20-羟-二十烷四烯酸对血管内皮细胞的作用研究进展

20-羟-二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)是花生四烯酸的细胞色素P-450代谢途径的一个重要代谢产物。近年来研究发现20-HETE对血管内皮细胞发挥重要的生理和病理生理作用。20-HETE可激活内皮细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleoti-de phosphate,NADPH)氧化酶系统和核因子-кB(nuclear factor-кB,NF-кB)通路发挥氧化应激和促炎作用;20-HETE可介导血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的解离、降低NO的生物利用度及诱导血管紧张素转换酶,调节血管的舒张和收缩功能;20-HETE还可促进内皮细胞的增生而促进血管新生。但国内对20-HETE研究甚少,因此本文对近年来国际上关于20-HETE对血管内皮细胞的研究作一综述。

20-羟二十烷四烯酸在血压及血管舒缩功能中的调节作用

20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)是由细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)催化花生四烯酸(arachidonic acid,AA)的ω-羟基所生成的产物之一。随着研究进展,人们发现20-HETE在调节机体血压、脑血流量、心肌收缩力、肾功能等过程中发挥了重要作用,且它与肿瘤、炎症反应等疾病的发生和发展有着密切关系。现主要就20-HETE在机体血压及血管舒缩功能中的作用作一综述。

20-羟二十烷四烯酸在血压调节中的作用

20-羟二十烷四烯酸（20-hydroxy eicosatetraenoic acid,20-HETE）是细胞色素-P450（CYP450）家族成员4A和4F介导的花生四烯酸代谢产物,是调节血管张力、血压和肾功能的主要因素之一[1]。20-HETE代谢紊乱可能是血压相关性疾病发生的重要机制,已经成为抗高血压等疾病研究的主要靶点。我们综述了新近相关研究的主要进展。

20-羟二十烷四烯酸合成酶抑制剂HET0016与AngⅡ诱导心肌肥大的关系

目的探究20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的影响及机制。方法结晶紫染色检测细胞表面积;qRT-PCR检测心钠肽(ANP)和脑钠肽(BNP)表达;DHE和MitoSOX法检测超氧化物(ROS)生成;细胞色素C还原法检测NADPH氧化酶活性;JC-1探针检测线粒体膜电位;Western blot和ELISA法检测CYP4A表达及20-HETE生成。结果 AngⅡ显著增加H9c2心肌细胞表面积,上调ANP和BNP的mRNA表达。AngⅡ诱导NADPH氧化酶活性增高及ROS生成,导致线粒体膜电位下降,HET0016可阻断AngⅡ如上作用。AngⅡ可促进CYP4A表达以及20-HETE生成。结论 20-HETE激活NADPH氧化酶引起ROS生成,诱导心肌线粒体功能紊乱,参与AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。

20-羟二十烷四烯酸在高血压发生中的作用及机制研究进展

目的 20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)是由细胞色素P450(CYP)催化花生四烯酸(AA)生成的代谢产物,在心血管系统中发挥多种重要的生物学功能。在不同类型高血压动物模型中发现,催化AA生成20-HETE的CYP增多,而抑制20-HETE生成则可降低血压。目前认为,20-HETE参与高血压发生、发展的机制包括:增加细胞内Ca2+浓度,促进血管平滑肌收缩;降低血管内皮细胞中NO生物利用率、抑制内皮型一氧化氮合酶活性、促进活性氧簇生成,诱导血管内皮细胞功能紊乱;促进血管平滑肌细胞增殖与迁移,诱发血管重塑;促进血管紧张素转换酶、AngⅡ及血管紧张素1型受体等活性。20-HETE有可能成为防治高血压的药物作用靶点。

20-羟-二十烷四烯酸在糖尿病心血管并发症中的作用

糖尿病是以高血糖为特征的代谢紊乱综合征,其心血管并发症是导致糖尿病患者致残、致死的主要原因。20-羟-二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)是近年来发现的花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)第三条代谢通路,细胞色素P-450(Cytochrome P-450,CYP450)途径的活性代谢产物。现有研究表明其在调节肾功能和血管平滑肌紧张度中起到重要作用,但对20-HETE与糖尿病的关系研究甚少。本文对近年来国际上20-HETE与糖尿病心血管并发症的研究报道进行综述。

