生物催化2-羟基-4-甲硫基丁腈制备羟基蛋氨酸菌株的筛选及转化过程的研究

筛选得到一株产腈水解酶的基因工程菌株(ZJB12048),在优化的转化条件下(反应温度50°C,反应体系pH值7.0(100 mmol/L柠檬酸/柠檬酸钠缓冲溶液),湿菌体浓度为0.02 g/m L,底物浓度为150 mmol/L),其静息细胞对2-羟基-4-甲硫基丁腈具有较高的催化活力。高效液相色谱(HPLC)、液相-质谱(LC-MS)和核磁共振(NMR)分析结果表明,反应液中的转化产物为羟基蛋氨酸(2-羟基-4-甲硫基丁酸)。

补充2-羟基-4-甲硫基-丁酸异丙酯对奶牛生产性能及血液生化指标的影响

本试验旨在探讨日粮补充2-羟基-4-甲硫基-丁酸异丙酯(HMBi)以平衡日粮赖氨酸和蛋氨酸对奶牛生产性能及血液生化指标的影响。将45头处于干奶后期2～3胎的荷斯坦奶牛,随机分配到A、B和C组中,每组15头奶牛。其中A组为对照组,整个试验期饲喂基础日粮;B组于产犊当天(产后第1天)开始、C组于产前15天开始在基础日粮中添加HMBi,以平衡日粮赖氨酸和蛋氨酸。试验期为产前15天到产后第90天。试验结果显示:与对照组相比,B和C组产奶量分别提高了3.24和3.97kg/d。C组乳脂率显著高于对照和B组(P<0.05),而对照和B组乳脂率差异不显著(P>0.05);B和C组均提高了乳脂的绝对产量,分别较对照组提高了0.14和0.18kg/d。不同组间的乳蛋白率差异不显著(P>0.05),但与对照组相比,B和C组乳蛋白的绝对产量分别提高了0.10和0.09kg/d。产后第90天,各组奶牛血清葡萄糖含量的差异不显著(P>0.05)。补充HMBi对奶牛牛奶尿素氮(MUN)、血清总氨基酸(TAA)、血清尿素氮(BUN)都没有显著影响(P>0.05),但有降低BUN和MUN的趋势。补充HMBi对游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量的影响不显著(P>0.05),但有降低奶牛血清NEFA和TC的趋势。结果提示,通过补充HMBi来平衡日粮赖氨酸和蛋氨酸能显著提高奶牛的生产性能,具有改善奶牛代谢状况的趋势。

不同蛋白质水平日粮中添加2-羟基-4-(甲硫基)丁酸异丙酯对奶牛生产性能及血液生化指标的影响

根据年龄、胎次、泌乳时间、产奶量相近的原则选择40头泌乳前期荷斯坦奶牛,随机分成试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组10头,在相同条件下饲养。试验Ⅰ组饲喂170 g·kg-1蛋白质水平的日粮,试验Ⅱ组在试验Ⅰ组基础上添加29.9 g·d-12-羟基-4-(甲硫基)丁酸异丙酯(HMBi),试验Ⅲ组饲喂160 g·kg-1蛋白质水平的日粮,试验Ⅳ组在试验Ⅲ组基础上添加29.9 g·d-1HMBi。每天饲喂3次,挤奶3次。结果表明:2个蛋白质水平下添加HMBi产奶量均有所提高,试验Ⅱ组比试验Ⅲ组升高了2.09 kg·d-1(P<0.05);2个蛋白质水平下添加HMBi有提高乳脂率、乳糖含量、乳蛋白率和降低乳尿素氮含量的趋势;170g·kg-1蛋白质水平下添加HMBi(试验Ⅱ组)能够降低体细胞数,与试验Ⅰ组相比,差异显著(P<0.05),160 g·kg-1蛋白质水平下添加HMBi(试验Ⅳ组)有降低体细胞数趋势,差异不显著(P>0.05)。血清甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、血清尿素氮(BUN)和游离脂肪酸(NEFA)在试验前后各组间差异不显著。2个蛋白质水平下添加HMBi可以提高血清超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,降低丙二醛(MDA)含量;对血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、催乳素(PRL)胰岛素(INS)和瘦素(LEP)的浓度无显著影响。2个蛋白质水平下添加HMBi有提高奶牛采食量、奶料比的趋势。结论:在日粮中添加HMBi能提高奶牛生产性能及机体抗氧化能力,对奶牛营养物质代谢相关的代谢物质及激素水平有促进作用;添加HMBi的日粮中可以适当降低蛋白质水平,并不影响奶牛生产性能的发挥,同时有助于提高氮的利用。

