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单增李斯特菌新疆分离株lmo2192基因克隆及生物信息学分析
被引量:
2
1
作者
李红欢
钱凌霄
+3 位作者
杜冬冬
张奇文
李庆辉
马勋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第11期3011-3017,共7页
试验旨在对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中lmo2192基因序列(登录号:CAD00270)设计特异性引物,利用PCR方法对lmo2192基因进行扩增,回收目的基因,连接到pMD19-T载体上...
试验旨在对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中lmo2192基因序列(登录号:CAD00270)设计特异性引物,利用PCR方法对lmo2192基因进行扩增,回收目的基因,连接到pMD19-T载体上进行克隆,筛选阳性菌进行测序,测序后对lmo2192基因核苷酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的二级结构、三级结构,对其进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的lmo2192基因序列全长为1 277bp,包含969bp开放阅读框,共编码322个氨基酸;LM90SB2株lmo2192基因核苷酸序列与CIIMS-PH-1同源性为100.0%,与81-0861、10-0809、81-0592、81-0558、NTSN、F2365和WSLC1033的同源性为99.8%~99.9%,与L2074和NH1同源性分别为97.0%和96.9%。推导的氨基酸序列同源性为91.6%~100.0%。系统进化树显示,LM90SB2菌株lmo2192基因与4b血清型菌株亲缘关系较近,聚为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2lmo2192蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。蛋白结构域预测,lmo2192蛋白为ATP酶组分。本试验成功克隆LM90SB2分离株lmo2192基因,为进一步研究其基因功能提供理论依据。
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关键词
单增李斯特菌
lmo
2192基因
克隆
生物信息学分析
下载PDF
职称材料
单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达
被引量:
4
2
作者
李红欢
马勋
+2 位作者
钱凌霄
李庆辉
刘扬扬
《生物技术》
CAS
2019年第1期7-10,28,共5页
[目的]对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及原核表达。[方法]利用PCR方法扩增lmo2192基因,连接p MD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对。构建重组表达质粒p ET32a-2192,将其转入大肠杆菌感受态细...
[目的]对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及原核表达。[方法]利用PCR方法扩增lmo2192基因,连接p MD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对。构建重组表达质粒p ET32a-2192,将其转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达,利用SDS-PAGE与Western Blotting鉴定重组蛋白。[结果]扩增lmo2192基因序列长度为969 bp,与预期一致。该基因在大肠杆菌中大量表达,经SDS-PAGE和Western Blotting鉴定分析该产物为56 k Da左右的融合重组蛋白,与预期大小一致。[结论]成功克隆lmo2192基因,并获得大量表达,为进一步研究该基因功能奠定理论基础。
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关键词
单增李斯特菌
lmo
2192基因
克隆
原核表达
原文传递
题名
单增李斯特菌新疆分离株lmo2192基因克隆及生物信息学分析
被引量:
2
1
作者
李红欢
钱凌霄
杜冬冬
张奇文
李庆辉
马勋
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第11期3011-3017,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31360614)
文摘
试验旨在对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及生物信息学分析。根据GenBank中lmo2192基因序列(登录号:CAD00270)设计特异性引物,利用PCR方法对lmo2192基因进行扩增,回收目的基因,连接到pMD19-T载体上进行克隆,筛选阳性菌进行测序,测序后对lmo2192基因核苷酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的二级结构、三级结构,对其进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的lmo2192基因序列全长为1 277bp,包含969bp开放阅读框,共编码322个氨基酸;LM90SB2株lmo2192基因核苷酸序列与CIIMS-PH-1同源性为100.0%,与81-0861、10-0809、81-0592、81-0558、NTSN、F2365和WSLC1033的同源性为99.8%~99.9%,与L2074和NH1同源性分别为97.0%和96.9%。推导的氨基酸序列同源性为91.6%~100.0%。系统进化树显示,LM90SB2菌株lmo2192基因与4b血清型菌株亲缘关系较近,聚为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2lmo2192蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。蛋白结构域预测,lmo2192蛋白为ATP酶组分。本试验成功克隆LM90SB2分离株lmo2192基因,为进一步研究其基因功能提供理论依据。
关键词
单增李斯特菌
lmo
2192基因
克隆
生物信息学分析
Keywords
Listeria monocytogenes
lmo
2192
gene
cloning
bioinformatics analysis
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达
被引量:
4
2
作者
李红欢
马勋
钱凌霄
李庆辉
刘扬扬
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《生物技术》
CAS
2019年第1期7-10,28,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31360614
31860712)
文摘
[目的]对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及原核表达。[方法]利用PCR方法扩增lmo2192基因,连接p MD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对。构建重组表达质粒p ET32a-2192,将其转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达,利用SDS-PAGE与Western Blotting鉴定重组蛋白。[结果]扩增lmo2192基因序列长度为969 bp,与预期一致。该基因在大肠杆菌中大量表达,经SDS-PAGE和Western Blotting鉴定分析该产物为56 k Da左右的融合重组蛋白,与预期大小一致。[结论]成功克隆lmo2192基因,并获得大量表达,为进一步研究该基因功能奠定理论基础。
关键词
单增李斯特菌
lmo
2192基因
克隆
原核表达
Keywords
Listeria monocytogenes
lmo
2192
gene
cloning
prokaryotic expression
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单增李斯特菌新疆分离株lmo2192基因克隆及生物信息学分析
李红欢
钱凌霄
杜冬冬
张奇文
李庆辉
马勋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018
2
下载PDF
职称材料
2
单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达
李红欢
马勋
钱凌霄
李庆辉
刘扬扬
《生物技术》
CAS
2019
4
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