2-花生四烯酸甘油对海人酸诱导损伤的大鼠尾状核神经元电压门控钠电流的调制作用

目的探讨内源性大麻素2-花生四烯酸甘油(2-AG)对海人酸(KA)损伤的大鼠尾状核神经元电压门控钠通道电流(INa)的调制作用及其分子机制。方法原代培养大鼠尾状核神经元,分为空白对照组、KA组、2-AG+KA组、RIM(CB1受体拮抗剂)+2-AG+KA组。培养7 d后,各组细胞于培养基中处理12 h;其中,2-AG+KA组和RIM+2-AG+KA组在添加2-AG、RIM 30 min后添加KA。应用全细胞膜片钳技术检测大鼠尾状核神经元电压门控钠通道电流:包括各组电流密度的变化、通道的电流-电压特性、通道的激活动力学特性和失活动力学特性。结果在培养的大鼠尾状核神经元中,与对照组相比,KA显著增加神经元电压门控钠通道电流密度(P=0.009);并使VGSCs的激活电压曲线向超极化方向偏移,半激活电压绝对值明显增大(P=0.008)。与KA组相比,直接给与2-AG提高2-AG水平可阻止KA诱导的钠电流密度增加(P=0.009)和钠电流激活曲线超极化方向移动(P=0.009),且2-AG的这种作用是通过CB1受体依赖性途径介导的。2-AG本身对尾状核神经元电压门控钠通道电流密度、激活及失活等电流特性均不产生效应。结论2-AG可通过CB1受体途径调控尾状核神经元VGSCs电流朋而起到神经保护作用。

2-花生四烯酸甘油对L02细胞代谢过程中胰岛素抵抗机制的研究

目的:验证2-花生四烯酸甘油引起L02细胞代谢过程中的胰岛素抵抗及其发生机制。方法:用不同浓度2-花生四烯酸甘油处理L02细胞,使用台盼蓝检测处理对细胞存活率的影响;同时观察细胞油红染色以及检测培养上清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的改变;用分光光度计法检测胞浆内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的含量;最后使用Western Blot鉴定2-花生四烯酸甘油的作用。结果:当2-花生四烯酸甘油为0.25μM,处理24h,其所致L02细胞胰岛素敏感性下降,且细胞存活无明显差异,其中约有75%胞内有大量脂质沉积。比较2-花生四烯酸甘油联合胰岛素处理组和胰岛素处理组,前者处理后L02细胞胞浆内SOD、GSH显著下降,MDA、i NOS显著升高,其培养上清中ATL、AST含量均升高。随后的WB实验结果显示,2-花生四烯酸甘油处理组较未处理组其胞浆内GLUT4、GSK-3B、e NOS升高。结论:2-花生四烯酸甘油可以通过对L02细胞通路蛋白GLUT4、GSK-3B、e NOS的影响引发胰岛素耐受,进而造成细胞的氧化-还原失衡导致细胞的损伤。

气相色谱质谱联用仪定量检测内源性大麻素花生四烯乙醇胺及2-花生四烯酸甘油在胆道恶性肿瘤中的表达规律

目的探讨两种主要的内源性大麻素花生四烯乙醇胺(AEA)及2-花生四烯酸甘油(2-AG)在胆道恶性肿瘤(BTC)患者体液及肿瘤组织中的表达规律。方法采集中山大学附属第一医院2013年12月至2014年9月收治的22例BTC患者及8例良性胆道疾病患者的外周血及胆汁,其中15例BTC患者同时收集癌巢组织及癌旁正常组织,利用氯仿/甲醇抽提法配合固相萃取,分离患者体液及组织样本中的脂质,以二甲基异丙基硅烷-咪唑对脂质进行硅烷化处理,气相色谱质谱联用仪测定AEA及2-AG的浓度。结果与良性胆道疾病患者相比,BTC患者血浆中2-AG显著升高[180.01(140.72~283.84)nmol/L vs 42.33(25.61~148.93)nmol/L,P<0.05],AEA浓度降低但差异无统计学意义;胆汁中AEA浓度显著降低[1.80(0.50~5.00)nmol/L vs 10.15(2.68~17.49)nmol/L,P<0.05],2-AG浓度升高但差异无统计学意义。BTC癌巢组织与癌旁正常组织相比,AEA浓度显著降低[22.01(16.55~53.61)pmol/g vs 58.68(25.36~68.97)pmol/g,P<0.05],2-AG显著升高[1.97(1.44~5.43)nmol/g vs 1.10(0.36~1.47)nmol/g,P<0.05]。结论本研究建立了在BTC中定量检测AEA和2-AG两种内源性大麻素浓度的有效方法,测定AEA及2-AG在BTC患者体液及肿瘤组织中的异常表达,可作为BTC的辅助诊断。

单酰基甘油酯酶促进肿瘤生长及侵袭研究进展

单酰基甘油酯酶（MAGL）是丝氨酸水解酶超家族成员之一,与激素敏感性脂解酶一起将脂肪细胞和其他细胞内储存的三酰甘油分解为甘油和脂肪酸。此外,它还能够作用于内源性大麻素系统。但目前其生物学功能尚未完全了解。近年来部分学者开始关注其在癌症中的作用。本文通过对MAGL生理生化作用的描述,简要介绍其研究现状。

