目的建立基于同位素稀释液相色谱串联质谱技术(liquid phase chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的血清25羟维生素D3[25-hydroxy vitamin D3,25(OH)D3]的候选参考测量程序。方法采用同位素标准溶液为内标,液液萃取进行...目的建立基于同位素稀释液相色谱串联质谱技术(liquid phase chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的血清25羟维生素D3[25-hydroxy vitamin D3,25(OH)D3]的候选参考测量程序。方法采用同位素标准溶液为内标,液液萃取进行前处理,正离子电喷雾模式进行监测。参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)C62-A和EP15-A3等文件,对方法的正确度、精密度、线性范围、定量限、检测下限、相对基质效应等进行验证。采用候选参考测量程序和质谱常规程序检测40份临床血清样本,评价两种方法的一致性。结果候选方法的分析时间为15 min,通过色谱的等度洗脱可有效分离同分异构体3-epi-25(OH)D3,特异度好。测定参考实验室室间比对(RELA)样本,偏倚低于1.5%。批内精密度和批间精密度分别为0.75%~2.31%和1.28%~2.01%。定量限和检测下限分别为0.85 ng/ml和1.84 ng/ml。在2.5~220ng/ml浓度范围内线性良好。无相对基质效应和携带污染。质谱常规程序与候选参考程序的相关性较好(r=0.982),但低浓度样本处的偏差超出卫健委临检中心室间质评的允许总误差±25%。结论成功建立了基于LC-MS/MS技术的血清25(OH)D3的候选参考测量程序,分析性能符合要求,可用于临床常规方法的量值溯源。展开更多
文摘目的建立基于同位素稀释液相色谱串联质谱技术(liquid phase chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的血清25羟维生素D3[25-hydroxy vitamin D3,25(OH)D3]的候选参考测量程序。方法采用同位素标准溶液为内标,液液萃取进行前处理,正离子电喷雾模式进行监测。参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)C62-A和EP15-A3等文件,对方法的正确度、精密度、线性范围、定量限、检测下限、相对基质效应等进行验证。采用候选参考测量程序和质谱常规程序检测40份临床血清样本,评价两种方法的一致性。结果候选方法的分析时间为15 min,通过色谱的等度洗脱可有效分离同分异构体3-epi-25(OH)D3,特异度好。测定参考实验室室间比对(RELA)样本,偏倚低于1.5%。批内精密度和批间精密度分别为0.75%~2.31%和1.28%~2.01%。定量限和检测下限分别为0.85 ng/ml和1.84 ng/ml。在2.5~220ng/ml浓度范围内线性良好。无相对基质效应和携带污染。质谱常规程序与候选参考程序的相关性较好(r=0.982),但低浓度样本处的偏差超出卫健委临检中心室间质评的允许总误差±25%。结论成功建立了基于LC-MS/MS技术的血清25(OH)D3的候选参考测量程序,分析性能符合要求,可用于临床常规方法的量值溯源。
文摘目的:对25(OH)D3、甲状旁腺激素(PTH)与慢性心力衰竭心衰(CHF)严重程度的相关性进行系统研究。方法:选取住院CHF患者186例,其中HFpEF 96例,HFmrEF 30例,HFrEF 60例;研究同时选取同期健康人群42例作为对照组,收集一般资料、血清25(OH)D3、PTH、NT-proBNP水平、常规生化指标、心脏彩超结果等,另根据CHF组患者的不同亚型将186例CHF患者分为HFpEF组(96例患者)、HFmrEF组(30例患者)和HFrEF组(60例患者),对比HFpEF组、HFmrEF组和HFrEF组患者血清25(OH)D3和PTH表达水平差异,并进行统计分析。结果:CHF组和对照组一般资料和常规生化指标等资料对比差异无统计学意义(P > 0.05);而CHF组和对照组在25(OH)D3、PTH以及NT-proBNP等资料对比差异有统计学意义(P 3表达水平与CHF疾病的发生呈负相关(r = −0.442, P r = 0.521, P 3表达水平明显低于HFpEF组和HFmrEF组,而PTH表达水平明显高于HFpEF组和HFmrEF组(P P > 0.05)。结论:25‐羟维生素D3和PTH表达水平与心衰严重程度密切相关。25‐羟维生素D3和PTH联合检测对CHF疾病的诊断及病情严重程度评估具有重要的临床意义。