麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮诱导HepG2细胞凋亡及抗H22荷瘤小鼠肿瘤作用

采用硅胶柱层析法从多脂鳞伞(Pholiota adiposa)子实体中分离纯化出化合物F1-3,并通过电子轰击质谱及核磁方法鉴定其化学结构,确定该化合物为麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(ETO)。应用CCK8法测定ETO对HepG2、MCF7、He La及A549细胞增殖抑制率。在H22荷瘤小鼠体内进行ETO抗肿瘤实验,将小鼠随机分为模型组、阳性组(环磷酰胺CTX,0.1×10^(-3) mmol·kg^(-1))及ETO组(低、中、高剂量分别为0.025、0.05、0.1 mmol·kg^(-1)),计算脏器指数和抑瘤率;采用ELISA法测定小鼠血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-6和VEGF含量,采用HE染色法观察肿瘤组织细胞排序、细胞完整度和细胞核数量,采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡程度,采用免疫组化法检测VEGF、Bcl-2和BAX蛋白表达水平。结果表明ETO对Hep G2、MCF-7和He La细胞增殖具有抑制作用,100μg·m L^(-1)ETO对HepG2细胞的抑制率高达91.04%;在H22荷瘤小鼠体内实验中,ETO高剂量组抑瘤率达72.06%,且对小鼠胸腺、脾脏指数具有明显恢复作用,表现出抑制肿瘤生长的作用;免疫组化实验表明模型组小鼠肿瘤组织细胞排列整齐紧密,生长状态良好,凋亡率较低;ETO组小鼠肿瘤组织细胞出现不同程度的变形、破裂及模糊不清和大面积凋亡现象;与模型组相比,ETO可提高小鼠血清中IFN-γ、IL-2及IL-6含量,降低VEGF含量,通过降低VEGF、Bcl-2及升高BAX蛋白表达水平表现出较好的抗肿瘤作用。

(22E,24R)-3α-5-环-5α-麦角甾-7,22-二烯-6-酮的合成方法改进

改进了(22E,24R) 3α 5 环 5α 麦角甾 7,22 二烯 6 酮的合成方法,使之更加有利于工业化的条件.

转化植物甾醇产22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)工程菌株的构建及发酵培养基优化

22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)作为一种重要的甾体药物中间体,是合成很多皮脂类药物的原材料。通过在分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum DSM 1381)体内过表达3-甾酮-Δ^(1)脱氢酶(KstD)基因,Mycobacterium neoaurum DSM 1381Z菌株发酵液中HPD的产量由71%提高到84%。在单因素选择的基础上,以产物HPD的产量作为衡量指标,利用响应面方法优化发酵培养基,建立各个因素之间变化的二次回归方程。结果表明,最合适的发酵培养基组成条件是玉米浆9 g/L、硝酸钠1.8 g/L、葡萄糖6 g/L、磷酸氢二钾2 g/L。此条件下5 g/L的植物甾醇,HPD的产量可达3.73 g/L,HPD的产量比原始菌株提高了大约2.7倍,具备潜在的工业化应用价值。

胆甾-4-烯-3β,6β-二醇双琥珀酸单酯双乙醇胺盐的体内抗癌活性及对血象的影响

目的考察胆甾4烯3β,6β二醇双琥珀酸单酯双乙醇胺盐(EBCD)的体内抗癌活性、急性毒性及对小鼠末梢血象、骨髓有核细胞总数的影响。方法体内抗癌活性实验按《抗肿瘤药药效学技术要求》的规定进行。连续灌服EBCD各剂量7 d,取给药前后尾血计数末梢血象,取给药后骨髓计数骨髓有核细胞总数,最后统计。急性毒性实验按常规方法进行。结果灌服EBCD200 mg.kg-1以上对小鼠S180(肉瘤)体内抗癌活性有显著意义。灌服EBCD 200、244、280 mg.kg-1时对小鼠末梢血红细胞、白细胞及其分类计数、股骨骨髓有核细胞总数无显著影响,急性毒性LD50为1 047 mg.kg-1。结论EBCD具有一定的抗癌活性,其骨髓抑制作用可能较弱。

薄层扫描法测定龟甲中胆甾4,6-二烯-3醇的含量

目的建立测定龟甲中胆甾4,6-二烯-3醇含量的薄层扫描法.方法采用双波长反射法对龟甲样品进行线性扫描,检测波长λs＝450 nm,参比波长λr＝640 nm.结果胆甾4,6-二烯-3醇的线性范围为0.2～4.5 μg·g-1 (r＝0.999 94),平均回收率为96.5%,RSD＝2.6%(n＝6).结论该法能有效消除龟甲中其他成分对含量测定的干扰,简便、准确、重现性好.

