2型糖尿病肾病患者血清Betatrophin 和25(OH)D水平的相关性研究

目的 探讨血清25-(OH)D、Betatrophin水平与2型糖尿病肾病的相关性。方法 选择2022年5—11月于南昌大学第二附属医院内分泌科就诊的96例2型糖尿病患者作为研究对象,依据尿微量白蛋白与血肌酐比值(ACR)评价肾脏情况,分为正常白蛋白尿组(A2组)22例、微量白蛋白尿组(A3组)35例、大量白蛋白尿组(A4组)19例三组。另选择同期本院20名健康体检者为健康对照组(A1组)。测量各组身高、体重、计算体质量指数(BMI)。检测各组血清25-(OH)D、Betatrophin、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血肌酐、白蛋白、谷丙转氨酶(ALT)、估计肾小球滤过率(eGFR)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿白蛋白/尿肌酐比值(UACR)等生化指标,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值、个体胰岛β细胞功能指标(HOMA-β)值,并分析25-(OH)D、Betatropnin与年龄、BMI、糖尿病病程、血肌酐、白蛋白、ALT、TG、TC、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、FPG、FINS、eGFR、UACR、糖化血红蛋白、HOMA-IR、HOMA-β等的相关性。结果 随着UACR增加,2型糖尿病患者的血清25-(OH)D水平逐渐下降(P<0.05),Betatrophin水平逐渐增加(P<0.05)。糖尿病合并异常白蛋白尿患者血清25-(OH)D水平与糖尿病病程、TG、TC、低密度脂蛋白、FPG、UACR、糖化血红蛋白呈负相关(P<0.05),与高密度脂蛋白、eGFR、HOMA-β呈正相关(P<0.05)。Betatrophin与高密度脂蛋白、eGFR、HOMA-β呈负相关(P<0.05),与糖尿病病程、血肌酐、TG、TC、低密度脂蛋白、FPG、UACR、糖化血红蛋白呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,25-(OH)D水平的主要影响因素为HbA1c、TG、ACR、BUN(P<0.05);Betatrophin影响因素主要有WHR、LDL-C、ACR、血肌酐(P<0.05)。结论 血清25-(OH)D、Betatrophin水平与糖尿病肾病(DN)的严重程度相关,可能参与了糖尿病肾病的发病过程。

1,25-(OH)_2 VitD_3对小鼠牙囊细胞分化的影响

目的:探讨1,25-(OH)2Vit D3对小鼠牙囊细胞向成骨细胞(成牙骨质细胞)分化能力的影响.方法:第3代小鼠牙囊细胞与10-8mol/L的1,25-(OH)2Vit D3共孵育3、5、7、9 d后,测定其对牙囊细胞增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphotase,ALP)活性、蛋白含量及骨钙素(osteocalcin,OC)表达的影响.结果:在5～7 d的时间范围内,1,25-(OH)2Vit D3能显著促进牙囊细胞的增殖(P＜0.05),在5～9 d内能提高ALP活性(P＜0.01),增加OC阳性细胞率(P＜0.05),但在9 d时能使总蛋白含量下降(P＜0.05).结论:1,25-(OH)2Vit D3能促进牙囊细胞的增殖及向成骨细胞方向分化,但对蛋白合成有抑制作用.

血清MIF、25-(OH)D_(3)、TLR2mRNA水平动态监测在活动性肺结核患者疾病转归评估中的应用价值

目的:探讨血清移动抑制因子(MIF)、25-羟维生素D_(3)(25-(OH)D_(3))、Toll样受体2(TLR2)mRNA水平动态监测在活动性肺结核患者疾病转归评估中的应用价值。方法:选取我院2019年3月-2021年5月收治且完成随访的118例活动性肺结核患者为研究对象,治疗6个月后随访6个月,根据疾病复发情况将患者分为复发组(17例)和未复发组(101例)。比较两组治疗前、治疗2、4、6个月后血清MIF、25-(OH)D_(3)、TLR2mRNA水平,分析血清MIF、25-(OH)D_(3)、TLR2mRNA水平与疾病转归相关性,偏回归分析影响肺结核患者疾病转归的危险因素,比较不同高低水平复发风险度。结果:复发组治疗2、4、6个月后血清MIF、TLR2mRNA水平高于未复发组,25-(OH)D_(3)水平低于未复发组(P<0.05);Spearman分析,治疗2、4、6个月后血清MIF、TLR2mRNA水平与疾病复发呈正相关,血清25-(OH)D_(3)水平与疾病复发呈负相关(P<0.05);Logistic分析显示,血清MIF、TLR2 mRNA、25-(OH)D_(3)水平为活动性肺结核患者疾病复发的独立危险因素(P<0.05);治疗后血清MIF、TLR2 mRNA高水平、血清25-(OH)D_(3)低水平的复发风险较高(P<0.05)。结论:动态监测血清MIF、25-(OH)D_(3)、TLR2mRNA水平变化对预测活动性肺结核患者疾病转归的状况存在指导效果。