G蛋白偶联受体75信号通路在20-羟二十烷四烯酸诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的:探讨G蛋白偶联受体75(G-protein-coupled receptor 75,GPR75)介导的PLC/PKC信号通路在20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:采用慢病毒转染敲减乳鼠心肌细胞GPR75基因表达;RT-q PCR和Western blot检测GPR75 m RNA及细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和caspase-3蛋白表达;ELISA法检测三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP_(3))含量以及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和NADPH氧化酶活性;Fluo-3/AM探针法检测细胞内Ca^(2+)浓度;二氢乙啶(dihydroethidine,DHE)荧光探针检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的含量;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:在培养的乳鼠心肌细胞中,GPR75在m RNA及蛋白水平均有表达,且20-HETE具有促进细胞内GPR75表达的作用(P<0.05);经20-HETE处理后,细胞内IP_(3)含量升高,而敲减GPR75或应用磷脂酶C(phospholipase C,PLC)抑制剂U73122可显著阻断20-HETE的如上效应,细胞内IP;含量降低(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PLC抑制剂以及IP_(3)受体阻断剂2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)预处理,可抑制20-HETE诱导的细胞内Ca^(2+)浓度升高(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PKC抑制剂GF109203X或NADPH氧化酶抑制剂apocynin处理后,20-HETE诱导的细胞内ROS生成被抑制(P<0.05);同时,敲减GPR75表达可降低20-HETE作用的细胞中PKC、NADPH氧化酶的活性(P<0.05);最后,敲减GPR75表达、应用U73122或GF109203X,均可减少20-HETE诱导的心肌细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Cyt C和caspase-3的表达(P<0.05)。结论:GPR75介导的PLC/PKC信号通路通过引起心肌细胞钙超载、ROS生成增多,参与了20-HETE诱导的乳鼠心肌细胞凋亡进程。

20-羟二十烷四烯酸对人胎盘绒毛膜滋养细胞生物学行为的影响

目的探讨20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)对人胎盘绒毛膜滋养细胞生物学行为的影响。方法体外培养人胎盘绒毛膜滋养细胞,分成正常对照组、药物介质组、20-HETE组、HET0016组,分别加入细胞培养基、二甲基亚砜、20-HETE及20-HETE抑制剂HET0016作用48h;采用ELISA法检测人胎盘绒毛膜滋养细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)浓度,RT-PCR法检测人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL m RNA表达。结果与正常对照组比较,药物介质组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量差异均无统计学意义(均P>0.05),20-HETE组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量均明显降低(均P<0.05),HET0016组人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA相对表达量均明显升高(均P<0.05)。结论 20-HETE可抑制人胎盘绒毛膜滋养细胞MMP-9、NGAL浓度及m RNA表达,而其抑制剂HET0016起促进作用。

15-羟基二十碳四烯酸收缩慢性缺氧动脉环信号转导通路的部位:内皮细胞还是平滑肌

目的:观察15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)致慢性缺氧性大鼠肺动脉收缩的信号转导途径,阐明15-羟基二十碳四烯酸引起慢性缺氧性肺动脉收缩作用的可能机制。方法:实验于2006-03/2006-09在哈尔滨医科大学药学院进行。①实验材料:健康成年雄性Wistar大鼠,体质量220～240g,清洁级,由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供。②实验方法:取18只成年雄性Wistar大鼠连续缺氧9d(O2体积分数为0.12)制作大鼠缺氧模型,通过氧气监测控制器控制箱内氧气体积分数为0.12,9d后即成为缺氧大鼠模型。16只正常大鼠吸入正常空气(O2体积分数为0.21)作为对照。将大鼠麻醉后分离直径1.5mm肺内动脉,剪成2mm长动脉环置于组织浴槽中,记录血管张力变化。③实验评估:观察15-羟基二十碳四烯酸对缺氧模型组、正常组大鼠血管收缩作用,在此基础上,除去血管内皮细胞和使用丝裂素活化蛋白激酶的激酶抑制剂PD98059,明确血管内皮细胞和丝裂素活化蛋白激酶的激酶系统在15-羟基二十碳四烯酸收缩肺动脉中的作用。结果:34只大鼠均进入结果分析。①15-羟基二十碳四烯酸对正常组、缺氧模型组大鼠血管环均有收缩作用,呈浓度-效应正相关,但缺氧组收缩明显,与正常组比较,差异显著(P<0.01)。②丝裂素活化蛋白激酶的激酶抑制剂PD98059可明显阻断15-羟基二十碳四烯酸对缺氧大鼠肺动脉的收缩作用(P<0.05)。③去掉内皮的缺氧大鼠肺动脉,PD98059仍明显阻断15-羟基二十碳四烯酸的收缩作用(P<0.05)。结论:15-羟基二十碳四烯酸通过激活肺动脉平滑肌丝裂素活化蛋白激酶的激酶信号转导途径收缩慢性缺氧性大鼠肺动脉,作用部位主要位于血管平滑肌。