6,7-二氟-4-羟基-2-甲氧甲硫基-3-喹啉羧酸乙酯的合成

3,4-二氟苯胺在三乙胺存在下与二硫化碳生成芳基取代的二硫代氨基甲酸后与氯甲酸乙酯反应得到3,4-二氟苯基异硫氰酸酯,先后与由丙二酸二乙酯在无机碱中成的盐和氯甲基甲醚反应后加热环合,得到氟喹诺酮类抗菌剂普卢利沙星的中间体6,7-二氟-4-羟基-2-甲氧甲硫基-3-喹啉羧酸乙酯,总收率85.7%。

饲粮中2-羟基-4-甲硫基丁酸异丙酯添加水平对哺乳期山羊生长性能及氨基酸代谢的影响

旨在研究饲粮中2-羟基-4-甲硫基丁酸异丙酯(HMBi)添加水平对哺乳期山羊生长性能及氨基酸代谢的影响,为HMBi在山羊日粮中的添加应用提供理论参考。将27只健康、体质量相近(49.79±1.86kg)且均产单羔的哺乳期陕北白绒山羊随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加2%和4%的HMBi,试验期为60d。测定各组羊试验期平均日增加体质量(ADG)、乳成分、血液生化指标、血浆游离氨基酸质量浓度和乳水解氨基酸质量分数。结果表明:添加HMBi能够减轻哺乳期母羊体质量损失,2%组山羊哺乳期ADG显著高于对照组(P<0.05)。对照组羊乳脂质量分数显著低于2%组(P<0.05),极显著低于4%组(P<0.01);对照组羊乳糖质量分数显著高于2%组(P<0.05),显著低于4%组(P<0.05);对照组羊乳蛋白、乳中总固形物和乳中非脂固形物质量分数均极显著低于2%组和4%组(P<0.01);2%组羊乳蛋白和乳中非脂固形物质量分数极显著高于4%组(P<0.01),乳糖和乳中总固形物质量分数极显著低于4%组(P<0.01)。试验第60天,4%组山羊血清尿素氮(BUN)浓度显著低于对照组(P<0.05),血浆Met质量浓度显著高于对照组(P<0.05);2%组山羊血浆Thr、Val和Leu质量浓度显著高于4%组和对照组(P<0.05),血浆Lys质量浓度极显著高于对照组(P<0.01)。试验山羊乳中Met、必需氨基酸和总氨基酸质量分数随HMBi添加水平的提高有增加趋势,但各组之间差异不显著(P>0.05)。综上所述,哺乳期山羊饲粮中添加HMBi能够减轻山羊哺乳期体质量损失,改善山羊血清生化指标,提高山羊乳成分质量分数和血浆Met质量浓度;哺乳期山羊饲粮中2%HMBi的添加效果优于4%。

2-甲硫基-4-羟基-5-嘧啶甲酸甲酯的合成

以甲氧亚甲基丙二酸二甲酯为原始料,与甲基异硫脲反应制得2-甲硫基-4-羟基-5-嘧啶甲酸甲酯,考察了各反应条件的影响,确立了较佳的工艺参数。结果表明,甲氧亚甲基丙二酸二甲酯、甲基异硫脲硫酸盐与氢氧化钠的摩尔投料比为1:1.1:3.3,溶剂乙醇与水体积比为1:1,在室温下反应3 h,用稀盐酸调pH至2～3,收率达52.9%。产物经1H NMR和MS表征证明结构正确。

