血清可溶性髓系细胞触发性受体1、白细胞介素-21、25羟基维生素D在炎症性肠病患儿中的表达及相关性

目的探讨血清可溶性髓系细胞触发性受体1(sTREM-1)、白细胞介素-21(IL-21)、25羟基维生素D[25(OH)D]在炎症性肠病患儿中的表达及相关性。方法选取107例炎症性肠病患儿纳入观察组,另选取同期53例健康体检儿童纳入对照组,依照疾病活动性将观察组患儿分为活动期组54例和缓解期组53例,分别比较观察组与对照组、活动期组与缓解期组sTREM-1、IL-21、25(OH)D表达水平,采用Kendall's tau-b法分析sTREM-1、IL-21、25(OH)D与炎症性肠病活动性的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析sTREM-1、IL-21、25(OH)D诊断炎症性肠病和预测炎症性肠病活动期的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度。结果观察组血清sTREM-1、IL-21水平高于对照组,25(OH)D水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。活动期组血清sTREM-1、IL-21水平高于缓解期组,25(OH)D水平低于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.05)。Kendall′s tau-b相关性分析显示,sTREM-1、IL-21与炎症性肠病活动性呈正相关(r=0.460、0.484,P<0.05),25(OH)D与炎症性肠病活动性呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。ROC曲线显示,sTREM-1、IL-21、25(OH)D和三者联合诊断炎症性肠病的AUC分别为0.791、0.852、0.808和0.862,敏感度分别为74.80%、81.30%、75.50%和81.30%,特异度分别为75.50%、75.50%、81.30%和79.20%;sTREM-1、IL-21、25(OH)D和三者联合预测炎症性肠病活动期的AUC分别为0.821、0.840、0.799和0.840,敏感度分别为79.60%、75.90%、77.40%和87.00%,特异度分别为79.20%、75.50%、83.30%和79.20%。结论血清sTREM-1、IL-21、25(OH)D水平与儿童炎症性肠病的发生与发展密切关联,动态监测其水平有助于为临床诊断炎症性肠病和评估患儿病情进展提供重要参考依据。

7,8-二羟基黄酮对脂多糖诱导心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

目的研究7,8-二羟基黄酮(7,8-dihydroxyflavone,7,8-DHF)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导心肌细胞损伤中的作用及机制。方法传代培养H9c2心肌细胞系,随机分为对照组(Ctrl)、LPS组、LPS+7,8-DHF组和7,8-DHF单独处理组,给药24 h后观察细胞形态,分别采用MTT法检测细胞活力、Live/Dead染色检测细胞活死比例、Mitosox染色检测细胞线粒体氧化应激水平,Western blot技术检测Akt、核因子κB(NF-κB)p65、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等蛋白表达水平。结果7,8-DHF增加LPS诱导的心肌细胞活力,减少氧化应激水平和细胞死亡。7,8-DHF激活LPS诱导的心肌细胞Akt信号,抑制STAT3磷酸化水平和NF-κB p65蛋白表达。结论7,8-DHF可能通过激活Akt、抑制磷酸化STAT3和NF-κB p65信号分子减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

斯里兰卡瓦拉沉香中2个新的5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮(1)和(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(2),均为新化合物。化合物1和2对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生NO无抑制作用,MTT法表明对5株人肿瘤细胞不具有体外生长抑制作用,200μg/m L的化合物2对酪氨酸酶具有弱抑制作用,抑制率为(21.67±1.67)%。

美拉德反应中间体2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)吡喃-4-酮的研究进展

2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)吡喃-4-酮(2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4H-pyran-4-one,DDMP),是美拉德反应关键中间体之一,在美拉德反应产物调控中起到重要作用。DDMP属于烯醇酮类化合物,广泛存在于天然尤其是热加工食品,具有抗氧化、抗菌、心脏保护等作用。当前,随着对食品安全、风味和活性功能关注度的不断提升,学者对DDMP进行了广泛而深入的研究。该文基于近年来相关文献,对DDMP的存在、形成及降解、生物活性及感官特性等方面的研究进展进行全面系统的总结,旨在为DDMP在食品、医药、香料领域的基础和应用研究提供参考。

