西江24-3-A22大位移水平井钻井技术研究

西江24-3-A22井采用的是康菲南海组织的大位移水平井钻井技术,借鉴了北海英国石油公司大位移水平井的成功经验,结合西江油田自身的特点,形成并发展了适合于西江油田的大位移水平井钻井技术,同时也为整个南海的后续开发大位移水平井积累了宝贵的经验。研究和总结了西江24-3-A22大位移水平井钻井关键技术,为后续的大位移井作业提供了经验和参考,也为我国海上和陆上油田成功应用大位移水平井钻井技术提供了必要的依据和借鉴。

7-氨基-6-芳基偶氮-5-羟基吡唑[1,5-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯的合成

以氰乙酸乙酯和原甲酸三乙酯为原料,经过缩合、肼解、关环、重氮化及偶合等反应合成了13个新型的嘌呤类似物7-氨基-6-芳基偶氮-5-羟基吡唑[1,5-a]并嘧啶-3-甲酸乙酯(5a-5m)。通过IR、~1H NMR、MS和元素分析确定了所得化合物的结构。

下调lncRNA ZEB1-AS1靶向促进miR-133a-3p表达抑制口腔鳞癌细胞SCC15侵袭和迁移的分子机制

目的 研究下调长链非编码RNA(lncRNA)锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链(ZEB1-AS)1靶向促进miR-133a-3p体外调控口腔鳞癌细胞SCC15迁移及侵袭的分子机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(Rt-PCR)分析并检测不同的口腔鳞癌细胞HN-6、SCC15、CAL27及正常口腔上皮细胞HOK中ZEB1-AS1表达变化。将口腔鳞癌细胞SCC15分成Control组、sh-NC(转染shRNA control)组、sh-ZEB1-AS1(转染ZEB1-AS1 shRNA)组,利用CCK-8方法分析检测细胞的增殖情况,利用Transwell小室分析并检测细胞的迁移及侵袭能力变化,Western印迹并检测N-钙黏蛋白(cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、E-cadherin的表达情况。利用Starbase生物信息学软件预测ZEB1-AS1靶基因,荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在口腔鳞癌细胞SCC15中将ZEB1-AS1 shRNA、miR-133a-3p inhibitor转染,同样分析并检测各组细胞的增殖水平及迁移、侵袭能力变化和各组细胞内N-cadherin、MMP-2、E-cadherin、MMP-9蛋白的表达情况。结果 口腔鳞癌细胞CAL27、HN-6、SCC15中ZEB1-AS1水平明显高于正常口腔上皮细胞HOK(P<0.05)。口腔鳞癌细胞CAL27、HN-6中ZEB1-AS1水平明显低于口腔鳞癌细胞SCC15(P<0.05)。与Control、sh-NC组比较,sh-ZEB1-AS1组口腔鳞癌细胞SCC15中ZEB1-AS1水平明显降低,增殖能力明显降低,同时细胞的迁移及侵袭能力也明显下降,蛋白MMP-9、N-cadherin、MMP-2的表达水平明显降低,而E-cadherin表达水平明显升高(P<0.05)。下调ZEB1-AS1靶向促进miR-133a-3p表达。miR-133a-3p inhibitor逆转下调ZEB1-AS1对口腔鳞癌细胞SCC15增殖、迁移、侵袭和MMP-2、MMP-9、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达作用。结论 下调lncRNA ZEB1-AS1靶向促进miR-133a-3p抑制口腔鳞癌细胞SCC15增殖、侵袭和迁移。

转化植物甾醇产22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)工程菌株的构建及发酵培养基优化

22-羟基-23,24-双降甾-1,4-二烯-3-酮(HPD)作为一种重要的甾体药物中间体,是合成很多皮脂类药物的原材料。通过在分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum DSM 1381)体内过表达3-甾酮-Δ^(1)脱氢酶(KstD)基因,Mycobacterium neoaurum DSM 1381Z菌株发酵液中HPD的产量由71%提高到84%。在单因素选择的基础上,以产物HPD的产量作为衡量指标,利用响应面方法优化发酵培养基,建立各个因素之间变化的二次回归方程。结果表明,最合适的发酵培养基组成条件是玉米浆9 g/L、硝酸钠1.8 g/L、葡萄糖6 g/L、磷酸氢二钾2 g/L。此条件下5 g/L的植物甾醇,HPD的产量可达3.73 g/L,HPD的产量比原始菌株提高了大约2.7倍,具备潜在的工业化应用价值。