围产前期添加2-羟基-4-甲硫基-丁酸异丙醇酯对奶牛血液指标、免疫及抗氧化指标的影响

试验研究2-羟基-4-甲硫基-丁酸异丙醇酯(HMBi)对奶牛血液生化指标、免疫及抗氧化指标的影响。选取年龄、胎次、体况和预产期相近围产前期奶牛40头,分为2组,每组20头。对照组奶牛饲喂基础日粮,试验组奶牛饲喂基础日粮+30 g/d HMBi。试验期44 d。每组选择6头奶牛,在产前7 d和产后7 d采集血样,测定血液、免疫及氧化指标。结果显示,与对照组相比,试验组奶牛血清总蛋白(TP)含量显著增加(P<0.05),血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活性显著降低(P<0.05)。试验组血清免疫球蛋白-G (IgG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-2 (IL-2)含量变化不显著,血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性有升高趋势,丙二醛(MDA)含量有下降趋势。试验表明,围产期奶牛补充HMBi可以改善机体蛋白质代谢,增强抗氧化应激能力。

(S)-4-(甲硫基)-2-[2-羰基-1-吡咯烷基]丁酰胺的合成

(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酸甲酯盐酸盐于浓氨水中,发生酰胺化反应,制得(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺,收率63%;(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺用甲醇溶解,与浓盐酸成盐,得(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺盐酸盐,收率66%;(S) 2 氨基 4 (甲硫基)丁酰胺盐酸盐在相转移催化剂四丁基溴化铵(TBAB)及研细氢氧化钾的作用下,与4 氯丁酰氯发生取代、环化反应,制得(S) 4 (甲硫基) 2 [2 羰基 1 吡咯烷基]丁酰胺,收率61%。产品的结构经TLC、IR、1HNMR等进行了表征。

2-羟基-4甲硫基丁酸(HMB)的研究进展

蛋氨酸是家禽的第一限制性氨基酸,在猪和反刍动物上也起着十分重要的作用.饲料中常用的蛋氨酸添加剂主要有粉状d,l-蛋氨酸(DLM)和蛋氨酸羟基类似物(HMB).d,l-蛋氨酸是一种99%蛋氨酸活性的蛋氨酸源,通常简称为DLM;蛋氨酸羟基类似物又分为液态蛋氨酸羟基类似物和固体的蛋氨酸羟基类似物钙.

用Heck反应合成1-羟基-4-(3-吡啶基)丁-2-酮

在Heck反应条件下 ,以Ph3 P为催化剂配体 ,由 3 卤代吡啶和 3 丁烯 1,2 二醇进行偶合可以得到 1 羟基 4 ( 3 吡啶基 )丁 2 酮 ,具有原料易得。

4-烯丁氧基-2-羟基丙磺酸钠接枝改性聚乙烯醇的研究

以水为溶剂,过硫酸铵(APS)为引发剂,将4-烯丁氧基-2-羟基丙磺酸钠(AGES)与聚乙烯醇(PVA)进行自由基接枝反应,对改性反应生成物进行分离得到了AGES-g-PVA接枝物。对AGES-g-PVA接枝物用IR、XRD、DTA和TG进行了结构表征。结果表明:随着引发剂浓度增大、AGES用量提高、反应时间延长及反应温度的升高,AGES对PVA接枝率增大。

聚二(2-甲基-4-羟基-5-叔丁基苯)硫醚的合成

介绍了四步法合成聚二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚:①以异丁烯和间甲酚为原料,以浓硫酸为催化剂合成3 甲基 6 叔丁基苯酚,并将剩余釜底液继续与间甲酚反应使3 甲基 6 叔丁基苯酚的收率接近100%;②硫磺与氯气反应合成二氯化硫,收率80%以上;③3 甲基 6 叔丁基苯酚与二氯化硫发生缩合反应生成二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚,采用加入辅助溶剂法收率达到92%;④二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚同氧气发生氧化偶联反应合成聚二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚。氧化偶联反应的最佳条件:n〔二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚〕/n(氧气)=2 5～3 0,n(氯化亚铜)∶n〔二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚〕=1∶140,n(氯化亚铜)∶n(四甲基乙二胺)=1∶1 3的铜 胺络合物为催化剂,温度50℃,压力0 2MPa,反应时间2～3h,然后减压蒸出溶剂,最后得到淡黄色的聚二(2 甲基 4 羟基 5 叔丁基苯)硫醚,收率>99%。

异丁腈合成2-异丙基-4-甲基-6-羟基嘧啶的研究

介绍了以异丁腈为原料 ,与氯化氢、氨气反应合成异丁脒盐酸盐 ,在水溶液中同乙酰乙酸甲酯反应合成 2 异丙基 4 甲基 6 羟基嘧啶的工艺路线 ,总收率达到 83% ,含量达到 98%以上。