1,25-(OH)_2-VD_3下调糖尿病肾病肾脏组织p38MAPK和胶原蛋白的表达

目的研究2型糖尿病肾间质纤维化中p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）、Ⅲ型胶原蛋白（Col3）和Ⅳ型胶原蛋白（Col4）表达，及1，25-（OH）2-VD3对其表达的影响；探讨p38MAPK与Col3和Col4表达的相关性。方法以高糖高脂饮食联合30mg／kg链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠2型糖尿病模型。将60只大鼠随机平均分为对照组、模型组、1，25-（OH）2-VD3治疗组[建模后给予6ng／（100g·d）1，25-（OH）2-VD3治疗]、胰岛素组（建模后给予2～3U胰岛素治疗）。干预8周后检测4组血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、24h蛋白尿水平；过碘酸希夫反应（PAS）染色观察肾脏病变情况；采用Western blot及免疫组织化学染色检测大鼠肾间质p38MAPK、CoD和Col4的表达；采用Spearman法进行相关性分析。结果与模型组相比，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组血清肌酐、尿素氮、24h蛋白尿和肾间质受损面积均降低；与对照相比，模型组p38MAPK、Col3和Col4水平增加，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组明显降低；相关性分析发现24h蛋白尿与p38MAPK、CoB和Col4免疫组织化学的结果呈正相关，p38MAPK的表达与Col3和Col4表达呈正相关。结论2型糖尿病大鼠肾间质组织p38MAPK、Col3和Col4表达上调，1，25-（OH）2-VD3可能通过p38MAPK下调Col3、Col4的表达改善糖尿病肾病肾组织纤维化。

25-(OH)VD与2型糖尿病患者的糖尿病肾病相关性研究

目的探讨25-(OH)VD与2型糖尿病患者的糖尿病肾病相关性。方法收集937例未接受维生素D补充治疗的2型糖尿病患者,测定各临床指标以分析糖尿病肾病的相关因素。结果与正常尿微量白蛋白组患者相比,微量或大量尿白蛋白组患者的25-(OH)VD水平较低且具有显著统计学差异。相关性分析显示,用性别和BMI作为校正指数,年龄、糖尿病病程、高血压病程、收缩压、糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮与尿微量白蛋白呈正相关,而25-(OH)VD水平与尿微量白蛋白呈负相关。结论 25-(OH)VD水平与2型糖尿病患者的尿微量白蛋白呈显著负相关。

1，25-(OH)2D3负向调节糖尿病模型大鼠血管紧张肽活性

目的研究1,25-(OH)2D3对糖尿病(DM)模型大鼠肾素-血管紧张肽-醛甾酮系统(RAAS)活性的影响及对肾小球足细胞的保护作用。方法将40只SD大鼠分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)灌注组(C组)、AngⅡ+1,25-(OH)2D3灌注组(D组)。B、C、D组均腹腔注射链脲菌素(STZ)制作DM大鼠模型。C组皮下埋置渗透性微量泵,给予AngⅡ400ng·kg-1·min-1;D组经两条渗透性微量泵通路分别给予AngⅡ(400ng·kg-1·min-1)+1,25-(OH)2D3(450ng·kg-1·min-1)。两组均连用10周。检测大鼠血糖(BG)、收缩压(SBP)、24h尿蛋白定量(TP)和肾素活性(PRA)、血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)和醛甾酮(Ald)水平。检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白podocalyxin以检测尿液足细胞(UPC)水平,免疫荧光染色观察肾小球上皮细胞蛋白-1(GLEPP1)的分布。结果B组BG、SBP、UPC、TP、PRA、AngⅡ、Ald均较A组明显升高。C组SBP、UPC、TP、PRA、AngⅡ、Ald较B组均明显升高(P<0.05或P<0.01)。D组SBP、UPC、TP、AngⅡ、Ald较C组明显降低,D组AngⅡ较B组明显降低。病理组织肾小球荧光染色示A组GLEPP1正常分布,C组呈明显缺失,B和D组亦缺失。UPC与TP、AngⅡ呈正相关(rs=0.51,0.35,P<0.01,P<0.05)。结论1,25-(OH)2D3可能是RAAS的负向调节因子,通过下调RAAS活性,防止足细胞脱落排泄介导其肾保护作用。