(22E,24S)-2α,3α-二羟基-5α-豆甾烷-22-烯-6-酮的环氧化及其立体异构体的分离

用过氧乙酸把(22E,24S)-2α,3α-二羟基-5α-豆甾烷-22-烯-6-酮转化成相应的环氧化物,用液相色谱分离两种立体异构体并用核磁共振数据确定了结构,比较了3种过氧酸的反应性能.

新型2-甲基-5-羟基-7-氨基-吡唑[1,5-a]并嘧啶衍生物的合成

以3-甲基-5-氨基-吡唑和氰乙酸乙酯为原料,合成了2-甲基-5-羟基-7-氨基-吡唑[1,5-a]并嘧啶(2);2与芳胺的重氮盐溶液反应,合成了7个新型的2-甲基-5-羟基-6-芳基偶氮-7-亚氨基-吡唑[1,5-a]并嘧啶衍生物,收率87%~93%,其结构经~1H NMR,IR和ESI-MS表征。

2-羟基-5,7-二甲基-1,2,4-三唑[1,5-a]嘧啶的合成

2-羟基-5,7-二甲基-1,2,4-三唑[1,5-a]嘧啶(TPO)是三唑并嘧啶类衍生物的重要中间体,以氨基脲盐酸盐为起始原料,经环化、硝化、还原及并环得到.氨基脲盐酸盐先与甲酸成环,制得中间1,2,4-三唑-5-酮(TO),产率86.5%;用发烟硝酸硝化得3-硝-基1,2,4-三唑-5-酮(NTO),产率90.1%;雷尼镍催化下加氢还原得3-氨基-5-羟基-1,2,4-三唑(ATO),产率88.0%;最后与乙酰丙酮环合制得标题化合物TPO,产率86.0%.该方法原料易得、操作简便,总收率较高,达到59.0%.

5-甲基-7-羟基-2—苄硫基-1,2,4-三唑[1,5-a]嘧啶的合成

以5-氨基-3-巯基-1,2,4-三唑、氯化苄和乙酰乙酸乙酯为原料,合成了5-甲基-7-羟基-2-苄硫基-1,2,4-三唑[1,5-a]嘧啶,并进行了一步法改进,同时优化了其反应条件,使目标产物的产率达到了56%以上。产品经熔点测定、核磁共振谱确认。

咪唑并[1,2-a]吡啶化合物的简便合成

以2-氨基-3-羟基吡啶为原料,经过一锅两步反应合成了12个咪唑并[1,2-a]吡啶类化合物。2-氨基-3-羟基吡啶与N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛进行反应,几乎定量得到（E）-N＇-（3-羟基吡啶-2-基）-N,N-二甲基甲脒中间体,然后在Na HCO3作用下,于一锅中和活泼亲电化合物（溴乙酸乙酯、溴乙腈和2-溴代苯乙酮）发生合成咪唑环的反应及羟基上的取代反应,以50.3%~85.2%的总收率得到目标产物。该一锅两步方法具有原料易得、反应时间短、操作简便、收率高等优点。