24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6α-二醇的结构表征

对采用硼氢化钾 -乙醇还原 4 烯 3,6 二酮类型的甾酮化合物所获得产物的结构进行了分析 ,提出了与文献不同的观点 .并通过IR ,1HNMR ,13 CNMR等谱图数据对 2 4 亚甲基胆甾 4 烯 3β ,6α

24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6β-二醇的合成

从豆甾醇出发,先合成了胆甾＿5＿烯＿24＿酮＿3β＿乙酸酯(2);再用过甲酸将2的5,6位双键氧化为环氧化物,后者在碱性条件下立体专一地开环得胆甾＿3β,5α,6β＿三羟基＿24＿酮(3),用醋酐将化合物3的C3＿βOH和C6＿βOH乙酰化保护后用亚硫酰氯脱水得胆甾＿4＿烯＿24＿酮基＿3β,6β＿二乙酸酯(4),4在碱性条件下脱去乙酰基得胆甾＿4＿烯＿3β,6β＿二羟基＿24＿酮(5);化合物5通过Wittig反应将C＿24羰基亚甲基化得到目标化合物24＿亚甲基胆甾＿4＿烯＿3β,6β＿二醇1,总产率为26%。合成化合物1的光谱数据与分离得到的天然物完全一致。

24-亚甲基胆甾-5-烯-3β,19-二醇的合成

从豆甾醇出发 ,通过 1 0步反应 ,合成得到具有显著细胞毒活性的 2 4-亚甲基胆甾 -5 -烯 -3β,1 9-二醇( 1 ) ,总产率为 1 6% .目标产物 1的熔点、 [α]值和波谱数据与天然产物一致 .化合物 1的合成是首次报道 ,它对人体鼻咽癌 ( CN2 )和胃癌 ( Mgc80 3 )细胞有显著抑制活性 .

孕甾-16-烯-3S，20S-二醇二乙酸酯的高效合成及其钯催化反应的再研究

提供了一种将剑麻皂甙元降解产物孕甾三醇转化为孕甾-16-烯-3S,20S-二醇二乙酸酯(Ⅱ)的高效合成方法,并重新考察了其钯催化反应。研究发现亲核取代反应和消除反应互相竞争,在醋酸钯催化下,C-20亲核取代产物Ⅲ为主产物,而在四(三苯基膦)合钯催化下,则主要生成C-20消除产物(Ⅴ)。这些结果不仅为甾体药物和生物活性天然甾体化合物合成提供了新的合成中间体,也为进一步合理利用剑麻皂甙元资源提供了新思路。

豆甾-22-烯-3β,6β-硫酸酯钠盐的合成

以豆甾醇为原料,通过PCC氧化生成豆甾-4,22-二烯-3,6-二酮,然后在NiCl2存在下用NaBH4还原得到豆甾-22-烯-3β,6β-二醇,接着经过三乙胺-三氧化硫配合物酯化和强酸性丙烯酸型阳离子交换树脂进行钠离子交换,最后得到标题化合物。

(22E,24S)-2α,3α-二羟基-5α-豆甾烷-22-烯-6-酮的环氧化及其立体异构体的分离

用过氧乙酸把(22E,24S)-2α,3α-二羟基-5α-豆甾烷-22-烯-6-酮转化成相应的环氧化物,用液相色谱分离两种立体异构体并用核磁共振数据确定了结构,比较了3种过氧酸的反应性能.

17-溴雄甾-5,16-二烯-3β-醇合成研究

通过对17-溴雄甾-5,16-二烯-3β-醇合成工艺进行摸索,利用去氢表熊酮为起始原料,通过缩合、溴代得到目标产物17-溴雄甾-5,16-二烯-3β-醇,并通过核磁及单晶对目标化合物进行结构确证。

利用薯蓣皂甙元完整骨架形式合成1α,25-二羟基维生素D_3

首次利用薯蓣皂甙元的完整骨架经16步反应以7.6%的总收率合成了骨化三醇(1α,25-二羟基维生素D3)的光化反应前体.3-苄基保护的薯蓣皂甙元经还原开E/F环产生3,16,26-胆甾三醇-3-苄醚(5).除去化合物5C-16羟基后,其C-26羟基经消除和羟基化反应转移到C-25位.目标分子A/B环结构单元通过薯蓣皂甙元A/B环的官能团转化被构筑.按照已知的光化反应,(1S,3R)-胆甾-5,7-二烯-1,3,25-三醇能被转化成为1α,25-二羟基维生素D3.

酞菁亚铁/亚碘酰苯催化3-(1′,3′-二氧戊环)-5(10),9(11)-雌甾二烯-17-α-(1-丙炔)-17-β-醇的选择环氧化

The selective epoxidation of 3,3-(1,2-ethanediyl-bisoxy)-5(10),9(11)-estradiene-17-α-(1-propynyl)-17-β-ol with Fe(Ⅱ)Pc/PhIO was investigated at 25 ℃? atmospheric pressure. With a molar ratio of Fe(Ⅱ)Pc∶compound(I)∶PhIO at 6.25∶50∶120, the conversion reaches 100%. The overall yield of the products 5α, 10α-epoxide(2) and 5β, 10β-epoxide(3)is 60%, and the molar ratio of 2 to 3 is {8.39∶}1. The product 5α, 10α-epoxide is identified by melting point and HPLC.

