螺旋藻多糖在2215细胞培养中对乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原及HBV-DNA的抑制作用

研究螺旋藻多糖在乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌细胞系 2 2 15细胞培养中对细胞的毒性、对HBe Ag和 HBs Ag分泌的影响及对细胞 HBV-DNA的抑制效果。 3批试验结果均表明 :螺旋藻多糖加入细胞培养12 d对细胞的半数中毒浓度 >4 mg/ml,最大无毒浓度为 1.5± 0 .7mg/ml;抑制细胞分泌 HBe Ag 50 .4 % ;抑制HBs Ag4 2 .7% ;对 HBe Ag和 HBs Ag的半数有效剂量 IC5 0 分别为 2 .62± 0 .2 5mg/ml和 2 .90± 0 .18mg/m l,治疗指数分别为 >1.53和 >1.3 8,对 HBV-DNA亦有一定抑制。说明螺旋藻多糖在 2 2 15细胞中无毒浓度可抑制HBe Ag、HBs Ag及 HBV-DNA。

白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响

目的研究白背叶提取物WF对乙肝病毒的抑制作用。方法接种2215细胞24 h后,加入不同浓度的白背叶提取物WF培养8 d,以细胞形态学的变化为指标评价WF对2215细胞的毒性。收集最大无毒浓度下的培养液,酶联免疫法(ELISA)检测培养液中HBsAg和HBeAg水平。结果在最大无毒浓度下,WF对2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌有明显抑制作用。WF抑制HBsAg的半数有效量(IC50)为8.61μg/ml;抑制HBeAg的IC50为20.87μg/ml。结论WF可明显抑制2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌,具有显著的抗乙肝病毒作用。

蛇黄肝炎合剂对2215细胞分泌HBsAg及HBeAg的抑制作用

目的:观察蛇黄肝炎合剂在乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系2215细胞培养中,对细胞分泌的表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)的抑制作用。方法:接种2215细胞24h后,加入不同浓度的药物培养5天,观察药物对细胞的毒性。在无毒质量浓度下,将药物加入2215细胞培养5天,测定培养液中HBsAg和HBeAg水平。结果:蛇黄肝炎合剂在1∶16倍稀释时对细胞的破坏率为63.49%,1∶32倍稀释浓度时对细胞破坏率<50%,在无毒浓度1∶32倍稀释下能抑制细胞分泌HBsAg达64.83%,抑制细胞分泌HBeAg达86.1%。结论:蛇黄肝炎合剂对2215细胞分泌HBsAg和HBeAg具有明显的抑制作用。

芹灵冲剂在2215细胞培养内对HBsAg,HBeAg的抑制作用

目的 在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因的人肝癌细胞系（ＨｅｐＧ２的２２１５细胞培养中，观察芹灵冲剂（Ｑｉｎｌｉｎｇ Ｃｈｏｎｇｌｉ，ＱＬ）对细胞的毒性和对乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡＧ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的抑制效果。方法 （１）２２１５细胞培养。将配制（１×１０＾５个／ｍＬ）接种细胞培养板，９６孔板每孔０．１２ｍＬ，２４孔板每孔１ｍＬ，３７℃细胞毒笥试验：ＱＬ１２ｇ／Ｌ用２液２倍稀释成６个浓度，

水芹乙酸乙酯提取物在2215细胞培养内对乙型肝炎病毒表面抗原和E抗原的抑制作用

目的：观察水芹乙酸乙酯提取物（简称水芹提取物）在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因转染的人肝癌细胞系（ＨｅｐＧ２）２２１５细胞培养中，对细胞的毒性及对ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的抑制效果。方法：水芹提取物用培养液稀释成２０００、１０００、５００、２５０、１２５μｇ·ｍｌ－１浓度，分别加入２２１５细胞内培养１２ｄ，观察药物对细胞的毒性。在无毒浓度下的水芹提取物，以培养液稀释１０００、５００、２５０μｇ·ｍｌ－１３浓度，分别加入２２１５细胞内培养，于第６、９ｄ收集的培养液，用固相放射免疫法测定ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ，γ－计数器测定每孔药液ｃｐｍ值。结果：对细胞的半数中毒浓度（ＴＣ５０）平均为２２８４．７３±１２７．３５μｇ·ｍｌ－１，最大无毒浓度为１０００μｇ·ｍｌ－１。大、中剂量（１０００、５００μｇ·ｍｌ－１）对２２１５细胞分泌的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的活性于试验的第６、９ｄ均有明显的抑制作用（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１），并有一定转阴作用。结论：水芹提取物在２２１５细胞中培养６～９ｄ，最大无毒浓度可明显抑制ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ的分泌。

