N-(6-嘌呤)-蛋氨酸探针测定生物样品中蛋白质含量

以NaCl为介质,在Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)中,三维荧光光谱显示核苷类药物N-(6-嘌呤)-蛋氨酸(PYMBA)与人血清白蛋白可以发生相互作用。结果表明,PYMBA的加入使得人血清白蛋白内源荧光猝灭,且体系的同步荧光强度和溶液中人血清白蛋白的浓度呈良好的线性关系,基于此,建立了测定蛋白质的新方法。在选定的最佳实验条件(Δλ=50 nm,离子强度为0.1 mol/L,pH=7.4)下,同步荧光强度与人血清白蛋白在2.8～552 mg/L范围内的线性相关系数为0.9985。运用本方法测定人血清、唾液和尿液等生物样品中的蛋白质含量并进行加标回收实验,回收率在98.0%～103.1%之间。本方法的检出限可达0.1 mg/L。本方法所得结果与经典的考马斯亮蓝法一致。