梅里埃API 20NE生化鉴定系统在布鲁氏菌鉴定中的局限性

目的 对梅里埃API 20NE生化鉴定系统在布鲁氏菌鉴定中出现的错误结果进行总结分析,并探索相应的改正措施,提醒微生物实验室工作人员不能过分依赖生化鉴定结果。方法 对2011年1月-2016年3月陕西省人民医院门诊及住院病人血液、脓液、关节腔积液分离的33株氧化酶阳性、泥沙样、疑似布鲁氏菌的G-细小杆菌,采用梅里埃API 20NE快速生化鉴定板条进行鉴定,对得到的错误结果进行分析,并结合布鲁氏菌的生物学特征进行补充试验,以得到正确的鉴定结果。结果 API 20NE生化鉴定板条,误将上述33株菌,2株鉴定为人苍白杆菌,其余31株均鉴定为苯丙酮酸嗜冷杆菌,且ID值=91.5%,T值=1。对这种看似可信度很高的鉴定结果,结合菌落细小、48 h后产生橘红色色素、菌体为G-泥沙样、快速脲酶试验阳性特征,和病人临床症状、接触史及血清学鉴定也证实,上述33株菌均为布鲁氏菌。结论 API20 NE生化鉴定系统,不适合对布鲁氏菌进行鉴定,对疑似错误的鉴定结果,要结合菌落、菌体特点及其它生物学特征和病人的临床表现、接触史及一些辅助实验来确定细菌,过分依赖生化鉴定,会得出错误结果。另外,商家也应补充和完善该鉴定系统,进一步提高API快速鉴定系统的临床应用价值。

3种气单胞菌鉴定方法的比较

采用分子生物学检测方法、API 20NE生化鉴定法以及梅里埃(VITEK MS)全自动快速微生物质谱检测法,对60株试验菌株进行种属鉴定,比较3种鉴定方法的准确性和优缺点。对试验菌株进行16S r DNA特异性引物扩增和测序,确定菌株种属,并作为比较3种鉴定方法的标准。随后用API 20NE生化鉴定法和梅里埃(VITEK MS)全自动快速微生物质谱检测法,对试验菌株进行鉴定。结果显示,分子生物学方法和生化鉴定法,对60株菌的检出率均为100%,而质谱仪的检出率仅为60.0%。使用分子生物学法共检出44株气单胞菌(100%),准确率为100%;使用生化鉴定法对气单胞菌的检出率为88.6%,准确率为59.1%;使用质谱仪对气单胞菌的检出率为54.5%,准确率为38.6%。3种鉴定方法对气单胞菌的检出率和准确率从大到小为:分子生物学法、API 20NE生化鉴定、质谱仪。