3，9-双{2-[3-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)丙烯酸]-1，1-二甲基}-2，4，8，10-四氧杂螺环[5．5]十一烷的合成

以3-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)-丙酸甲酯(KY-250)与3,9-双(1,1-二甲基-2-羟基乙基)-2,4,8,10-四氧杂螺环[5.5]十一烷(螺环二醇)为原料,有机锡为催化剂,采用酯交换法在常压下合成了抗氧剂3,9-双{2-[3-(3-叔丁基-4-羟基-5甲基苯基)丙烯酸]-1,1-二甲基)-2,4,8,10-四氧杂螺环[5.5]十一烷(AO-80),产物结构经IR和核磁共振(~1H NMR,^(13)C NMR)进行了确证。较佳合成条件为:反应时间8 h,反应温度190℃,n (KY-250):n(螺环二醇):n(有机锡)=2.2:1:0.044。适宜的重结晶溶剂是w(CH_3OH)=9O%的甲醇溶液,与粗产物的质量比为7:1,收率为72%,产物质量分数大于99.6%。

高效液相色谱法测定15-羟化二十烷四烯酸

近年来的研究表明，在脑、肾、肺、血管等组织中，花生四烯酸（AA）可以被细胞色素P450（CYP450）或15脂氧化酶代谢为15-羟化二十烷四烯酸（15-HETE）、20-羟化二十烷四烯酸（20—HETE）、环氧二十碳四烯酸（EETs）等多种生物活性物质。最近研究证明，15-HETE与许多疾病如骨组织、血管疾病的发生发展有关。鉴于15-HETE在体内的水平低。采用一般的测定方法很难测定，为此。作者采用高效液相色谱（HPLC）荧光检测，在对其生物活性物质进行测定的同时，并对衍生过程进行优化，结果报道如下。

探析针刺调节15-羟基二十碳四烯酸防治动脉粥样硬化的作用机制

动脉粥样硬化(AS)是多因素参与的复杂的病理过程,中医药治疗AS已显示出了其独特的优势及广阔的应用前景。针灸作为祖国医学的瑰宝,能够着眼于宏观,综合治疗,通过调整阴阳、扶正祛邪、疏通经络,有效地防治AS,并且具有取穴简单,疗效肯定,安全经济,无不良反应等优点。15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)作为花生四烯酸的代谢产物,参与调节动脉血管收缩与重构。文章综合整理15-HETE代谢机制相关文献,与针灸防治AS的作用机制加以对比分析,探究15-HETE对AS发生发展的影响以及针刺调节15-HETE防治AS的作用机制。

结核病与12-羟基二十碳四烯酸的相关性研究

目的探究结核病与12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)的相关性,揭示结核病可能的发病机理。方法选取健康体检者68例为对照组,72例来该院治疗的患者为结核组,采用12-羟基二十碳四烯酸酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒测定血清中12-HETE的含量。结果结核组12-HETE水平为(9.7±4.1)ng/m L,明显高于对照组的(5.4±2.3)ng/m L(P<0.01)。结论结核病与12-HETE具有相关性,12-HETE可能是结核病发病机理之一。

20-HETE通过GPR75受体偶联G_(αq)信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用

目的 探讨GPR75受体偶联G_(αq)信号通路在20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法 H9c2心肌细胞采用慢病毒载体干扰GPR75表达,敲减效率通过RT-qPCR和Western blot法检测;ELISA法检测IP_(3)及cAMP含量;TUNEL法评估细胞凋亡率;分别使用Fluo-4/AM、DHE和JC-1荧光探针检测细胞内Ca^(2+)浓度、ROS含量以及线粒体膜电位(ΔΨm)水平;Western blot检测EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β、Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3蛋白表达。结果 慢病毒载体shGPR75转染后,H9c2心肌细胞GPR75受体mRNA和蛋白表达分别降低67.16%和63.99%(P<0.05)。敲减GPR75表达或应用AAA阻断其作用,显著抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡(P<0.05),并可逆转ΔΨm下降及凋亡相关蛋白Bax、Cyt C、Caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。20-HETE处理后细胞内IP_(3)含量明显增加(P<0.05),但对cAMP生成无显著影响(P>0.05),而敲减GPR75表达、应用AAA或者PLC信号通路阻断剂U73122预处理后,可显著阻断细胞内IP_(3)生成(P<0.05)。敲减GPR75表达、应用AAA或者U73122预处理后,明显抑制20-HETE诱导的Ca^(2+)浓度升高和ROS生成效应(P<0.05)。20-HETE处理后,GPR75受体下游调控关键蛋白EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β磷酸化水平明显升高(P<0.05),敲减GPR75表达或应用AAA可有效阻断20-HETE上述效应(P<0.05)。最后,阻断PLC或PI3K信号通路,显著抑制20-HETE诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论 20-HETE通过GPR75受体偶联的G_(αq)蛋白及其介导的PLC、EGFR/ERK1/2/AKT/GSK3β信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡。

