CYP4A/20-HETE和eNOS活化有关的调节蛋白间的相互作用

目的研究CYP4A/20-HETE和eNOS活化有关的调节蛋白间的相互作用。方法培养新生牛肺动脉内皮细胞(PAECs),用免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)对下列4组的CYP4A,eNOS及eNOS调节蛋白进行测定:对照组:PAECs培养皿中加入与20-HETE处理组体积相同的乙醇溶剂,作用10min;20-HETE处理5min组:PAECs培养皿中20-HETE的浓度为1×10-6mol·L-1,作用5min;20-HET处理10min组:PAECs培养皿中20-HETE的浓度为1×10-6mol·L-1,作用10min;VEGF处理10min组:PAECs培养皿中VEGF的浓度为1×10-8mol·L-1,作用10min。结果经20-HETE处理后:肺动脉内皮细胞eNOS蛋白表达增加、phos-pho-eNOS(Ser1177)合成增加;用VEGF进行的上述实验结果与20-HETE相似;20-HETE促使Hsp、蛋白激酶B(Akt)与eNOS结合。结论免疫沉淀和免疫印迹实验结果表明:CYP4A与eNOS在肺动脉内皮细胞相互结合;20-HETE通过促使Hsp、蛋白激酶B(Akt)与eNOS结合,使eNOS(Ser1177)磷酸化,增加NO释放,舒张血管;VEGF和20-HETE的作用相似。

慢性心力衰竭病人血清20-HETEs水平与心室重构的关系探讨

目的观察慢性心力衰竭病人血清20-羟基二十碳四烯酸(HETEs)水平与心室重构的关系及潜在相关机制。方法选取2018年1月—2019年12月我院心血管内科收治的慢性心力衰竭病人92例为观察组,同时选取同期于我院体检的健康者92名为对照组。检测两组外周血20-HETEs、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。经胸行多普勒超声心动图检查,测量慢性心力衰竭病人左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF),并分析20-HETEs与IL-6、TNF-α、NT-proBNP及左室指标之间的相关性。结果观察组外周血20-HETEs、IL-6、TNF-α、NT-proBNP水平均高于对照组(P<0.01)。心功能Ⅲ级病人血清20-HETEs水平、LVEDD和NT-proBNP高于Ⅱ级病人,LVEF低于Ⅱ级病人(P<0.01)。20-HETEs与IL-6、TNF-α、NT-proBNP及LVEDD呈正相关,与LVEF呈负相关。结论慢性心力衰竭病人外周血清20-HETEs水平高于正常对照组,通过炎性因子IL-6、TNF-α等参与心室重构,辅助慢性心力衰竭的临床诊治。

20-HETE作用受体的发现及其对高血压的影响

花生四烯酸(arachidonic acid,AA)可通过环氧合酶和脂氧合酶代谢途径生成白三烯类、前列腺素类和血栓素类等物质[1]。近年研究发现,AA经过细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)代谢途径中的表氧化酶作用可生成环氧二十碳四烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs),经过羟化酶作用生成羟基二十碳四烯酸(hydroxyeicosatetraeonic acids,HETEs),如20-羟基二十碳四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)。

冠心病患者血清20-HETE水平与药物洗脱支架植入术治疗后ISR的关系

目的探讨冠心病患者血清20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)水平与药物洗脱支架植入术治疗后支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选择接受药物洗脱支架植入术治疗的冠心病患者415例,术后随访1年,期间发生ISR 58例(ISR组)、未发生ISR 357例(N-ISR组),术前采集外周静脉血,离心留取血清,检测血清20-HETE、IL-6、TNF-α、PCT。比较两组血清20-HETE、IL-6、TNF-α、PCT水平,并分析ISR患者血清20-HETE水平与血清IL-6、TNF-α、PCT水平的关系。采用多因素Logistic回归模型分析接受药物洗脱支架植入术治疗的冠心病患者发生ISR的危险因素。结果ISR组血清20-HETE、IL-6、TNF-α、PCT水平均高于N-ISR组(P均<0.01)。Pearson相关分析显示,ISR患者血清20-HETE水平与血清IL-6、TNF-α、PCT水平均呈正相关关系(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析发现,合并糖尿病、Gensini评分、主支架长度以及血清20-HETE水平均为接受药物洗脱支架植入术治疗的冠心病患者发生ISR的独立危险因素(P均<0.05)。结论冠心病患者药物洗脱支架植入术治疗后发生ISR者术前血清20-HETE水平明显升高,且其水平与血清IL-6、TNF-α、PCT水平呈正相关关系;血清20-HETE水平是接受药物洗脱支架植入术治疗的冠心病患者发生ISR的独立危险因素。