新诊断的2型糖尿病患者血清25-(OH) D水平与体脂分布的相关性分析

目的 探讨新诊断2型糖尿病患者体内血清25-（OH）D水平与体脂分布的相关性.方法 选择年龄40～60岁上海奉贤区常住居民460人,进行问卷调查、查体、生化指标、血清25-（OH）D和体脂成分等指标测定,筛查新诊断2型糖尿病患者、糖耐量正常者及25-（OH）D缺乏者.比较新诊断2型糖尿病患者与糖耐量正常者的体质量指数（BMI）、腰臀比、生化指标等临床特征及体脂分布情况;比较25-（OH）D缺乏者与无25-（OH）D缺乏者的BMI、腰臀比、生化指标等临床特征及体脂分布情况.采用Pearson相关系数评价各指标与血清25-（OH）D的相关性,采用Logistic回归分析方法分析25-（OH）D缺乏的独立危险因子.结果 共筛查出新诊断2型糖尿病患者62例、糖耐量正常者100例.新诊断2型糖尿病患者中25-（OH）D缺乏48例,糖耐量正常者中25-（OH）D缺乏70例.与糖耐量正常者相比,新诊断2型糖尿病患者BMI、腰围、腰臀比、体脂百分比、糖化血红蛋白（HbA1C）、HOMA-IR均增高（P＜0.05）.与无25-（OH）D缺乏者相比,25-（OH）D缺乏者去脂体质量、骨骼肌含量、右上肢肌肉含量、躯干肌肉含量、右下肢肌肉含量、左下肢肌肉含量明显降低（P＜0.05）,体脂百分比水平增高（P＜0.05）.血清25-（OH）D水平与体脂百分比、去脂体质量、骨骼肌含量、右上肢肌肉含量、躯干肌肉含量、右下肢肌肉含量、左下肢肌肉含量显著相关（P均＜0.05）.Logistic多元回归分析示体脂百分比、躯干肌肉含量是预测血清25-（OH）D水平的独立影响因子.结论 体脂百分比影响新诊断2型糖尿病患者血清25-（OH）D水平.维持体内血清25-（OH）D及体脂分布的恰当水平对2型糖尿病及糖耐量正常者有益.

肥胖大鼠白色脂肪组织中PPAR_γ、UCP2基因与血清1_α,25-(OH)_2-D_3的相关性研究

目的:探讨高脂饮食诱导下肥胖大鼠白色脂肪组织(whiteadiposetissue,WAT)中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-γ,PPARγ)、解偶联蛋白2(uncouplingprotein2,UCP2)基因与血清1α,25-(OH)2-D3的相关性。方法:①36只SD大鼠,标准饲料平衡1周后,随机分成2组,肥胖组和标准对照组,分组后分别用高脂饲料和标准饲料继续饲养6周;②采用ELISA方法测定血清1α,25-(OH)2-D3;③RT-PCR技术分析WAT中PPARγ和UCP2基因mRNA的表达水平。结果:①肥胖组大鼠的体重增值高于标准对照组(P<0.05),提示肥胖模型制备成功。②肥胖大鼠血清1α,25-(OH)2-D3低于标准对照组(P<0.05)。③WAT中PPARγ和UCP2mRNA表达均高于标准对照组(P<0.05)。结论:肥胖大鼠WAT中PPARγ诱导UCP2高表达,1α,25-(OH)2-D3与UCP2mRNA表达趋势相反。

地塞米松和1,25-(OH)_2D_3对EC1细胞增殖和细胞周期的影响

目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况及流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:1,25-(OH)2D3单独应用具有抑制EC1细胞增殖的作用(F1,25-(OH)2D3=51.185,P<0.001);DEX单独应用具有阻滞细胞周期的作用(FDEX=8.170,P=0.009)。DEX、1,25-(OH)2D3及时间3种因素两两间均存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX=11.017,P=0.003;F1,25-(OH)2D3×时间=3.668,P=0.041;FDEX×时间=7.887,P=0.002。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX=12.381,P=0.002;F1,25-(OH)2D3×时间=6.583,P=0.005;FDEX×时间=5.096,P=0.014),且两药间提示存在拮抗作用。未发现3因素之间存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.512,P=0.606。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.410,P=0.668)。结论:DEX和1,25-(OH)2D3单独及联合使用能对EC1细胞增殖起抑制作用,且使EC1细胞周期阻滞在G0/G1期。