15-羟二十烷四烯酸对胎盘滋养细胞功能的影响及机制分析

目的探讨15-羟二十烷四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE)对子宫螺旋动脉重塑相关的胎盘滋养细胞的生物学行为作用。方法通过transwell实验检测滋养细胞侵袭能力的变化;采用划痕实验检测滋养细胞迁移能力的变化;利用15-HETE、基质金属蛋白酶2(MMP-2)抑制剂处理滋养细胞,分析单处理、共处理后滋养细胞的迁移和侵袭能力的变化。结果15-HETE处理滋养细胞系后,与正常对照组相比,滋养细胞的侵袭和迁移能力增加;与15-HETE处理组相比,15-HETE和MMP-2抑制剂同时处理滋养细胞后,其侵袭和迁移细胞数量较少;与MMP-2抑制剂处理组相比,15-HETE和MMP-2抑制剂同时处理滋养细胞后,其侵袭和迁移细胞数量增多。结论15-HETE对滋养细胞的侵袭和迁移能力具有促进作用,通过调节MMP-2的表达来发挥作用的。15-HETE在胎盘中作用的明确有助于阐明子痫前期的病理机制,并可能成为子痫前期的早期预测和诊断提供新的生物标志物。

子痫前期患者血清12-羟基二十碳四烯酸浓度变化及其对血管内皮细胞凋亡的影响

目的观测子痫前期患者血清12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)浓度变化及对绒毛膜外滋养细胞诱导血管内皮细胞凋亡的影响,探讨12-HETE参与在子痫前期发生、发展的可能机制。方法收集2019年6月至2020年6月复旦大学附属中山医院吴淞医院子痫前期患者临床症状出现前26例和出现后23例,以及与之孕周、年龄及BMI相匹配的正常孕妇26例及正常未孕妇女14例血清样本,利用超高压液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS)检测各组血清12-HETE浓度;建立人血管内皮细胞的单培养及其与胎盘滋养细胞HTR-8/Snveo的共培养模型,分为正常对照组、12-HETE处理组、共培养对照组、共培养12-HETE处理组。采用流式细胞术检测各组细胞血管内皮细胞的凋亡情况,计算凋亡率。结果12-HETE的保留时间为3.33 min,母离子碎片为319.33 m/z,离子碎片为179.22 m/z,在20-2000 pg/ml的线性范围内,相关系数r^(2)=0.99,能够满足样本检测需求。子痫前期患者临床症状出现前、后12-HETE浓度均高于正常孕妇组和正常未孕妇女组(均P<0.01)。血管内皮细胞单培养中,12-HETE处理组细胞凋亡率显著低于正常对照组(P<0.01);共培养对照组血管内皮细胞的凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01);共培养12-HETE处理组血管内皮细胞的凋亡率显著低于共培养对照组(P<0.01)。结论子痫前期患者临床症状出现前后外周血中12-HETE浓度均显著升高,其可能通过抑制血管内皮细胞凋亡参与子痫前期的发生、发展。

慢性心力衰竭病人血清20-HETEs水平与心室重构的关系探讨

目的观察慢性心力衰竭病人血清20-羟基二十碳四烯酸(HETEs)水平与心室重构的关系及潜在相关机制。方法选取2018年1月—2019年12月我院心血管内科收治的慢性心力衰竭病人92例为观察组,同时选取同期于我院体检的健康者92名为对照组。检测两组外周血20-HETEs、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。经胸行多普勒超声心动图检查,测量慢性心力衰竭病人左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF),并分析20-HETEs与IL-6、TNF-α、NT-proBNP及左室指标之间的相关性。结果观察组外周血20-HETEs、IL-6、TNF-α、NT-proBNP水平均高于对照组(P<0.01)。心功能Ⅲ级病人血清20-HETEs水平、LVEDD和NT-proBNP高于Ⅱ级病人,LVEF低于Ⅱ级病人(P<0.01)。20-HETEs与IL-6、TNF-α、NT-proBNP及LVEDD呈正相关,与LVEF呈负相关。结论慢性心力衰竭病人外周血清20-HETEs水平高于正常对照组,通过炎性因子IL-6、TNF-α等参与心室重构,辅助慢性心力衰竭的临床诊治。