单酰基甘油酯酶促肿瘤侵袭的研究进展

单酰基甘油酯酶(Monoacylglycerol Lipase,MAGL)是催化单酰甘油分解成脂肪酸和甘油的丝氨酸水解酶,且与内源性大麻素系统密切相关。近年来,研究发现,MAGL在人侵袭性肿瘤细胞和原发性肿瘤细胞中高表达,促进肿瘤发生,然而其具体机制尚不明确,本文从脂肪酸代谢网络、内源性大麻素系统等角度出发,对MAGL促进肿瘤发生的可能机制进行了综述。

内源性大麻素系统与老年性痴呆

老年性痴呆即阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种慢性进行性的神经退行性病变,其特征性病理改变为β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结,以及神经元丢失伴随胶质细胞增生等。最近的研究发现内源性大麻素系统对AD的病程有预防治疗作用,主要基于其对神经的保护作用和抗炎功效。本文综述了内源性大麻素对AD的保护作用的几个方面,旨在为AD的治疗开辟新的策略和思路。

脑胶质瘤中单酰甘油脂肪酶的表达及意义

目的研究内源性大麻素代谢酶单酰甘油脂肪酶(monoacylglycerol lipase,MAGL)在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与胶质瘤病理级别的关系,探讨其临床意义。方法选取脑胶质瘤标本23例,其中WHOⅠ级1例,WHOⅡ级7例,WHOⅢ级5例,WHOⅣ级10例。对照组8例,均为脑挫裂伤后行内减压术切除的正常脑组织。应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)、LC-MS分别检测各组织标本中MAGL mRNA、MAGL活性的表达。结果 MAGL mRNA、MAGL活性在低级别(WHOⅠ~Ⅱ级)和高级别(WHOⅢ~Ⅳ级)脑胶质瘤组织中的表达水平较正常脑组织明显降低(P<0.01),且随着肿瘤病理级别的增高而降低,与肿瘤的病理分级呈负相关(均P<0.01)。MAGL mRNA的表达水平与MAGL活性呈正相关。结论 MAGL可能参与了脑胶质瘤的发生、发展过程,检测MAGL的表达可评价脑胶质瘤的恶性程度。

单酰甘油脂肪酶抑制剂对依托咪酯诱导全身麻醉的影响

目的研究单酰甘油脂肪酶抑制剂URB 602对依托咪酯诱导全身麻醉的影响。方法单次iv给予小鼠依托咪酯,研究URB 602对依托咪酯麻醉的半数有效量(ED_(50))、剂量及维持时间的影响;给大鼠持续输注依托咪酯,探讨URB 602对依托咪酯麻醉后苏醒质量、呼吸频率的影响。结果在单次注射实验中,联合应用50 mg·kg^(-1)URB 602对依托咪酯的ED_(50)无影响,但将依托咪酯的用量从10 mg·kg^(-1)减少到5 mg·kg^(-1),且麻醉维持时间的差异无统计学意义;联合应用URB 602(25、50 mg·kg^(-1))可显著增加依托咪酯(4.48、6.72 mg·kg^(-1))的麻醉维持时间;URB 602的最佳给药时间为注射依托咪酯前30 min。在持续输注实验中,联合应用50 mg·kg^(-1) URB 602对依托咪酯持续输注的苏醒时间及呼吸频率无显著性影响。结论URB 602可以延长小鼠单次注射依托咪酯的麻醉维持时间,且不会影响大鼠持续输注依托咪酯的苏醒质量。

基于内源性大麻素探讨皂术抗纤方治疗肝纤维化大鼠的作用机制

目的:基于内源性大麻素研究皂术抗纤方对肝纤维化大鼠的药理效应及其作用机制。方法:按照随机数字表法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组,每组10只。模型组、皂术抗纤方组和安络化纤丸组给予四氯化碳(CCl4)腹腔注射8周,复制肝纤维化模型。第5~8周,皂术抗纤方组、安络化纤丸组分别给予皂术抗纤方(16.1g/kg)、安络化纤丸(30g/kg)治疗。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织羟脯氨酸(Hyp)、N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)、2-花生四烯酸甘油(2-AG)及内源性大麻素水解酶脂肪酰胺水解酶(FAAH)、单酰基甘油酯酶(MGL)mRNA表达量变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织出现明显肝纤维化,血清ALT、AST水平及肝组织Hyp、AEA、2-AG含量显著升高(P<0.01),FAAH、MGL mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,皂术抗纤方组、安络化纤丸组血清ALT、AST水平及肝组织Hyp含量均显著降低(P<0.01),皂术抗纤方组肝组织大麻素AEA、2-AG含量显著降低(P<0.01),FAAH、MGL mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论:皂术抗纤方治疗肝纤维化效果显著,其作用机制与调节内源性大麻素有关。