高山猴头菌的化学成分及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

目的研究高山猴头菌Hericium alpestre大米固体发酵物中的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、HP20柱色谱和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等色谱方法进行分离纯化,利用质谱(mass spectrometer,MS)、核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)等方法对单体化合物进行结构鉴定。同时通过pNPG法对化合物进行抑制α-葡萄糖苷酶活性的测试。结果从高山猴头菌固体发酵物中分离得到21个化合物,分别鉴定为枸橼蒽类固醇B(1)、7-氧代-β-谷甾醇(2)、22E-7α-甲氧基-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β-醇(3)、5α,8α-过氧麦角甾醇(4)、4-羟基-17R-甲基甾醇(5)、dankasteronesA(6)、14α-羟基麦角甾-4,7,9,22-四烯-3,6-二酮(7)、5′-epichaxineB(8)、dankasteroneB(9)、灵芝果苷D(10)、5α,6α-环氧-3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-8,22-二烯-7-酮(11)、(3β,5α,6β,22E)-6-甲氧基麦角甾-7,22-二烯-3,5-二醇(12)、6β-甲氧基麦角甾-7,9(11),22E-三烯-3β,5α-二醇(13)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(14)、3β,5α,9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(15)、4-对羟基苯甲醛(16)、(S)-2-羟基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸(17)、对羟基苯乙醇(18)、1-O-(9Z,12Z-十八碳二烯酰基)甘油(19)、亚油酸甲酯(20)和9,10-二羟基十八烷酸酯(21)。化合物1、3、6、8、10、14、15、17和19具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)分别为1.38、2.61、2.61、6.22、2.28、1.86、1.59、3.15、2.96μmol/L。结论化合物17为新天然产物,化合物1~3、9~11、13、16~21首次从猴头菌属真菌中分离得到,化合物1、3、6、8、10、14、15、17和19具有潜在的降血糖作用。

变绿红菇化学成分研究

目的研究变绿红菇Russula virescens子实体化学成分。方法变绿红菇子实体用95%乙醇浸泡提取浓缩,经硅胶、RP-8、Sephadex LH-20等多种材料进行分离,波谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离鉴定了8个化合物,分别为铁屎米酮(canthin-6-one,Ⅰ)、3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯(Ⅱ)、3β-羟基-麦角甾-5,7-22-三烯(Ⅲ)、3β,5α,6β-三羟基-麦角甾-7,22-二烯(Ⅳ)、硫代乙酸酐(Ⅴ)、顺丁烯二酸(Ⅵ)、D-阿洛醇(Ⅶ)、腺嘌呤核苷(Ⅷ)。结论所有化合物均为首次从该菌中分到,其中化合物为首次从该属中分到。

马鞭草化学成分的研究

目的 寻找马鞭草中药用活性成分。方法 分离鉴定马鞭草全草的乙醇提取物中的化合物。结果 从马鞭草的乙醇提取物中得到 3个化合物 ,经过光谱分析分别被鉴定为熊果酸 ( )、3α,2 4 -二羟基齐墩果酸 ( )、7α,2 2 S-二羟基谷甾醇 ( )。结论 化合物

维吾尔药阿育魏实化学成分的分离与鉴定

目的研究新疆维吾尔药材阿育魏实中的化学成分。方法采用硅胶柱色谱及Sephadex LH-20分离化合物,运用现代波谱技术确定所得化合物结构。结果从阿育魏实乙醇提取物分离得到5个化合物,分别鉴定为4-羟基薄荷-1-烯-7-酸(4-hydroxymenth-1-en-7-oic acid,1)、E-3-(3,4-二羟基苯基)-丙烯酸3-(3,4-二羟基苯基)丙酯[E-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propyl 3-(3,4-dihydroxyphe-nyl)acrylate,2]、6-羟基麝香草酚6-O-β-D-葡萄糖苷(6-hydroxythymol 6-O-β-D-glucopyranoside,3)、麝香草氢醌6-O-6'-乙酰基-β-D-葡萄糖苷(thymohydroquinone 6-O-6'-acetyl-β-D-glucopyranoside,4),对羟基桂皮酸(4-hydroxycinnamic acid,5)。结论化合物1、2为新天然产物,化合物4首次从伞形科植物分离得到。

海绵Hyatella.Sp中的两个甾体化合物

从中国南海湛江硇洲岛海绵Hyatella.Sp分离得到2种单体甾醇,经1H NMR、13CNMR、MS等现代光谱手段鉴定它们的结构分别为:3β-羟基胆甾-5,22-二烯-7-酮(1)和3β-羟基胆甾-5-烯-7酮(2)。