3-羟基色酮的不对称Michael加成反应

3-羟基色酮骨架存在于大量天然产物中,其衍生物多具有重要的生理活性和潜在的药用价值,但目前对3-羟基色酮的不对称手性催化反应研究较少。为丰富3-羟基色酮的研究多样性,通过控制变量法对手性金鸡纳碱类催化剂、溶剂、温度、投料比、底物浓度和催化剂用量进行筛选,确定了最佳的反应条件:以化合物1a和2a的反应为例,0.10 mmol的化合物1a与0.12 mmol的化合物2a在Cat*5(10%,物质的量分数)的催化下,在1.0 mL的甲基叔丁基醚(MTBE)中于0℃下反应24~48 h。对底物进行普适性研究,以中等至优异的收率(71%~99%)和较好的对映选择性(56%~89%)获得了2-芳基3-羟基色酮衍生物。将对映选择性最高的产物3al(89%)进行30倍放大反应,能够以99%的收率和76%的对映选择性获得目标产物。所有化合物的结构经1H NMR,13C NMR, HPLC以及HR-MS(ESI)确证。

5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮抑制流感病毒诱导A549细胞炎症反应和铁死亡的作用及机制

目的 研究四方蒿中提取出的5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮(5-HDF)对H1N1流感病毒引起的肺损伤的保护作用及潜在机制。方法 使用H1N1流感病毒感染A549细胞制作流感病毒感染模型,检测5-HDF的细胞毒性及其对感染病毒后的炎症和铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。采用乙醇回流提取和硅胶色谱法从四方蒿中提取分离获得5-HDF,并采用NMR和MS鉴定其结构。采用MTT法检测不同浓度的5-HDF对A549细胞的毒性;H1N1流感病毒以0.1的感染复数感染A549细胞;采用流式细胞术检测5-HDF对感染H1N1流感病毒后A549细胞中TRAIL和IL-8表达水平的影响;Western blotting检测phospho-p38 MAPK(Thr180/Tyr182)、phospho-NF-κB p65(Ser536)、cleaved caspase3、cleaved PARP、SLC7A11、GPX4等炎症、细胞凋亡和铁死亡相关蛋白表达的水平。通过鼻腔接种50μL半数致死量(LD50)的H1N1流感病毒液复制小鼠H1N1流感病毒感染模型,以体质量变化率、肺解剖结果、肺组织病理形态变化为指标,考察5-HDF(30 mg/kg、60 mg/kg)体内抗H1N1流感病毒的作用。结果 MTT结果显示5-HDF在0~200μg/mL对A549细胞没有明显的细胞毒性(P>0.05)。流式细胞术和Western blotting结果显示,5-HDF能抑制H1N1流感病毒感染的A549细胞中phospho-NF-κB p65和phospho-p38 MAPK的活化,降低促炎因子IL-8的表达,且5-HDF能上调SLC7A11和GPX4等抗铁死亡相关蛋白表达的水平,并抑制凋亡标志物cleaved caspase3和cleaved PARP及凋亡因子TRAIL的表达(P<0.05)。5-HDF灌胃给药7 d,可提高H1N1流感病毒感染导致的小鼠体质量降低,降低因感染H1N1流感病毒而异常升高的肺指数,并减轻其肺组织病变程度(P<0.05)。结论 本研究推测5-HDF具有一定的抗小鼠H1N1流感病毒感染作用,可能通过增加SLC7A11和GPX4的表达并抑制phospho-NF-κB p65和phospho-p38 MAPK的活化,降低cleaved caspase3和cleaved PARP的表达,来减弱流感病毒H1N1感染A549细胞所引起的铁死亡、炎症反应和细胞凋亡。

催化邻羟基苯基取代对亚甲基醌与酮亚胺环加成反应合成二氢-1,3-苯并噁嗪化合物

发展了邻羟基苯基取代对亚甲基醌与酮亚胺在磷酸催化体系中的[4+2]环加成反应,以高产率和优良的非对映选择性得到了一系列二氢-1,3-苯并噁嗪化合物.当向反应体系加入催化量的B(C_(6)F_(5))_(3)时,产物的产率得到保持且发生非对映选择性翻转.