CYP4A/20-HETE和eNOS活化有关的调节蛋白间的相互作用

目的研究CYP4A/20-HETE和eNOS活化有关的调节蛋白间的相互作用。方法培养新生牛肺动脉内皮细胞(PAECs),用免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)对下列4组的CYP4A,eNOS及eNOS调节蛋白进行测定:对照组:PAECs培养皿中加入与20-HETE处理组体积相同的乙醇溶剂,作用10min;20-HETE处理5min组:PAECs培养皿中20-HETE的浓度为1×10-6mol·L-1,作用5min;20-HET处理10min组:PAECs培养皿中20-HETE的浓度为1×10-6mol·L-1,作用10min;VEGF处理10min组:PAECs培养皿中VEGF的浓度为1×10-8mol·L-1,作用10min。结果经20-HETE处理后:肺动脉内皮细胞eNOS蛋白表达增加、phos-pho-eNOS(Ser1177)合成增加;用VEGF进行的上述实验结果与20-HETE相似;20-HETE促使Hsp、蛋白激酶B(Akt)与eNOS结合。结论免疫沉淀和免疫印迹实验结果表明:CYP4A与eNOS在肺动脉内皮细胞相互结合;20-HETE通过促使Hsp、蛋白激酶B(Akt)与eNOS结合,使eNOS(Ser1177)磷酸化,增加NO释放,舒张血管;VEGF和20-HETE的作用相似。

20-HETE对大鼠心肌缺血再灌注损伤中NADPH氧化酶活性及ROS生成的影响

目的探讨20-HETE加重大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con组),缺血再灌注模型组(IR组),IR+20-HETE合成酶抑制剂(HET0016)组,Con+HET0016组,每组12只,通过Langendorff灌流系统建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,全心缺血35 min再灌注40 min,Power Lab/8P系统实时监测心肌力学指标;灌流结束后取心肌组织TTC法检测心肌梗死面积;DHE荧光探针法检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot检测NADPH氧化酶亚基p47^(phox)磷酸化水平;细胞色素C的还原法检测NADPH氧化酶活性。结果离体心脏缺血再灌注后,加入20-HETE合成酶抑制剂HET0016(1μmol/L)后明显改善了IR导致的心肌力学指标下降,LVDP由IR组的(48.6±3.4)%升至(71.7±3.5)%,+d P/dt_(max)由(51.9±2.1)%升至(69±3.2)%,-d P/dt_(max)由(47.1±3.6)%升至(64.1±3.8)%(P<0.05);IR+HET0016组心肌梗死面积比IR组减小了37.2%(P<0.05)。DHE荧光探针检测发现IR+HET0016处理组心肌组织中ROS含量比IR组降低了45.8%(P<0.05);最后通过对NADPH氧化酶活性检测发现,HET0016显著减少了IR引起的NADPH氧化酶p47^(phox)亚基磷酸化水平及全酶活性的升高(P<0.05)。结论 20-HETE通过激活NADPH氧化酶诱导过量ROS的生成,加重心肌缺血再灌注损伤。

CL-20/HATO复合物的制备、表征及性能

以二水合1,1'-二羟基-5,5'-联四唑(H2DHBT)和羟胺水溶液为原料,通过中和反应,采用原位结晶法在六硝基六氮杂异伍兹烷(CL-20)水悬浮液中制备了一种CL-20与1,1'-二羟基-5,5'-联四唑二羟胺盐(TKX-50,HATO)的复合物样品。采用扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外图谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)以及X射线衍射(XRD)表征了复合物的形貌和结构,研究了不同工艺条件对复合物样品形貌的影响;利用差示扫描量热技术(DSC)分析了其热性能,按GJB772A^(-1)997方法测试其撞击、摩擦感度;使用Urizar公式计算了其爆速。结果表明,获得附着完整均匀的CL-20/HATO复合物样品工艺条件为:反应温度90℃,反应时间10 min,羟胺水溶液的滴加速率为60 mL·min^(-1),制得的CL-20/HATO复合物样品中CL-20晶型未发生变化,由定量碳谱所得复合物质量比为m(CL-20)∶m(HATO)=55∶45;复合物存在两个放热分解峰,其峰温分别为238.3℃和250.7℃,特性落高为44.7 cm,撞击爆炸概率为52%,摩擦爆炸概率为76%;复合物样品的理论爆速为9516 m·s^(-1)。