Isodihydroauroglaucin诱导的细胞凋亡可能与其诱导DNA损伤有关

目的对化合物2-(3E,5E-庚二烯基)-3,6-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(isodihydroau-roglaucin)的抗癌活性进行研究。方法利用细胞毒实验测定isodihydroauroglaucin对人宫颈癌细胞(HeLa)的生长抑制作用;通过DNA含量分析和Annexin V-FITC/PI双染实验检测isodihydroauro-glaucin诱导的HeLa细胞死亡;利用单细胞凝胶电泳方法检测isodihydroauroglaucin对DNA的损伤作用。结果 Isodihydroauroglaucin对HeLa细胞的生长具有抑制作用,其IC50值为170μmol.L-1;DNA含量分析和Annexin V-FITC/PI双染实验表明isodihydroauroglaucin诱导HeLa细胞凋亡;isodi-hydroauroglaucin对DNA有损伤作用。结论 Isodihydroauroglaucin可能通过诱导DNA损伤诱导He-La细胞凋亡。

1,4,5-三磷酸肌醇3激酶A调控脑胶质瘤细胞增殖、迁移和上皮间质化

目的探讨1,4,5-三磷酸肌醇3激酶A(ITPKA)在脑胶质瘤细胞的表达和功能。方法利用实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)比较SVGP12、U118和U87细胞系(购自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所)ITPKA mRNA和蛋白表达水平。将U87细胞分为对照组、对照短发卡RNA(shRNA)组和sh-ITPKA组,噻唑蓝法检测转染细胞培养24、48、72、96 h后细胞活性,平板克隆和小室迁移(Transwell)法检测克隆形成能力与细胞迁移能力,Western blot检测ITPKA、波形蛋白、N-钙黏蛋白和E-钙黏蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析或双因素方差分析。结果U118和U87细胞中ITPKA mRNA和蛋白表达水平明显高于SVGP12细胞(mRNA水平:2.81±0.40、3.92±0.19比1.06±0.06,F=94.48,P<0.01;蛋白水平:0.57±0.05、0.66±0.03比0.20±0.01,F=161.30,P<0.01)。培养24、48、72、96 h后,sh-ITPKA组细胞活性明显低于对照组和对照shRNA组(24 h:0.14±0.01比0.19±0.01、0.20±0.02,P<0.01;48 h:0.20±0.01比0.30±0.01、0.30±0.02,P<0.01;72 h:0.26±0.01比0.37±0.01、0.38±0.01,P<0.01;96 h:0.29±0.01比0.45±0.01、0.45±0.01,F_(交互)=17.22,F_(时间)=713.00,F_(分组)=662.60,P<0.01)。sh-ITPKA组细胞细胞迁移数目低于对照组和对照shRNA组(25.40±2.51比41.20±4.66、42.00±5.24,F=23.69,P<0.01)。同时,sh-ITPKA组细胞克隆形成数目明显低于对照组和对照shRNA组(120.60±11.41比215.00±18.73、221.40±14.83,F=68.15,P<0.01)。sh-ITPKA组细胞ITPKA、波形蛋白、N-钙粘蛋白表达水平低于对照组和对照shRNA组,而E-钙粘蛋白表达则高于对照组和对照shRNA组(ITPKA:0.11±0.02比0.70±0.02、0.68±0.03,F=637.00,P<0.01;波形蛋白:1.06±0.07比1.65±0.07、1.60±0.08,F=58.31,P<0.01;N-钙粘蛋白:0.88±0.04比1.15±0.07、1.20±0.03,F=31.56,P<0.01;E-钙粘蛋白:0.85±0.03比0.46±0.04、0.43±0.04,F=116.80,P<0.01)。结论ITPKA在胶质瘤细胞中表达升高,敲低ITPKA表达则抑制胶质瘤细胞恶性行为。