金点口蘑子实体提取物(22E,24R)-麦角-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1的刺激作用

对39种日本秋田县产蘑菇的提取物诱导小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞的分化活性进行筛选，以期寻找抗骨质疏松的化合物。

16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯与碱的条件可控性反应

为了合理利用甾体皂甙元资源,系统地考察了16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯在不同反应条件下与碱的反应.给出了选择性地分别转化16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇二乙酸酯成为孕甾-16-烯-3S,20S-二醇二乙酸酯、16R-溴代孕甾-3S,20S-二醇、孕甾-3S,16S,20S-三醇、孕甾-14,16-二烯-3S-醇乙酸酯和雄甾-16-烯-3S-醇等化合物的可控性反应结果.这些条件可控性反应结果不仅为甾体药物和生物活性天然甾体化合物合成提供了新的合成中间体,也为它们新合成策略和途径的设计提供了机遇.

文冠果果壳中两种甾醇成分的结构研究

目的 首次研究文冠果果壳的化学成分。方法 采用柱色谱和光谱方法。结果 从文冠果果壳中分得 2种甾醇 ,经鉴定为 :(3β,5α,2 0 R,2 4S) -豆甾 - 7,反 - 2 2 -二烯 - 3-醇和 (3β,5α,2 0 R,2 4R) -豆甾 - 7-烯 - 3-醇。结论

过氧麦角甾EP化合物的反相高效液相色谱测定方法的建立

采用国产高效液相色谱柱 YWG C1 8(2 5 2 mm× 4.6 mm,10μm) ,以甲醇∶水 (95∶ 5 )为流动相 ,流速 1.0 ml/ min,室温操作 ,检测波长 2 0 1nm,对粘帚霉属真菌 (F菌 )中产生的新型生物活性化合物 6 ,2 2 -二烯 -3-羟基 - 5 ,8-过氧麦角甾 (简称 EP)进行了分离与测定 ,其线性范围为 0 .0 94～ 3.76 μg(r=0 .9995 ) ,回收率为(96 .8± 0 .0 10 3) % (n=6 ) ,RSD为 1.0 2 %。该方法简便、快捷。

高山猴头菌的化学成分及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

目的研究高山猴头菌Hericium alpestre大米固体发酵物中的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、HP20柱色谱和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等色谱方法进行分离纯化,利用质谱(mass spectrometer,MS)、核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)等方法对单体化合物进行结构鉴定。同时通过pNPG法对化合物进行抑制α-葡萄糖苷酶活性的测试。结果从高山猴头菌固体发酵物中分离得到21个化合物,分别鉴定为枸橼蒽类固醇B(1)、7-氧代-β-谷甾醇(2)、22E-7α-甲氧基-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β-醇(3)、5α,8α-过氧麦角甾醇(4)、4-羟基-17R-甲基甾醇(5)、dankasteronesA(6)、14α-羟基麦角甾-4,7,9,22-四烯-3,6-二酮(7)、5′-epichaxineB(8)、dankasteroneB(9)、灵芝果苷D(10)、5α,6α-环氧-3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-8,22-二烯-7-酮(11)、(3β,5α,6β,22E)-6-甲氧基麦角甾-7,22-二烯-3,5-二醇(12)、6β-甲氧基麦角甾-7,9(11),22E-三烯-3β,5α-二醇(13)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(14)、3β,5α,9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(15)、4-对羟基苯甲醛(16)、(S)-2-羟基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸(17)、对羟基苯乙醇(18)、1-O-(9Z,12Z-十八碳二烯酰基)甘油(19)、亚油酸甲酯(20)和9,10-二羟基十八烷酸酯(21)。化合物1、3、6、8、10、14、15、17和19具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)分别为1.38、2.61、2.61、6.22、2.28、1.86、1.59、3.15、2.96μmol/L。结论化合物17为新天然产物,化合物1~3、9~11、13、16~21首次从猴头菌属真菌中分离得到,化合物1、3、6、8、10、14、15、17和19具有潜在的降血糖作用。

羟基胆烷酸类和羟基胆甾烷类化合物的体内抗癌活性研究

目的 考察3β,5α,6β-三羟基胆烷-4-酸甲酯(LS01)、胆甾烷-3β,5α,6β-三醇(LS19)和胆-4-烯-3β,6β-二醇(LS20)的体内抗癌活性和急性毒性.方法 体内抗癌活性实验按<抗肿瘤药药效学技术要求>的规定进行.急性毒性实验按常规方法进行.结果 灌服和腹腔注射LS20对小鼠S180无明显的抑制作用;灌服和腹腔注射LS19与LS01对小鼠S180皆有明显的抑制作用,且LS19较好.灌服和腹腔注射LS01的最大耐受量分别为8000,658 mg·kg-1;灌服LS19的最大耐受量为5 000 mg·kg-1, 腹腔注射LS19的LD50及其95%置信限分别为169 mg·kg-1、152～186 mg·kg-1.结论 LS19和LS01具有一定的体内抗癌活性.