水芹提取物对HBV-DNA克隆转染2215人肝细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的 观察水芹提取物在乙型肝炎病毒 (HBV)基因转染的人肝癌细胞系 2 2 15细胞培养中 ,对细胞的毒性及其分泌的表面抗原 (HBsAg)和e抗原 (HBeAg)的抑制作用。方法 (1)药物对细胞的毒性实验 ,在接种 2 2 15细胞后 2 4h ,加 2倍稀释的 6个稀释度药液 12 .0 0、8.0 0、4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-1,4d换一次药液 ,维持 12d ,用显微镜观察细胞病变 ;(2 )药效学实验 ,在无毒浓度 (4.0 0mg·ml-1)下 ,以 2倍稀释药液稀释为 4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-14个浓度 ,37℃ 5 %CO2 培养 ,每 4d收取培养液 ,换原浓度药液培养 ,并于第 12d时收集培养液 ,同时测定HBsAg和HBeAg。结果 (1)细胞毒实验结果表明 ,水芹提取物对细胞的半数细胞毒浓度 (TC50 )为 8.6 6 2± 0 .2 9mg·ml-1,最大无毒浓度 (TC0 )为 4.0 0mg·ml-1。 (2 )药效学试验 ,在最大无毒浓度4.0 0mg·ml-1对细胞分泌的HBsAg抑制率为 (6 9.1± 6 .6 ) % ,半数有效剂量 (IC50 )为 2 .15mg·ml-1;对细胞分泌的HBeAg的抑制率为 (78.9± 1.2 ) % ,IC50 为 1.0 4mg·ml-1。与细胞对照组比较均有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 水芹提取物在 2 2 15细胞中培养 12d ,无毒浓度对 2 2

应用2215细胞对四种消毒剂进行抗乙肝病毒效果的比较

应用2215细胞对临床四种消毒剂进行了抗乙肝病毒效果的比较,结果表明:“88”洗消净(50mg/L)的效果最佳,其次是“84”消毒液(100mg/L),再次是清洗消毒剂(100mg/L)。2215细胞可以做为评价抗乙肝病毒消毒剂效果的试验模型。

苦玄参不同提取部位抑制2215细胞分泌HBeAg和HBsAg的实验研究

目的:观察苦玄参不同提取部位的含药血清对2215细胞分泌HBeAg和HBsAg的抑制作用。方法:将含药血清作用于2215细胞,然后用酶联免疫法测定HBsAg和HBeAg的水平。结果:苦玄参各提取部位对HBeAg有明显的抑制作用,但没有明显的量效关系。其中乙醇总提取部位、水提取部位和正丁醇提取部位对HBeAg的抑制效果比乙酸乙酯提取部位好,抑制率最高可达80%以上(P<0.05);苦玄参各提取部位对HBsAg也有一定的抑制作用,不同提取部位的抑制作用相差不大。结论:苦玄参不同提取部位的含药血清能抑制2215细胞分泌HBeAg和HBsAg,其中极性较大的化合物对HBeAg的抑制作用较强。

应用2215细胞研究中药抗乙肝病毒的进展

目的应用2215细胞作为药物体外筛选模型目前已发展到比较成熟的阶段,按照现有实验对不同药物处理方法分类,本文归纳总结中草药、中药提取物、中成药以及含药血清等应用2215细胞进行抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)的实验研究现状,为中药抗乙肝病毒的研究和开发提供了参考。