雷公藤三萜成分的研究

从雷公藤中分离纯化获得 6个三萜化合物 ,通过光谱分析分别鉴定为雷公藤三萜酸 A ,雷公藤三萜酸 B ,2 2β-羟基 - 3-氧代 - 12 -齐墩果烯 - 2 9-羧酸 ,雷公藤醇 A ,直楔草酸 ,雷公藤三萜酸 C .其中 2 2β-羟基 - 3-氧代 - 12 -齐墩果烯 - 2

西沙仙掌藻Halimeda X ishaensis的次级代谢产物

从采自西沙永兴岛的西沙仙掌藻Halimeda Xishaensis样品中分离鉴定了4个单羟基甾醇,5-烯-3α-胆甾醇(1),5-烯-3β-麦角甾醇(2),豆甾醇(3),β-谷甾醇(4)和4个单体化合物,1-正二十三碳酸甘油酯(5),豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(6),N-(1-羟甲基-2-羟基-3E-十五碳烯)-正二十七酰胺(7)和1个丁四醇(8)。

蜈蚣草全草石油醚部位的化学成分研究

目的:研究蜈蚣草全草石油醚部位的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、重结晶和薄层色谱法对蜈蚣草全草石油醚部位的化学成分进行分离纯化,根据理化性质、氢谱和碳谱数据鉴定化合物结构。结果:从蜈蚣草全草石油醚部位分离、鉴定得到11个化合物,分别为(2R)-acetyl pterosin B(Ⅰ)、十六烷酸(Ⅱ)、何帕-22(29)-烯(Ⅲ)、表木栓醇(Ⅳ)、羽扇豆酮(Ⅴ)、齐墩果-18-烯-3-酮(Ⅵ)、豆甾醇(Ⅶ)、β-谷甾醇(Ⅷ)、22-羟基何帕烷(Ⅸ)、麦角甾醇(Ⅹ)、β-谷甾醇乙酸酯(Ⅺ)。结论:化合物Ⅰ～Ⅶ和Ⅸ～Ⅺ为首次从该植物中分离得到,可为深入研究蜈蚣草的生物活性药效物质基础、丰富其化学成分研究资料提供理论依据。

人参茎叶总皂苷碱水解产物中的新人参皂苷20(R)-人参皂苷Rh(19)

目的研究人参Panax ginseng茎叶总皂苷碱水解产物的化学成分。方法采用硅胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法进行分离、纯化,通过NMR、MS等谱学方法进行化学结构鉴定。结果从人参茎叶总皂苷的碱水解产物中共分离鉴定了30个化合物,报道其中的1个新化合物和27个已知化合物,分别为20（S）-原人参二醇（1）、20（R）-原人参二醇（2）、达玛-20（21）,24-二烯-3β,6α,12β-三醇（3）、达玛-20（22）E,24-二烯-3β,6α,12β-三醇（4）、20（S）-原人参三醇（5）、20（R）-原人参三醇（6）、20（S）-人参皂苷Rh_2（7）、20（R）-人参皂苷Rh_2（8）、人参皂苷Rh_16（9）、异人参皂苷Rh_3（10）、20（S）-达玛-3β,6α,12β,20,25-五醇（11）、20（R）-达玛-3β,6α,12β,20,25-五醇（12）、人参皂苷Rk_3（13）、20（S）-人参皂苷Rh_1（14）、20（R）-人参皂苷Rh_1（15）、人参皂苷F_1（16）、人参皂苷Rh_19（17）、20（R）-人参皂苷Rh_19（18）、达玛-20（22）E-烯-3β,6α,12β,25-四醇（19）、三七皂苷T_2（20）、人参皂苷Rg_6（21）、20（22）E-人参皂苷F_4（22）、人参皂苷Rk_1（23）、20（S）-人参皂苷Rg_3（24）、20（R）-人参皂苷Rg_3（25）、20（S）-人参皂苷Rg_2（26）、20（R）-人参皂苷Rg_2（27）和3β,6α,12β,25-四羟基-达玛-20（22）E-烯-6-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（28）。结论化合物18为1个新的化合物;3、4、11、12和19是稀有达玛烷型三萜;7~10、13~18和20~28是稀有人参皂苷。