4-羟基-4-[2-(炔丙基氧基)苯基]丁-2-酮的合成及晶体结构

将3-溴丙炔分别与水杨醛和香草醛反应,分别获得4-羟基-4-[2-(炔丙基氧基)苯基]丁-2-酮(1)和3-甲氧基-4-(炔丙基氧基)苯甲醛(2).通过元素分析、红外光谱、核磁共振氢谱和X射线单晶衍射等手段对其结构进行了表征.结果表明:化合物1除了苯环C原子以外的剩余C原子都处于苯环的同侧,丁基碳链以锯齿形排布;化合物1和2的炔丙基分别保持在一条直线上.

一株转化4-羟基-2-丁酮为1,3-丁二醇微生物菌株的筛选及鉴定

从本实验室保藏的86株酵母菌株中筛选到20株利用4-羟基-2-丁酮(4H2B)生产1,3-丁二醇(1,3-BDO)的菌株,当转化液中4H2B浓度为10g/L时,经初步测定1,3-BDO含量,其中菌株32 1,3-BDO产量最高达6.5g/L,具有较好的1,3-BDO生产潜力。对其进行形态学和常规生理生化鉴定实验,并结合18S rDNA基因分析,比对结果表明,菌株32与Pichia farinosa strain DC 3343相似性达99.8%,为Pichia farinosa的一个亚种。

2-氨基-4-羟基烟腈的合成

介绍了标题化合物的合成方法。以丙二腈和原乙酸三甲酯为原料,经取代、环合、水解4步反应合成目标化合物。并经MS和1HNMR对其结构进行了表征。本合成路线原料易得,操作简便,后处理方便,反应收率54.37%。

3，9-双{2-[3-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)丙烯酸]-1，1-二甲基}-2，4，8，10-四氧杂螺环[5．5]十一烷的合成

以3-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)-丙酸甲酯(KY-250)与3,9-双(1,1-二甲基-2-羟基乙基)-2,4,8,10-四氧杂螺环[5.5]十一烷(螺环二醇)为原料,有机锡为催化剂,采用酯交换法在常压下合成了抗氧剂3,9-双{2-[3-(3-叔丁基-4-羟基-5甲基苯基)丙烯酸]-1,1-二甲基)-2,4,8,10-四氧杂螺环[5.5]十一烷(AO-80),产物结构经IR和核磁共振(~1H NMR,^(13)C NMR)进行了确证。较佳合成条件为:反应时间8 h,反应温度190℃,n (KY-250):n(螺环二醇):n(有机锡)=2.2:1:0.044。适宜的重结晶溶剂是w(CH_3OH)=9O%的甲醇溶液,与粗产物的质量比为7:1,收率为72%,产物质量分数大于99.6%。

3-氧代-4-(2,4,5-三氟苯基)丁腈的合成

以2,4,5-三氟苯乙酸为起始原料,经氯化和酰化反应得2-氰基-3-羟基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-2-烯酸乙酯(2);2经水解脱羧合成了3-氧代-4-(2,4,5-三氟苯基)丁腈,总收率61.5%,纯度97.6%,其结构经~1H NMR和MS(ESI)确证。

2-[4-(2,6-二氟苯基)噻唑-2-基]-3-羟基-2-三氟甲基肉桂腈的合成探讨

通过对2-[4-(2,6-二氟苯基)噻唑-2-基]-3-羟基-2-三氟甲基肉桂腈合成方法及重要中间体2-氰甲基-4-(2,6-二氟苯基)噻唑合成的探讨,综合考虑原料来源、工艺难易等因素,得到一条比较合理的合成路线。

叔丁基-2-甲基-(2R,4S)-4-羟基-1,2-四氢吡咯二羧酸酯的合成

近年来,由于人们生活水平的提高和不良饮食习惯的形成,2型糖尿病的发病率逐年升高,严重威胁着人类健康。我国糖尿病患病人群居世界第二,现有3000多万人正遭受着2型糖尿病的折磨,而且每年以新增病历100万的速度在增长,年龄亦日趋年轻化。新型的2型糖尿病治疗药物二肽基肽酶-Ⅳ（dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-IV）抑制剂正处于新型降糖药研发领域的前沿。