大蒜多糖体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的:观察比较大蒜多糖A、B、C对乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系2215细胞分泌HBsAg、HBeAg的影响及其细胞毒性。方法:在2215细胞接种24h后加入大蒜多糖A、B、C,12天后收集细胞培养上清,以ELISA法检测HBeAg与HbsAg,并用MTT染色法观察药物的细胞毒性。结果:大蒜多糖A、B、C对2215细胞半数毒性浓度分别为110.53mg/ml、108.65mg/ml、16.00mg/ml;可剂量依赖性抑制HBsAg的分泌,其半数抑制浓度分别为9.31mg/ml、21.30mg/ml和1.31mg/ml,治疗指数分别为11.87、5.10和12.21,对HBeAg的分泌则均无明显抑制作用。结论:大蒜多糖A、B、C在培养2215细胞中可抑制HBsAg的分泌。

三种叶下珠属植物在体外细胞培养中抗HBV作用的初步研究

对３种叶下珠属植物的水提物在２２１５细胞培养中抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用进行了初步观察。结果显示：３种药物在６．２５ｇ／Ｌ加药后第５天，苦味叶下珠对２２１５细胞ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ分泌的抑制率分别为５７．７９％和５５．００％，黄珠子草为６４．６２％和６１．５１％，新发现的珠子草延益亚种为４４．３２％和２．９８％。提示苦味叶下珠和黄珠子草在体外细胞培养第５天中对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的分泌均有较好的抑制作用。

扯根菜及其系统提取物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

目的:通过体外实验,探讨扯根菜及其系统提取物抗乙肝病毒的作用。方法:将中药扯根菜及其系统提取物作用于HBVDNA转染细胞系2215细胞,通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg的变化来评价扯根菜及其系统提取物抗乙肝病毒的效果及其可能的药理活性部位。结果:当水提取物浓度为264μg/ml、直接水提取物浓度为57μg/ml时,对2215细胞分泌HBeAg的抑制率分别为54.79％及54.09％,治疗指数(TI)>2。结论:扯根菜水提取物和直接水提取物达到一定浓度时,在体外有一定的抗乙肝病毒作用。

田基黄不同提取物含药血清体外抗乙肝和抗肝癌作用的实验研究

目的观察田基黄不同提取物的含药血清体外抗乙肝和抗肝癌的作用。方法采用酶链免疫法,观察田基黄不同提取物的含药血清对2215细胞分泌HBeAg和HBsAg的抑制作用。采用MTT技术,观察田基黄不同提取物的含药血清对肝癌细胞BEL-7404增殖的抑制作用。结果当含药血清浓度为5%时,田基黄乙醇总提取物和正丁醇提取物对HBeAg和HBsAg呈现较好抑制作用,抑制率分别为34.84%和57.95%,以及76.02%和53.15%(P<0.05);当含药血清浓度为20%时,醋酸乙酯提取物对HBeAg和HBsAg呈现较好的抑制作用,抑制率分别为79.79%和57.22%(P<0.05);水提取物3种浓度的含药血清对HBeAg和HBsAg都有较好的抑制作用,抑制率分别达到了70%和30%以上(P<0.05)。田基黄各提取物对肝癌BEL-7404细胞都有一定的抑制作用,该抑制作用呈明显的量效关系,当含药血清浓度为20%时,乙醇总提取物、醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物的抑制率分别为29.74%,53.80%,40.79%和54.24%(P<0.01)。结论田基黄不同提取物含药血清能抑制2215细胞分泌HBeAg和HBsAg,并且能抑制肝癌细胞BEL-7404的增殖。其抗乙肝的有效成分主要分布在田基黄的水提取物中,而抗肝癌的有效成分则均衡分布于各种极性部位。

“911”抗HBV作用的实验研究

目的 :评价药物“911”在 2 2 15细胞培养中对 HBs Ag和 HBe Ag表达的抑制作用。方法 :在 HBV转染的人肝癌 2 2 15细胞加入待检药物培养 ,收取细胞培养液 ,检测上清液中 HBs Ag和 HBe Ag浓度 ,细胞提取物作 HBV- DNA斑点分子杂交。结果 :“911”对 2 2 15细胞的毒性较小 ,TC50 为 4 4 .8m g/ml;对 2 2 15细胞的 HBe Ag有一定的抑制作用 ,且呈剂量反应关系 ,其抑制抗原半数有效浓度为 17.3m g/kg;治疗指数为 3.37。结论 :“911”对 2 2 15细胞内 HBV- DNA有一定的抑制作用 ,呈剂量反应关系 ,对 2 2 15细胞的 HBs Ag有较小抑制作用。