地塞米松及1α-25-(OH)_2-D_3体外诱导致耐受树突状细胞的特性

目的探讨地塞米松及1α-25-(OH)2-D3体外诱导致耐受树突状细胞的特性。方法用地塞米松及1α-25-(OH)2-D3诱导CBA/Ca小鼠骨髓来源的树突状细胞,加或不加脂多糖,观察不同树突状细胞的形态学特点,流式细胞仪检测免疫表型,ELISA法检测IL-12p70、IL-10细胞因子分泌,测定不同树突状细胞刺激异基因淋巴细胞增殖能力。结果地塞米松及1α-25-(OH)2-D3诱导的小鼠树突状细胞毛刺少,CD80、CD86水平低,IL-12p70水平降低(P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05),刺激异基因淋巴细胞增殖能力受损。结论地塞米松及1α-25-(OH)2-D3体外诱导树突状细胞符合致耐受树突状细胞的特点,为其应用于自身免疫性疾病的治疗提供了理论依据。

1,25-(OH)_2-D_3对进展性肾炎大鼠肾小管间质胶原蛋白Ⅲ表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2-D3对进展性肾炎大鼠肾小管间质胶原蛋白Ⅲ(ColⅢ)表达的影响。方法将实验动物按随机数字表法分为3组(n=7):假手术组(对照组)、进展性肾炎组(模型组)、6 ng/(100 g·d)1,25-(OH)2-D3干预组(治疗组)。除对照组外,其余组均采用右肾切除并2次注射IgG(OX-7)鼠抗人Thy1.1单克隆抗体,制备进展性肾炎大鼠模型。1,25-(OH)2-D3干预8周后,检测各组大鼠24 h尿蛋白、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及电解质的变化,Masson染色观察肾组织病理改变。免疫组织化学检测肾小管间质ColⅢ的表达。结果与模型组比较,1,25-(OH)2-D3治疗不仅使大鼠24 h尿蛋白及BUN均明显降低(P<0.05),还能使ColⅢ表达显著下调(P<0.05)。肾组织病理损害明显减轻。结论 1,25-(OH)2-D3可能通过明显降低进展性肾炎大鼠肾小管间质ColⅢ的表达,减轻肾小管间质纤维化而发挥肾脏保护作用。

1,25-(OH)_2D_3治疗肺纤维化的动物实验研究

目的观察1,25-(OH)2D3对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法将C57BL/6雄性小鼠110只分为对照组(n=30),模型组(n=40),干预组(n=40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3.5mg/kg)气管内滴入构建肺纤维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0.5μg/kg灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模第7、14、28天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,在第28天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果造模第7和14天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28天,干预组小鼠肺纤维化评分低于模型组(P<0.05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P<0.05)。结论 1,25-(OH)2D3可减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。

2型糖尿病患者血清25-(OH)D水平与体脂分布的相关性分析

目的探讨2型糖尿病患者血清25-(OH)D水平与体脂分布的相关性。方法选取2014年3月至2014年10月在我科住院的2型糖尿病患者86例,其中绝经后女性62例,50岁及以上男性24例,对其临床基本资料及生化指标、血清25-(OH)D和体脂成分等进行测定。按血清25-(OH)D水平分为不同的亚组,即严重缺乏组(25例)、缺乏组(44例)、不足组(17例),比较各组体脂分布是否存在差异。采用Pearson相关系数评价各体脂指标的相关性。采用多元逐步线性回归方法分析血清25-(OH)D等指标与体脂指标的相关性。结果 25-(OH)D严重缺乏组个体其内脏脂肪与皮下脂肪的比值(VAT/SAT)高于25-(OH)D不足组(P<0.05),25-(OH)D缺乏组个体其BMI高于25-(OH)D不足组(P<0.05)。VAT/SAT与腹臀比、躯干脂肪质量/四肢脂肪质量、躯干脂肪百分比/腿部脂肪百分比均显著相关(P值均<0.05)。BMI与除外VAT/SAT的其余各体脂指标均显著相关(P值均<0.05)。多元逐步线性回归分析示绝经后女性患者血清25-(OH)D水平与VAT/SAT显著相关(P<0.01)。结论 2型糖尿病患者血清25-(OH)D水平与体脂分布相互关联,且绝经后女性患者更为显著。