花生四烯酸细胞色素P450代谢途径在糖尿病中的作用研究进展

花生四烯酸(arachidonic acid,AA)是生物体内含量最丰富,其代谢产物最具生物活性的小分子物质之一。其代谢产物在众多生理及病理生理过程中发挥重要的调节作用。它们除参与细胞生长和分化、生殖和发育、体温及血压的维持等重要生理过程调节外,也在诸如炎症、疼痛、肿瘤、高血压、动脉粥样硬化等人类重大疾病的发生发展中发挥着极其重要的作用。AA及其代谢产物在糖尿病发生发展中的作用也逐渐引起关注,尤其是环氧化酶和脂氧酶代谢途径与糖尿病的关系研究较为广泛。花生四烯酸还可以经细胞色素P450途径产生表氧-二十碳三烯酸(EETs)和20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)。它们与糖尿病的关系研究甚少。近年来发现EETs和其水解酶与葡萄糖的吸收和胰岛素抵抗有关,20-HETE则参与糖尿病肾功能损伤和血管活性的改变。因而探讨花生四烯酸P450代谢途径对糖尿病的影响及其机制将有利于进一步阐明糖尿病的发病机理,为糖尿病的防治提出新的思路。本文就近五年有关花生四烯酸P450代谢途径与糖尿病关系的研究做一综述,以期为我国在该领域的研究提供新的方向。

AA-CYP-HETE/EETs代谢通路与心血管疾病治疗药物研究现状的分析

20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)及环氧二十碳三烯酸(EETs)是花生四烯酸(AA)经细胞色素P450(CYP)酶系代谢的产物。20-HETE主要由CYP4A、CYP4F将AA代谢产生,对心脑血管系统有一定的毒性作用。EETs主要由CYP2J、CYP2C将AA代谢产生,对心脑血管系统有一定的保护作用。本文通过查阅文献综述AA-CYP-HETE/EETs代谢通路相关药物对心肌肥厚、高血压、心力衰竭、心肌梗死等心血管疾病的作用及作用机制,以期为心血管疾病的临床用药提供参考,为心血管疾病治疗药物的研究和开发提供思路与方向。

20-HETE对小鼠葡萄糖刺激胰岛素分泌反应的影响

为了考察20-羟基二十碳四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acids, 20-HETE)对葡萄糖刺激胰岛素分泌反应的影响,本研究选择CYP4F2转基因小鼠和小鼠胰岛素瘤INS-1E细胞作为研究材料,通过LCMS/MS检测WT和TG小鼠的胰腺20-HETE水平。通过IPGTT测定小鼠葡萄糖耐量,通过ELISA测定小鼠血浆C肽水平来检测胰岛素分泌。通过Western blotting、Real time PCR、免疫组化和免疫荧光来检测小鼠胰腺或INS-1E细胞中Glut2、GSK-3β(Ser9点)和AKT (Ser473点)的磷酸化水平。TG小鼠的20-HETE水平((7.26±2.03) ng/mg蛋白)显著高于WT小鼠((2.14±0.76) ng/mg蛋白)。在用20-HETE合成的选择性抑制剂HET0016处理后,TG小鼠((0.33±0.07) ng/mg蛋白)和WT小鼠((0.27±0.06) ng/mg蛋白)胰腺组织中的20-HETE水平均急剧降低。给予葡萄糖处理30 min后,TG小鼠的血糖水平均显著高于WT小鼠,而血浆C肽水平显著低于WT小鼠(p<0.05)。与WT小鼠相比,TG小鼠的胰腺组织中Glut2 m RNA和蛋白水平显著降低。与WT小鼠相比,CYP4F2转基因小鼠的GSK-3β和AKT磷酸化均显著降低。20-HETE处理可导致INS-1E细胞中AKT/GSK-3β磷酸化水平和Glut2表达水平显著降低(p<0.05)。此外,用17 mmol/L葡萄糖处理INS-1E细胞1 h,20-HETE处理组的胰岛素分泌显著降低。应用GSK-3β选择性抑制剂TWS119预处理INS-1E细胞3 h后,TWS119 (一种GSK-3β选择性抑制剂)预处理显著逆转了Glut2表达水平的降低以及胰岛素分泌的减少。20-HETE主要通过AKT/GSK-3β信号通路来下调Glut2的表达,进而减弱胰岛素分泌,导致胰岛素分泌功能障碍。

缺血性脑卒中与CYP450代谢途径的研究进展

缺血性脑卒中是危害人类健康的主要疾病之一。近年研究发现,多不饱和脂肪酸(PUFA)及其经细胞色素P450 (cytochrome P450,CYP)途径代谢的产物参与缺血性脑卒中的生理病理过程。血浆中ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)、20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)和环氧二十碳三烯酸(EETs)浓度水平可反映疾病的预后,对CYP450途径代谢酶进行诱导或抑制可改善神经功能。此外,CYP2C19基因型与氯吡格雷抗血小板治疗效果及复发性缺血性脑卒中有关,因而鉴定基因型和选择合理治疗方案尤为重要。本文就缺血性脑卒中与CYP450代谢途径相关研究进展进行综述。