用GC-MS/MS多反应监测模式进行分析。结果表明:2-DCB在质量浓度10~1 000μg/L范围内线性良好,线性方程为y=383 709.18x-4 686.41,相关系数为0.998 3;25、100、400μg/kg 3个加标水平的平均回收率为78.2%~105.5%,相对标准偏差小于7.3%;检出限和定量限分别为1.8、6.0μg/kg。该方法前处理操作简单、可实现自动化批量处理,同时具有较高灵敏度。

加速溶剂萃取-气相色谱-质谱法测定辐照猪肉中2-十二烷基环丁酮

目的建立简便、快速、准确的基于加速溶剂萃取技术的辐照猪肉中特异性辐解产物2-十二烷基环丁酮（2-dodecylcyclobutanone,2-DCB）提取方法,利用该方法结合气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术测定辐照猪肉中2-DCB含量。方法以正己烷为萃取溶剂、中性氧化铝为粗脂肪吸附剂,在系统压力1500 psi、80℃条件下快速提取纯化猪肉中的2-DCB,采用GC-MS方法并以m/z 98为定量离子、m/z 1 12为定性离子进行分析检测。结果本方法对2-DCB的定量检出限为12.25 ng/g,回收率大于80%,相对标准偏差〈10%（n=3）,提取时间仅为20 min。采用该方法对辐照剂量为0~8 kGy的猪肉进行检测,浓度范围为0~75.17 ng/g。结论此法实现了2-DCB的快速提取纯化,操作简便、重现性好,且定量计算方法更为科学,可用于辐照食品中2-DCB的检测分析和辐照食品的判定。

辐照烤鳗质量风险评估

研究辐照剂量对烤鳗制品安全性的影响。采用6组辐照剂量(0,1,3,5,7,9 kGy)对烤鳗进行辐照处理,测定辐照后烤鳗制品中2-十二烷基环丁酮的残留量,并结合风险评估技术,研究辐照烤鳗制品的安全性。结果表明:辐照烤鳗制品标识方面的风险可控制在危害不计范围,属于4级;生物学危害及毒理学危害可控制在一旦发生,不一定会对人体造成伤害,但存在安全隐患,定为3级(+);辐照剂量对2-十二烷基环丁酮的残留影响不显著,辐照的残留放射性危害不大,但存在安全隐患,定为3级(+)。