25-（OH）D3与糖尿病周围神经病变的相关性

目的:分析25-(OH)D3与糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的相关性,评价其在DPN中的诊断价值。方法:选取2017年11月至2018年8月于柳州市人民医院内分泌科住院的2型糖尿病患者148例作为研究对象,依据神经电生理(nerve electrophysiology,NET)检查结果分为DPN组与非DPN组。148例2型糖尿病患者血清25-(OH)D3在10.81~43.09 nmol/L,根据25-(OH)D3四分位数,将2型糖尿病患者分为4组,即A组[25-(OH)D3<13.82 nmol/L)]、B组[13.82 nmol/L≤25-(OH)D3<21.42 nmol/L]、C组[21.42 nmol/L≤25-(OH)D3<34.91 nmol/L]、D组[25-(OH)D3≥34.91 nmol/L]。分析各组血清25-(OH)D3水平,神经运动神经传导速度(motornerve conduction velocity,MCV)、腓肠感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity,SCV)、神经F波潜伏期、运动传导波幅变化。结果:DPN组、非DPN组25-(OH)D3水平分别为(35.08±2.89)nmol/L,(41.24±3.42)nmol/L,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);运动传导波幅在A组、B组、C组及D组四组中两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);A组神经潜伏期明显高于其他3组,腓肠神经SCV明显低于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);B组与C组神经潜伏期明显高于D组(P<0.05)。A组、B组、C组及D组DPN发生率分别为86.49%,54.05%,48.65%及27.03%,A组、B组和C组DPN发生率明显高于D组(P<0.05);B组和C组DPN发生率明显高于D组(P<0.05)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)分析结果显示血清25-(OH)D3水平诊断DPN曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.642 (95%CI 0.581~0.796),最佳临界诊断值为13.45 nmol/L。结论:血清25-(OH)D3水平可作为预测DPN程度的指标。

探讨缺乏25-(OH)2D3与儿童相关疾病性

目的 通过检测维生素25-(OH)2D 3血清水平,观察与儿童呼吸道感染和佝偻病发病的关系。方法 化学发光法检测儿童呼吸道感染性疾病和佝偻病的25-(OH)2D 3水平。结果 呼吸道感染性疾病组和佝偻病组患儿血清25-(OH)2D 3水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 当25G(OH)2D3缺乏时,儿童易患上呼吸道感染性疾病及佝偻病和维生素D缺乏症.

白介素-6与1,25(OH)_2维生素D_3联合作用下大鼠骨髓破骨细胞的体外诱导培养

目的观察联合应用白介素(IL)-6和1,25(OH)2D3对大鼠骨髓破骨细胞生成诱导的影响。方法采用4周龄SD大鼠无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以α-MEM培养液将骨髓细胞冲出,然后将细胞悬液接种于预置盖玻片或牙本质片的24孔培养板内,24 h后换液。试验分为4组,A组:不加任何诱导因子;B组:加入IL-6(10 U/ml);C组:加入1,25(OH)2D3(1×10-8mol/L);D组:加入IL-6(10 U/ml)和1,25(OH)2D3(1×10-8mol/L)。每组各6孔,于培养的第7天进行多核细胞计数。结果培养1周左右IL-6与1,25(OH)2D3在体外均可单独诱导骨髓破骨细胞的形成,但D组多核细胞数与B、C组相比差异有显著性(P<0.05)。结论IL-6与1,25(OH)2D3联合作用下对骨髓破骨细胞生成的诱导效果明显高于单因素诱导效果。

原发性胆汁性胆管炎25-(OH)维生素D、AMA-M2、ALP、IgM相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎与25-(OH)维生素D、抗线粒体抗体M2(AMA-M2)、碱性磷酸酶(ALP)、免疫球蛋白M(IgM)间的相关性。方法收集2018年1月至2019年12月28例本院原发性胆汁性胆管炎患者(A组)、20例肝硬化患者(B组)、20例健康体检(C组)进行研究,均检测抗线粒体抗体、25-(OH)维生素D、IgM、ALP等指标,对比研究分析检验结果。结果①A组AMA、AMA-M2阳性率高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。②三组受检者间25-(OH)维生素D、IgM、ALP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);A组与B组间AST水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性胆汁性胆管炎与25-(OH)维生素D、AMA-M2、ALP、IgM间有着密切关系,联合检测比单一的指标检测,能更好地为临床争取早期诊断、治疗,提供新的思路和科学依据,建议临床推广应用。