(E)-4-(3,5-二溴-4-羟基苯亚甲基氨基)-2,3-二甲基-1-苯基-1,2-二氢吡唑-5-酮的合成与表征

采用3,5-二溴-4-羟基苯乙醛与4-氨基安替比林以甲醇作为溶剂通过缩合反应合成了(E)-4-(3,5-二溴-4-羟基苯亚甲基氨基)-2,3-二甲基-1-苯基-1,2-二氢吡唑-5-酮。对所生成化合物采用乙醇进行结晶,5 d后获得浅黄色的晶体,其结构经X-射线单晶衍射表征,属单斜晶系,P21/c空间群,晶胞参数a=12.0197(11),b=10.8239(10),c=13.3921(12),β=94.870(2)°,V=1736.0(3)3,Z=4,D x=1.780 mg·m-3,θ=2.4~25.5°,μ=4.69 mm-1,T=295(2)K,利用傅里叶变换红外光谱仪得到产物的红外光谱图。

血清PGRN、IL-21、4-HNE水平与重症肺炎患儿病情程度、预后的相关性及对患儿预后不良的预测价值

目的探讨血清颗粒蛋白前体(PGRN)、白细胞介素(IL)-21、4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平与重症肺炎(SP)患儿病情程度、预后的相关性及对患儿预后不良的预测价值。方法选取2022年1月至2023年1月该院收治的110例SP患儿作为SP组,另随机选取该院同期收治的55例轻症肺炎患儿作为轻症组、55例健康儿童作为对照组。比较3组血清PGRN、IL-21、4-HNE、常规炎症因子[C-反应蛋白(CRP)、IL-6、降钙素原(PCT)]水平。比较SP组不同病情程度[采用小儿危重症评分(PCIS)评估]患儿血清PGRN、IL-21、4-HNE水平。比较SP组治疗后3个月不同预后患儿治疗前后血清PGRN、IL-21、4-HNE、CRP、IL-6、PCT水平及变化值(以△表示对应指标治疗前后变化值的绝对值)。采用Pearson相关分析血清PGRN、IL-21、4-HNE水平与CRP、IL-6、PCT水平、PCIS的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析△PGRN、△IL-21、△4-HNE、△CRP、△IL-6、△PCT对SP患儿预后不良的预测价值。采用净重新分类指数(NRI)、综合判别改善指数(IDI)评价新预测方案(△PGRN、△IL-21、△4-HNE、△CRP、△IL-6、△PCT联合预测)与常规预测方案(△CRP、△IL-6、△PCT联合预测)对SP患儿预后不良的预测价值。结果SP组血清PGRN、IL-21、4-HNE、CRP、IL-6、PCT水平均高于轻症组与对照组,且轻症组血清PGRN、IL-21、4-HNE、CRP、IL-6、PCT水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SP组中,极危重患儿3例,危重26例,非危重81例。危重或极危重患儿血清PGRN、IL-21、4-HNE水平均高于非危重患儿,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,SP组血清PGRN、IL-21、4-HNE水平与血清CRP、IL-6、PCT水平均呈正相关(P<0.05),与PCIS均呈负相关(P<0.05)。SP组中,预后不良25例,预后良好85例;两组治疗后血清PGRN、IL-21、4-HNE、CRP、IL-6、PCT水平均低于同组治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良患儿治疗前后血清PGRN、IL-21、4-HNE、CRP、IL-6、PCT水平均高于预后良好患儿,△PGRN、△IL-21、△4-HNE、△CRP、△IL-6、△PCT均小于预后良好患儿,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,△PGRN、△IL-21、△4-HNE、△CRP、△IL-6、△PCT预测SP患儿预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.786、0.754、0.764、0.794、0.777、0.754,各指标单独预测SP患儿预后不良的AUC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。新预测方案预测预后不良的AUC为0.956(95%CI:0.899~0.986),预测灵敏度、特异度分别为92.00%、90.59%;常规预测方案预测预后不良的AUC为0.849(95%CI:0.768~0.910),预测灵敏度、特异度分别为88.00%、78.82%;与常规预测方案比较,新预测方案的AUC明显增大(Z=2.302,P<0.05),且新预测方案与常规预测方案比较,NRI为0.029(95%CI:0.021~0.039,P<0.05)、IDI为0.047(95%CI:0.035~0.064,P<0.05)。结论SP患儿血清PGRN、IL-21、4-HNE水平与CRP、IL-6、PCT、病情程度均呈正相关,且治疗期间监测血清PGRN、IL-21、4-HNE水平变化对预测SP患儿预后不良具有良好应用价值。

