22L毒株感染雌性BALB/c小鼠的生物学特征检测

"唯蛋白"假说指出,朊蛋白PrPC的错误折叠体PrPSc是朊病毒病的重要的感染因子。本文中,用22LScraipe毒株感染BALB/c小鼠,在脑内注射后,130d左右小鼠出现明显的神经症状,150d陆续出现濒死症状。对濒死期患病小鼠进行检测,表现出典型的朊病毒病的病理特征:抗PK酶消化,神经纤维网内出现空泡结构,神经元消失,朊蛋白聚集,星形胶质细胞增多等。

22L毒株朊蛋白错误折叠循环扩增方法的建立

参考Saborio和Soto创建的名为蛋白质错误折叠循环扩增(protein misfolding cyclic amplification,PMCA)的方法建立一种22L毒株系朊蛋白错误折叠循环扩增方法,以便研究22L毒株系异常朊蛋白(scrapie PrP,PrPSc)的合成机制。在阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)存在的条件下,这种方法可以通过超声降解从而重复扩增产物,并在仓鼠脑匀浆中快速有效的模仿体内朊病毒PrPSc的复制,因此可以在几个小时内高浓度扩增PrPSc。已有试验结果发现,PrPSc体外转化率在使用粗提的脑组织匀浆时比使用纯化重组PrP更高,这个发现暗示着高效率的PrPSc转化可能还需要探索其他未知的宿主因素。研究结果表明,建立的这种改良的PMCA技术可用于研究PrPSc合成的生物化学机制,以此来进行诊断与治疗方法的研究。