1，25-(OH)_2D_3对体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞转化率及γ-干扰素(IFN-γ)的影响

体外培养围产期奶牛外周血淋巴细胞,分别添加0、0.01、0.1、1、10和100nM的1,25(OH)_2D_3,研究1,25-(OH)_2D_3对奶牛外周血淋巴细胞免疫功能的影响。结果表明,1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞转化率没有影响,但可以通过抑制IFN-γ的分泌影响奶牛的细胞免疫功能。添加0.01～100nM的1,25-(OH)_2D_3对淋巴细胞的转化率没有显著影响,但剂量依赖性抑制了ConA和PWM诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。当1,25(OH)_2D_3浓度达到0.1nM、1nM时与对照组相比分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)抑制ConA诱导的淋巴细胞IFN-γ的产量。以PWM激活的细胞在培养48h、72h,1,25-(OH)_2D_3添加量在0.1～100nM范围均极显著抑制IFN-γ的产生(P<0.01)。添加0.01nM 1,25(OH)_2D_3对IFN-γ的抑制作用相对较小(P>0.05),在培养48h后并未表现出显著的抑制作用,但培养72h后也极显著的抑制了IFN-γ的产生(P<0.01)。

血清25-(OH)VD3、Th1和Th2类细胞因子及免疫球蛋白在儿童肺炎中的检测价值研究

目的:探究血清25-(OH)VD_(3)、Th1和Th2类细胞因子及免疫球蛋白在儿童肺炎中的检测价值。方法:选取2020年1月-2021年5月本院60例肺炎患儿为观察组,另选取同时期本院30名体检健康儿童为对照组。比较两组的血清25-(OH)VD_(3)、Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2及TNF-α)、Th2类细胞因子(IL-6及IL-10)及免疫球蛋白(IgA、IgG及IgM);比较观察组中不同严重程度者的上述指标,并采用Spearman秩相关系数分析上述指标与肺炎患儿严重程度的关系。结果:观察组血清25-(OH)VD_(3)与IgA均低于对照组,血清IgM高于对照组(P<0.05),而两组血清IgG比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组中不同严重程度者血清25-(OH)VD_(3)、IgA、IgM比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。严重程度越高者血清25-(OH)VD_(3)与IgA越低,IgM越高(P<0.05)。观察组中不同严重程度者IgG比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组的血清Th1、Th2类细胞因子均高于对照组P<0.05)。观察组中不同严重程度者血清Th1、Th2类细胞因子比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。严重程度越高者血清Th1、Th2类细胞因子越高(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,血清25-(OH)VD_(3)及IgA与肺炎患儿严重程度呈负相关,血清Th1、Th2类细胞因子及IgM与肺炎患儿严重程度呈正相关(P<0.05)。结论:血清25-(OH)VD_(3)、Th1和Th2类细胞因子及免疫球蛋白在儿童肺炎中的检测价值较高,对于疾病严重程度有一定的反映意义。

液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)和酶联免疫法(ELISA)对体内25(OH)D3水平的测定

目的同时用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)和酶联免疫法(ELISA)检测患者体内25(OH)D3水平,分析两者结果的差异。方法随机选取50例住院患者,对同一血清样本分别用LC-MS/MS法和ELISA法测定25(OH)D3水平,同时用LC-MS/MS法测定25(OH)D2的水平。结果 LC-MS/MS法测定的维生素D3的均数为14.99±6.51 ng/mL,酶联免疫法测定的均数为20.91±9.70 ng/mL,两者的相关系数为0.725(P<0.01),线性相关方程为维生素D3(LC-MS/MS法)=4.829+0.486×维生素D3(ELISA法)。LC-MS/MS法组25(OH)D3浓度高于20 ng/mL的比例17%,酶联免疫法组为52%,LC-MS/MS法组的25(OH)D2和25(OH)D3总浓度高于20 ng/mL的为24%。25(OH)D2占25(OH)D总量的8.4%。结论 LC-MS/MS法测定的维生素D3的数值明显低于ELISA法,两者正相关性较高,可经方程互换。酶联免疫法低估了体内维生素D的缺乏,检测25(OH)D3的同时需测定25(OH)D2浓度。