补充β-羟基丁酸在心血管疾病中应用和机制的研究进展

心血管疾病的预防和治疗一直是相关领域关注的热点。本文探讨了在心肌缺血、心肌梗死、糖尿病心肌病、高血压、心肌炎症、肥厚型心肌病、心力衰竭等心血管疾病预防和治疗中,外源性和内源性补充β-羟基丁酸的应用及作用机制。外源性补充β-羟基丁酸可快速、直接地为心脏提供替代能量,从而预防和治疗心脏损伤,综合效果明显优于内源补充β-羟基丁酸。通过内源性的生酮饮食产生的脂肪酸,需要在体内氧化成β-羟基丁酸以提供能量,受基础疾病本身糖脂代谢的状态影响较大。目前,生酮饮食不推荐用于心肌缺血或心肌梗死的预防和治疗,以及糖尿病心肌病或高血压的治疗。

16α-羟基泼尼松龙的合成工艺改进

针对原16α-羟基泼尼松龙合成工艺原料成本高、消除反应选择性差等问题,开发了一种改进工艺。以21-羟基孕甾-1,4,9(11),16-四烯-3,20-二酮-21-醋酸酯为原料,经氧化、溴羟化、脱溴及水解等4步反应合成目标化合物16α-羟基泼尼松龙,降低了生产成本及三废排放量,并使反应总收率达到82.2%。产物结构经1H NMR、13C NMR和MS(ESI)等数据确证。改进后的合成工艺具有反应选择性好、成本低、总收率高等优点。

5-甲基-7-甲氧基异黄酮绿色合成工艺研究

以3,5-二羟基甲苯为原料,经Hoesch反应得到2,4-二羟基-6-甲基脱氧安息香,再经环合反应得到5-甲基-7-羟基异黄酮,使用绿色合成试剂碳酸二甲酯经甲氧基化反应得到5-甲基-7-甲氧基异黄酮,并获得最佳工艺条件,最优条件下三步反应总收率达47.8%。

4-羟基苯并噁唑-2-酮通过脂质代谢和内质网应激通路治疗酒精性脂肪肝大鼠的作用机制研究

目的探讨4-羟基苯并噁唑-2-酮[4-hydroxy-2(3H)-benzoxazolone,HBOA]对酒精性脂肪肝(AFLD)大鼠脂质代谢和内质网应激(ERS)的影响。方法实验前应用AutoDock Tools软件将4-羟基苯并噁唑-2-酮分别与脂质代谢及ERS相关蛋白进行分子对接,预测结合能力。动物实验先将雄性SD大鼠随机分为正常组和模型复制组,参考酒精递增灌胃法建立酒精性脂肪肝模型,模型复制成功的大鼠随机分为模型组、水飞蓟宾组(26.25 mg·kg^(-1))及4-羟基苯并噁唑-2-酮高、中、低剂量组(100、50、25 mg·kg^(-1))。观察大鼠状态;记录体质量、肝质量,并计算肝指数;油红O染色观察肝组织脂肪变性情况;采用试剂盒法或全自动生化分析仪检测肝组织中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;Western Blot法检测肝组织脂质代谢及ERS相关蛋白固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶样ER激酶(PERK)及其磷酸化(p-PERK)、肌醇蛋白酶1(IRE1)及其磷酸化(p-IRE1)、活化转录因子6(ATF6)的表达水平;RT-qPCR法检测肝组织SREBP-1c、GRP78 mRNA表达。结果4-羟基苯并噁唑-2-酮与脂质代谢及ERS相关蛋白之间结合能均小于0 kcal·mol^(-1)。与正常组比较,模型组大鼠肝指数明显增高(P<0.01),镜下可见肝组织大面积红染且细胞内有大量红棕色脂滴,肝组织中GPT、GOT和血清中TC、TG、LDL-C水平明显增高(P<0.01),HDL-C水平明显降低(P<0.01),肝组织中脂质代谢相关蛋白SREBP-1c、ACC1和ERS相关蛋白GRP78、ATF6蛋白表达及PERK、IRE1磷酸化水平明显增高(P<0.01),肝组织中SREBP-1c、GRP78 mRNA相对表达量明显增高(P<0.01)。与模型组比较,4-羟基苯并噁唑-2-酮各组大鼠肝指数(低剂量组除外)明显降低(P<0.01),镜下未见肝组织大面积红染,细胞内脂滴聚集不同程度减少,肝功能指标及血脂四项得到明显改善(P<0.05,P<0.01),4-羟基苯并噁唑-2-酮各组脂质代谢相关蛋白SREBP-1c、ACC1和ERS相关蛋白GRP78、ATF6蛋白表达及PERK、IRE1磷酸化水平明显降低(P<0.05,P<0.01),4-羟基苯并噁唑-2-酮各组SREBP-1c(低剂量组除外)、GRP78 mRNA相对表达量明显降低(P<0.01)。结论4-羟基苯并噁唑-2-酮可改善酒精诱导的大鼠酒精性脂肪肝,可能与调节脂质代谢及抑制内质网应激有关。

