猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析

【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)JS2008株的序列特征及其连续传代后的序列变化规律,为筛选出新的疫苗候选毒株提供参考依据。【方法】将分离自华东地区某发病猪场的PEDV JS2008株在Vero细胞系上传代培养至100代,选取部分代次进行病毒滴度测定;每隔10代提取病毒RNA,采用RT-PCR对各代次病毒的S基因、ORF3基因和N基因进行扩增,并与PEDV经典和流行参考毒株进行序列比对及遗传变异分析。【结果】PEDV JS2008株经连续传代至100代,其病毒滴度由105.5TCID50/0.1 mL上升至107.5TCID50/0.1 mL。JS2008株在传代过程中共有11处碱基发生突变,其中9处发生在传代培养的第10～20代,变异主要位于S基因上(7/11);同时发现JS2008株及其传代株与attenuated DR13株的相似性最高。基于S基因和N基因序列构建的PEDV系统发育进化树均表明JS2008株各代次与attenuated DR13株同处于Group 3进化群;基于ORF3基因序列构建的PEDV系统发育进化树则显示,JS2008株各代次与attenuated DR13株均处于同一进化群(Group 2)。【结论】PEDV JS2008株通过Vero细胞系进行体外连续传代至100代,其碱基突变主要发生在病毒传代培养的第10～20代,病毒滴度明显提高,抗原量增加,为研制新型PEDV疫苗提供可能,同时推测病毒传代培养10～20代是病毒发生变异以适应细胞培养的活跃期。

猪圆环病毒2型SD/2008株对仔猪的致病性

为了明确PCV2-SD/2008株对猪的致病性,将12头5周龄健康断奶仔猪随机分为PCV2组和对照组,每组6头。PCV2组经口鼻途径接种PCV2SD/2008株第3代细胞毒(105.61 TCID50/0.1mL),3mL/头,对照组经相同途径接种3mL细胞维持液。PCV2组中的1头猪从感染后14d开始出现间断腹泻,一直到持续到试验结束。感染后第4、5周,感染组的周平均增重显著低于对照组(P<0.05)。病理组织学检查可见PCV2感染猪的淋巴结和脾脏内淋巴细胞缺失、单核/巨噬细胞和嗜酸性粒细胞浸润;间质性肺炎、坏死性肝炎和肾炎、小血管炎症等变化,并且感染后35d比感染后14d的病理变化更加严重。应用免疫组化方法在感染猪的肺、肝、脾、肾、淋巴结、小肠等多种组织中检测到了PCV2抗原,其中颌下淋巴结、肺、小肠中的阳性信号数与检出率最高。结果表明,PCV2SD/2008株对仔猪具有明显的致病性。

平菇2008菌株特性及栽培要点

平菇2008是1995年我们从国外引进的众多品种中筛选出的一个优良菌株。试验结果表明,该品种具有抗杂菌能力强,发菌速度较快,产量高等优点,菇形圆正,菌肉肥厚,柄短,不易破碎,口感细腻,菇味浓香,堪称食用菌中之上品。现将该品种的特性及栽培管理要点介绍如下:

不同施氮量和移栽密度对株两优2008产量影响初探

采用裂区试验,研究不同施氮量(0,120,180 kg/hm2)和栽插密度(22.5万,30.0万,37.5万蔸/hm2)对株两优2008产量的影响,探索其适宜施氮量和栽插密度。结果表明:不同施氮量和栽插密度对产量均有显著影响,以施氮量180.0 kg/hm2、栽插密度30万蔸/hm2产量最高。

株两优2008在湘乡市的种植表现与高产栽培技术

2012—2013年两系迟熟杂交早稻株两优2008在湖南湘乡市示范种植,表现产量高,抗性好,生育期适中,适宜于湘乡市作双季早稻大面积推广。