23-羟基桦木酸体外抑制血管生成的实验研究

目的探讨23-羟基桦木酸(23-HBA)对体外血管生成的抑制作用。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)法测定23-HBA对人毛细血管内皮细胞(HMEC)增殖、迁移和小管形成的影响;用免疫组化染色法检测HMEC中CD31表达的变化。结果23-HBA体外可明显抑制HMEC增殖(IC50为40.44mg/L)、迁移和小管的形成,且呈明显的剂量依赖性。23-HBA的浓度为10mg/L时,HMEC中CD31的表达明显降低。结论23-HBA体外具有明显抑制血管生成的作用,有可能成为有效的血管生成抑制剂。

不同移植方式对小鼠恶性黑色素移植瘤的生长及其血管生成的影响

目的研究不同移植方式(玻璃体移植、足垫皮下移植)对小鼠恶性黑色素移植瘤的生长及其血管生成的影响,并初步探讨炎症因子对此两种不同移植瘤的作用机理。方法 40只C57BL-6J小鼠编号后按照随机数字表法分成两组:玻璃体组20只、足垫皮下组20只。分别接种黑色素瘤B16F10细胞于左眼玻璃体和右足垫皮下,然后对肿瘤的发生率及瘤体的基本特征进行27 d连续观察;分别于接种后9 d、15 d、21 d、27 d取小鼠血清,ELISA检测血清中IL-17、IL-23、VEGF含量;接种后28 d处死全部小鼠,摘取肿瘤组织称瘤质量,HE染色观察肿瘤病理特征及其肝、肺转移情况。结果两组小鼠肿瘤发生率均为100%。玻璃体组肝、肺转移发生率均显著大于足垫皮下组,差异均有统计学意义(χ2=6.67、6.67,均为P<0.01)。玻璃体组小鼠肿瘤出现时间(8.70±2.27)d早于足垫皮下组(8.95±0.22)d,但两组间差异无统计学意义(t=0.49,P>0.05);27d时玻璃体组小鼠体质量(18.80±2.42)g较足垫皮下组小鼠(20.20±1.44)g减轻更明显,且两组差异有统计学意义(t=2.22,P<0.05);玻璃体组小鼠肿瘤组织质量(3.51±0.58)g高于足垫皮下组(3.18±0.62)g,但两组差异无统计学意义(t=1.74,P>0.05)。接种后随着时间的推移两组小鼠血清中的IL-17、IL-23、VEGF含量均逐渐升高,9 d时玻璃体组血清IL-17、IL-23、VEGF含量均高于足垫皮下组,但差异均无统计学意义(均为P>0.05),15 d、21 d及27 d时足垫皮下组血清IL-17、IL-23、VEGF含量均高于玻璃体组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.001)。结论把肿瘤相关炎症因子作为恶性黑色素瘤免疫治疗的新靶点,全程抗炎疗法将为眼内和皮肤黑色素瘤的治疗提供新的思路,且眼内黑色素瘤的早期治疗中积极运用抗炎药物尤为重要。

驱动蛋白23调控骨肉瘤进展及血管新生

目的:探究驱动蛋白家族成员23(KIF23)在骨肉瘤组织中的表达水平,在骨肉瘤中的调控方式。方法:收集2015年3月至2023年3月期间郑州大学第一附属医院30例骨肉瘤患者手术切除的肿瘤及癌旁组织标本,全部病例均经过病理证实,其中男18例,女12例,年龄(14.0±1.9)岁。利用KIF23特异性抗体检测其在人骨肉瘤组织及癌旁组织中的表达量,并利用KIF23特异的短发卡(shRNA)质粒在成骨肉瘤细胞(U2-OS)及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)中下调KIF23的表达,通过噻唑蓝(MTT),细胞计数试剂盒(CCK-8)及划痕实验检测KIF23对内皮细胞增殖及迁移的影响。内皮细胞体外成管(Tube formation)实验检测对HUVEC体外成管的影响。蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞增殖及迁移相关标志物的表达;定量聚合酶链反应(qPCR)检测相关mRNA的表达;裸鼠成瘤实验检测下调KIF23后裸鼠体内成瘤情况。结果:KIF23的mRNA水平在骨肉瘤组织中较对照组差异有统计学意义(P<0.01);U2-OS细胞中,细胞增殖和细胞迁移在转染组中较对照组差异有统计学意义(P<0.01);HUVEC中,转染组较对照组在细胞增殖和迁移差异有统计学意义(P<0.01);KIF23敲低组较对照组在肿瘤质量差异有统计学意义(P<0.01),体积差异也有统计学意义(P<0.01)。结论:KIF23调控体内外骨肉瘤细胞增殖迁移及内皮细胞增殖迁移,进一步调控肿瘤进展及血管新生过程。