机械化学法制备亚稳态7-羟基异黄酮溶剂合物多晶型

目的系统研究7-羟基异黄酮溶剂合物多晶型现象,为该药开发过程中可能存在的溶剂合物晶型杂质成分的控制提供科学依据。方法通过分析已获得的7-羟基异黄酮溶剂合物结构特点、堆积方式和相互作用,采用机械化学法制备获得2种新的7-羟基异黄酮溶剂合物,采用单晶X射线衍射分析、粉末X射线衍射分析、差示扫描量热分析、热重分析、红外光谱分析对多晶型进行表征,并考察晶型稳定性。结果制备获得的2种7-羟基异黄酮溶剂合物均为亚稳定晶型。结论利用机械化学法可以制备发现亚稳定多晶型,这将为丰富多晶型的种类和晶型的质量控制提供物质基础和技术支撑。

初诊2型糖尿病患者25-羟基维生素D水平与糖尿病酮症的相关性研究

目的探讨25-羟基维生素D(25-hydroxy vitamin D,25OHD)水平与初诊2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者发生糖尿病酮症(diabetic ketosis,DK)的相关性。方法回顾性分析2017年1月至2023年3月于清华大学附属垂杨柳医院住院治疗的186例初诊T2DM患者的临床资料,收集患者的年龄、性别、身高、体重、血压、血清25OHD水平、尿酮体、糖脂代谢指标以及胰岛功能等。根据尿酮体检测是否阳性将186例患者分为酮症组(119例)和非酮症组(67例)。根据25OHD水平对186例患者进行分组,25OHD<10ng/ml为25OHD严重缺乏组(38例),10ng/ml≤25OHD<20ng/ml为25OHD缺乏组(100例),20ng/ml≤25OHD<30ng/ml为25OHD不足组(41例),25OHD≥30ng/ml为25OHD充足组(7例)。采用二元logistic回归分析初诊T2DM患者发生DK的危险因素。结果酮症组患者血清25OHD水平为(14.53±6.37)ng/ml,显著低于非酮症组的(18.07±7.99)ng/ml,差异有显著性(P<0.05);酮症组25OHD缺乏率为81.51%,显著高于非酮症组的61.19%,差异有显著性(P<0.05)。不同25OHD水平分组中,酮症患者和非酮症患者的检出率差异均有显著性(P<0.05)。Logistic回归分析显示,血清25OHD及磷水平降低、餐后2h静脉血糖升高及年龄较低是初诊T2DM患者合并DK的独立危险因素(P<0.05)。结论初诊T2DM患者25OHD重度缺乏,以合并DK者更为明显;25OHD缺乏是初诊T2DM患者发生DK的独立危险因素。

3β-羟基-16α,17α,21-三甲基孕甾-5-烯-20-酮的合成

Hydroxy-16α,17α,21-trimethyl-5-en-20-one was synthesized from 3α-acetoxypregna-5,16-dien-20-one and characterized by elemental analysis, 1H NMR, MS and IR. 16α,17α-Dimethyl steroid was formed by treatment of 3β-acetoxypregna-5,16-dien-20-one with methylmagnesium bromide, followed by reaction of the resulting 17(20)-enolate with methyl iodide. The main by- products were 3β-hydroxy-16α,17α-dimethyl-5-en-20-one. LHDMS([(CH 3) 3Si] 2NLi) and LDA([(CH 3) 2CH] 2NLi) were chosen as proper reagents for 21-position alkylation. The almost quantitative conversion of 16α,17α-dimethyl corticosteroid was achieved and the highest yield of the 16α,17α,21-trimethyl corticosteroid was 78%. The optimum reaction temperature was -20 ℃ for 16α,17α- dialkylation and was -50 ℃ for 21- position alkylation.