台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒作用研究

为研究叶下珠属植物台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒的作用 ,应用 2 115细胞株及雏鸭乙型肝炎模型 ,对台湾细叶油柑水提取物和醇提取物进行了体内外抗乙肝活性实验。结果 :台湾细叶油柑水提取物和醇提取物对HBsAg分泌均有一定抑制作用 ,但其醇提物对HBeAg的分泌无抑制作用。在体内抗鸭乙肝病毒实验中 ,台湾细叶油柑水提物 10g·kg- 1·d- 1和 5g·kg- 1·d- 1剂量组于给药 5d、给药 10d和停药 3d时有显著体内抑制DHBV -DNA作用 ,而其醇提物则无抑制DHBV -DNA作用。

太白楤木总皂苷体外对乙肝病毒HBsAg、HBeAg的影响

目的观察太白楤木总皂苷体外对乙肝病毒HBsAg和HBeAg的影响。方法以HepG 2215细胞为靶细胞,分别用不同浓度的太白楤木总皂苷和拉米夫定培养液培养,采用ELISA法测定细胞培养上清HBsAg、HBeAg含量,评价太白楤木总皂苷对体外HBV的抑制作用。结果太白楤木总皂苷对体外培养HepG 2215细胞分泌的HBsAg、HBeAg的50%抑制浓度(IC50)分别为0.1、0.09 g/L,治疗指数(therapeutic index TI)分别为6.12、7.51。0.25 g/L拉米夫定组和0.4 g/L太白楤木组在第3、6天对体外培养HepG 2215细胞分泌的HBsAg、HBeAg抑制作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论太白楤木总皂苷具有一定的体外抗HBV作用。

紫红獐牙菜醋酸乙酯部位体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的观察紫红獐牙菜醋酸乙酯部位抗乙型肝炎病毒的作用。方法在对2215细胞最大无毒浓度范围内,将含有不同浓度醋酸乙酯提取物的DMEM培养液加入2215细胞共同培养8天。采用固相放免实验方法,检测药物对2215细胞HBsAg和HBeAg表达的作用。结果供试品对乙型肝炎病毒转染的2215细胞培养液中HBsAg、HBeAg的选择指数(SI)分别为5.13和4.08。结论紫红獐牙菜醋酸乙酯部位在体外有抗HBV的作用。

软肝饮对HBV转染细胞表达功能抑制的实验研究

目的 :观察软肝饮对HBV转染细胞表达功能的影响。方法 :本研究以乙型肝炎病毒 (HBV)转染细胞 (2 2 15细胞系 )作为筛选抗HBV药物的细胞模型 ,观察了纯草药方软肝饮对 2 2 15细胞分泌HBV表面抗原(HBsAg)和HBVe抗原 (HBeAg)的影响 ,并以抗病毒药物无环鸟甘为对照。结果 :软肝饮对 2 2 15细胞无明显毒性作用 ,同时显著抑制HBsAg成分。结论 :提示软肝软在体外有一定的抗病毒作用。

中药单方乙醇提取液抗乙肝病毒的实验研究

目的观察中药单方乙醇提取液在2215细胞的体外培养中，对细胞的毒性和对分泌HBeAg和HBsAg的抑制作用。方法通过药物对2215细胞进行毒性实验，在最佳药物浓度下，测定HBsAg和HBeAg水平。结果根据半数有毒浓度（TC50）；最大无毒浓度（TC0）；抗原抑制百分率；治疗指数（SI）来判断出毒性较低但是对抑制乙肝病毒有效的药物。结论根据实验结果推断出毒性较低但是对抑制乙肝病毒有效的药物如秦艽．地骨皮等。