2-脱氧链霉胺类抗生素生物合成基因的研究进展

含2-脱氧链霉胺类(2-DOS)氨基糖苷抗生素是临床常用抗生素。近几年对2-脱氧链霉胺类抗生素的分子水平研究取得重大进展,得到了2-DOS合成中的关键酶基因,以及丁酰苷菌素、妥布霉素、卡那霉素、庆大霉素等部分生物合成基因簇克隆。本文对2-脱氧链霉胺类抗生素生物合成基因研究进展进行了综述。

2-脱氧链霉胺取代衍生物的结构确证和~1H核磁定量

对新型氨基糖苷类抗生素合成中(本文阐述的是阿米卡星合成中的2个中间体,而非新型氨基糖苷类抗生素)的两个重要中间体进行结构确证和核磁定量。采用13C NMR、1H NMR、1H 1H-COSY、HMBC和MS对化合物1和化合物2进行了结构确证,并分别以马来酸和甲酸钠为内标物、D2O为溶剂,通过比较马来酸δ6.23ppm内标峰和化合物1δ5.05ppm、δ5.66ppm定量峰面积,以及甲酸钠δ8.36ppm内标峰和化合物2δ2.00ppm、δ5.72ppm定量峰面积计算化合物1和化合物2的含量。化合物1为3-氨基-3-脱氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→6)-[2,3,4,6-四脱氧-2,6–二氨基-α-D-赤式-己吡喃糖基-(1→4)]-1-N-[(2S)-4-氨基-2-羟基-1-氧丁基]-2-脱氧-D-链霉胺,化合物2为3-氨基-3-脱氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→6)-[2,3,4,6-四脱氧-2,6–二氨基-α-D-赤式-3-烯-己吡喃糖基-(1→4)]-1-N-[(2S)-4-氨基-2-羟基-1-氧丁基]-2-脱氧-D-链霉胺,化合物1和化合物2的含量分别为64.98%和75.38%。化合物1和化合物2是2-脱氧链霉胺取代衍生物,采用氢核磁共振内标法可快速、准确地型氨基糖苷类抗生素合成过程中无商品化标准品的重要中间体进行定量分析。

电喷雾离子化多级质谱对几种氨基糖苷类抗生素特征碎片的分析

应用电喷雾离子化多级质谱法分析几种含2-脱氧链霉胺的氨基糖苷类抗生素的碎片离子,并对它们的裂解规律进行分析归纳。除其它特征碎片离子峰外,所有测试样品的质谱图中都存在质荷比为163.1的归属于2-脱氧链霉胺的碎片离子峰。这些裂解规律可应用于微生物新药筛选中早期快速鉴别含2-脱氧链霉胺的氨基糖苷类抗生素,对氨基糖苷类抗生素的生产、质量监控以及在环境和食品中的微量检测也有指导意义。

硫酸卡那霉素注射液杂质谱的HPLC-ELSD分析方法的评价与应用

目的:优化并建立硫酸卡那霉素注射液杂质谱分析的高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLCELSD法),同时将该方法应用于不同来源样品的分析,评价该方法对于氨基糖苷类抗生素质量分析的适用性。方法:采用Welch LP-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.2 mol·L^(-1)三氟乙酸溶液-甲醇(98∶2)为流动相,柱温为30℃,流速0.3 mL·min^(-1),不分流型蒸发光散射检测器检测。结果:硫酸卡那霉素注射液的各工艺杂质之间、降解杂质之间、各杂质与卡那霉素及辅料之间均分离良好,专属性试验显示该方法可用于杂质谱的全面分析。结论:优化后的HPLC-ELSD法可用于卡那霉素原料及其注射液的快速质量评价;该方法的专属性良好,相对于其他方法具有分析速度快,成本低,易于推广等优势。