高压对17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯在水中溶解性的影响

研究了高压对 17α 羟基孕甾 4 烯 3,2 0 二酮 2 1 醋酸酯 (RSA)在水中溶解性的影响 ,结果表明 :高压可显著提高RSA在水中的溶解性 ;RSA在压力为 1.0MPa时在水中溶解性达到最高 ;同时处理时间及温度均会影响RSA在水中溶解性 ,但不同气源间对RSA在水中溶解性无显著差异 ;经显微镜观察发现高压会破坏RSA的晶体结构 ,使其以细小结晶和碎片的形式存在于水溶液中 ;利用MATLAB统计工具计算得到压力和温度对RSA溶解性影响的多元回归方程 :lnC = 1.14 5 9+0 .12 6 7lnP 37.32 3/T 。

7,8-二羟基黄酮通过Wnt/β-catenin信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化

目的 探究7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化的影响和机制。方法 将从健康人牙周膜组织中分离培养的hPDLSCs用不同浓度的7,8-二羟基黄酮(0,0.5,1,5,10,20,40μmol/L)处理,通过MTT法检测hPDLSCs活性。将hPDLSCs分为5组:对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和XAV939(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组。各组hPDLSCs均用成骨诱导液培养,对照组的成骨诱导液不添加药物,低剂量组、中剂量组和高剂量组的成骨诱导液中分别添加0.5,1,5μmol/L的7,8-二羟基黄酮,XAV939组的成骨诱导液中同时添加5μmol/L的7,8-二羟基黄酮和10μmol/L的XAV939。各组hPDLSCs共培养21 d,每2 d更换培养基,检测碱性磷酸酶(ALP)活性。通过茜素红染色观察钙化结节形成(OD_(590 nm))。通过qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Wnt-3a、β-catenin和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的mRNA表达水平。通过Western blot检测Wnt-3a、β-catenin和GSK-3β的蛋白表达水平。结果 不同浓度的7,8-二羟基黄酮处理后,hPDLSCs的相对活力差异无统计学意义(F=1.693,P=0.152)。与对照组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组hPDLSCs的ALP相对活性升高,钙化结节形成量升高,Runx2、OCN、OPN和BMP-2的mRNA相对表达量升高,Wnt-3a和β-catenin蛋白相对表达量升高,GSK-3β蛋白相对表达量降低(均P<0.05)。与低剂量组相比,中剂量组和高剂量组hPDLSCs中ALP相对活性升高,钙化结节形成量升高,Runx2、OCN、OPN和BMP-2的mRNA相对表达量升高,Wnt-3a和β-catenin蛋白相对表达量升高,GSK-3β蛋白相对表达量降低(均P<0.05)。与高剂量组相比,XAV939组hPDLSCs中ALP相对活性降低,钙化结节形成量降低,Runx2、OCN、OPN和BMP-2的mRNA相对表达量降低,Wnt-3a和β-catenin蛋白相对表达量降低,GSK-3β蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。结论 7,8-二羟基黄酮通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进hPDLSCs成骨分化。

17α,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-17-戊酸酯的合成

以雄烯二酮为起始原料,经加成、硅醚化、环加成-质子脱硅基化及置换等7步反应合成了氢化可的松的中间体——17α,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-17-戊酸酯,总收率75%,纯度>96%,其结构经1H NMR和ESI-MS确证。

医药中间体17α-羟基-21-碘黄体酮的合成工艺改进

以羟基黄体酮和一氯化碘为原料,合成17α-羟基-21-碘黄体酮。考察溶剂体系、反应温度及原料配比对反应结果的影响。得到最佳反应条件为:反应溶剂为水、反应温度为0～5℃、羟基黄体酮与一氯化碘摩尔比为1.0:1.0,粗品精制后收率可达98%。